本发明公开了一种P450酶突变体、编码基因及其在制备皮质醇中的应用，属于生物工程技术领域。所述P450酶突变体是氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的智人来源CYP11B1通过氨基酸突变所得，氨基酸突变的位点为S146V、H331D、L440F中的至少一个。本发明提供的P450酶突变体相对野生型CYP11B1在大肠杆菌中具有更高的可溶性表达水平，构建的重组表达菌株的催化水平更高，可以以11‑脱氧皮质醇为底物制备皮质醇，产物的产率高，无副产物产生，具有很好的工业化应用前景。
本发明涉及基因工程和酶工程领域，尤其涉及一种活不动杆菌中烷烃单加氧酶编码基因、编码蛋白及其应用。所述烷烃单加氧酶编码基因来源于活不动杆菌，保藏编号为CGMCC No.20664;所述烷烃单加氧酶编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次体外表达了活不动杆菌KJ‑1来源的烷烃‑1‑单加氧酶的基因序列，以助于研究该蛋白的功能以及调控机制，对于今后石油烃等污染物场地生物修复机制研究具有重要的意义；本发明提供了一种石油烃降解酶烷烃‑1‑单加氧酶，其耐酸性好，温度适宜范围广，可在大肠杆菌中实现高效表达，具有重要的工业应用价值。
本发明公开了一种古柯芽子酮合成酶EnES及其基因和应用。其中，EnES氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。经酿酒酵母表达的蛋白能够催化4‑(1‑甲基‑2‑吡咯)‑3‑氧代丁酸生成芽子酮或托品酮。该产物是植物体内生物合成以及体外化学合成莨菪碱、可卡因等托品烷生物碱的重要中间体。本发明的芽子酮合成酶可作为元件用于托品烷生物碱的合成生物学，以及生物合成路径中涉及芽子酮或托品酮的天然产物的代谢工程，为合成生物学提供基本元件。
本发明公开了一种烯还原酶突变体、工程菌及在不对称还原(E/Z)‑柠檬醛合成(R)‑香茅醛中的应用，所述烯还原酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第103位和第351位进行定点突变获得的。本发明利用突变体CtOYE‑Y351Q/W103E为生物催化剂，以NADP+为辅酶，以葡萄糖脱氢酶和D‑葡萄糖构建辅酶循环系统，成功构建双酶级联催化不对称合成光学纯(R)‑香茅醛的反应体系。使其对映体选择性提高至99％(R)，克服了野生型CtOYE‑wt对(E/Z)‑柠檬醛的低的对映体选择性。
本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种微泡菌超氧化物歧化酶SOD及其编码基因。所述超氧化物歧化酶SOD具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其编码基因具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。生产所述超氧化物歧化酶SOD的方法包括以下步骤：在适合于所述超氧化物歧化酶SOD生产的条件下，对携带有上述能表达超氧化物歧化酶SOD的培养物进行发酵，收获表达产物，得到超氧化物歧化酶SOD。本发明所获得的超氧化物歧化酶具有良好的酶学性质，可以应用于制备饲料添加剂、食品添加剂。
本发明涉及一种Baeyer‑Villiger单加氧酶及其在布立西坦合成中的应用。所述Baeyer‑Villiger单加氧酶优选选自具有具有SEQ ID No:1、SEQ ID No:2、SEQ ID No:3、SEQ ID No:4或SEQ ID No:5所示氨基酸序列的多肽中的任意一种。经本发明的Baeyer‑Villiger单加氧酶催化，能够经济高效、绿色环保地合成(R)‑4‑丙基‑二氢呋喃‑2‑酮，在此基础上经一步反应即可制备高光学纯度的布立西坦原料药。本发明提供的制备布立西坦路线避免了传统工艺中所用到的手性拆分和繁琐的分离提纯，适用于工业生产，具备显著的成本优势。
