本发明属于农业生物技术领域，具体涉及一种毛栓孔菌漆酶基因的克隆、重组漆酶的制备以及重组漆酶在水稻秸秆产糖中的应用。本发明公开了一种来自毛栓孔菌MX2的漆酶基因LacF，DNA序列如SEQ ID No：1所述。本发明还同时公开了漆酶基因LacF的克隆方法、重组漆酶工程菌的制备方法。本发明的重组漆酶的用途是：用于水稻秸秆产糖。
本申请公开了生物技术领域的一种细胞色素P450单加氧酶P450PL2突变体及其应用。本发明通过迭代饱和突变的技术手段对来源于食清洁剂细小杆菌DS‑1的P450PL2酶进行多轮定向改造，得到了不对称羟基化活性提高的P450PL2突变体，其对应的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。该P450PL2突变体可应用于催化芳基酮化合物不对称羟基化合成S构型手性α‑羟基酮化合物。此反应具有严格的区域选择性和立体选择性，操作过程简单，高效。
本发明涉及应用微生物与酶工程领域，尤其是一种酮还原酶、酮还原酶突变体及其编码基因和应用；所述酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；酮还原酶基因用于编码所述酮还原酶，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述酮还原酶突变体的氨基酸序列如SEQ IDNO.3所示，酮还原酶突变体基因用于编码所述的酮还原酶突变体，其核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示。本发明中的酮还原酶及其突变体来源于乳酸假单胞菌(Pseudomonas lactis)，其催化不对称还原制备度洛西汀中间体中的底物浓度达到80g/L，手性纯度值大于99％，具有较高的工业化应用潜力。
本发明公开了一种甾体羟化酶的突变体、重组酵母菌株、底物及应用，涉及基因工程领域，甾体羟化酶的突变体包括突变体L1或/和突变体L2，突变体L1的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示，突变体L2的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：5所示。重组酵母菌株由突变体L1或/和突变体L2导入酿酒酵母得到。甾体羟化酶的底物为甾体化合物17α‑羟孕酮。甾体羟化酶的突变体、重组酵母菌株、底物在催化甾体C11β位羟化的应用。本发明通过改变底物类型和/或酶工程对甾体羟化酶改造获取高专一性11β羟化产物。
本发明公开了一种异丁香酚单加氧酶突变体、工程菌及应用，属于生物技术领域。异丁香酚单加氧酶基因来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida)，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述突变体是在SEQ ID NO：2所示氨基酸序列59位、第216位、第304位发生单突变或多位点突变获得的。本发明构建的异丁香酚单加氧酶并构建工程菌株，筛选到的突变体酶活较原始最高提高445.7％，并用于对羟基苯甲醛的酶法合成，产物浓度最高可达1.27g/L，转化率最大可达41.6％。
本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种毛竹花青素还原酶基因PeANR4、提取方法及其应用。该基因PeANR4，编码如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明首次发现该基因PeANR4具有促进植物生长、提高植株抗旱与抗盐能力的功能，将毛竹花青素还原酶基因PeANR4导入拟南芥中进行验证，得到转基因拟南芥植株较野生拟南芥植株的生长量大幅增加，植株抗旱与抗盐能力大幅提高。
本发明属于生物催化合成手性化合物技术领域，涉及酮胺化还原酶在合成手性普拉克索中的应用及合成方法。本发明提供了酮胺化还原酶在合成手性普拉克索中的应用，所述酮胺化还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明发现了不对称合成普拉克索能力的酶，并利用酮胺化还原酶合成了手性普拉克索，本发明所述应用操作简单，在生物合成手性普拉克索技术领域具有广泛的工业应用前景，对手性化合物合成方法的探究和生物合成酶源的发掘具有重要的意义。
