本发明公开了一种蚯蚓细胞色素P450基因及其编码的蛋白，本发明涉及的蚯蚓细胞色素P450蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.16所示；本发明涉及的编码如权利要求所述蚯蚓细胞色素P450蛋白的基因的CDS本发明用赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)，依据细胞色素P450基因的保守序列和与蚯蚓比较接近的线性动物门的P450序列设计引物，通过RT‑PCR扩增出一条蚯蚓P450基因片段。根据此基因片段设计特异引物，使用RACE‑PCR的方法扩增其未知的序列片段；获得了一条蚯蚓细胞色素P450的全长基因序列。预测其表达的蛋白含有细胞色素P450的特征序列，具有其他动物P450蛋白的基本结构与解毒功能，可对进入体内的外源性化合物进行生物转化，对机体具有保护作用。
本发明公开了一种食蟹猴P450 2E1药物代谢酶及其与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达的重组载体。食蟹猴P450 2E1药物代谢酶能催化氯唑沙宗的6’－羟基化，其基因序列或其互补序列是与SEQ ID NO：1的突变率为0－1％的序列。食蟹猴P450 2E1药物代谢酶与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体包含食蟹猴的P450 2E1药物代谢酶序列的开放阅读框和食蟹猴的P450氧化还原酶序列的开放阅读框。食蟹猴的P450氧化还原酶的序列或其互补序列如SEQ ID NO：2。本发明异源表达的蛋白仅代表食蟹猴P450 2E1亚型，其系统更接近于食蟹猴体内代谢的真实情况。
本发明公开了一种食蟹猴P450 2C18药物代谢酶及其与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体。食蟹猴的P450 2C18药物代谢酶能催化吡罗昔康的羟基化，其基因序列或其互补序列是与SEQ ID NO：1的突变率为0－1％的序列。食蟹猴P450 2C18药物代谢酶与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体包含食蟹猴的P450 2C18药物代谢酶序列的开放阅读框和食蟹猴的P450氧化还原酶序列的开放阅读框。食蟹猴的P450氧化还原酶的序列或其互补序列如SEQ ID NO：2。本发明异源表达的蛋白仅代表食蟹猴P450 2C18亚型，其系统更接近于食蟹猴体内代谢的真实情况。
本发明公开了一种食蟹猴P450 2C9药物代谢酶及其与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体。食蟹猴P450 2C9药物代谢酶能催化双氯芬酸的4’－羟基化、甲苯磺丁脲的4’－羟基化和华法林的7’－羟基化；其基因序列或其互补序列是与SEQ ID NO：1的突变率为0－1％的序列。食蟹猴P450 2C9药物代谢酶与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体包含食蟹猴的P450 2C9药物代谢酶序列和食蟹猴P450氧化还原酶序列的开放阅读框。食蟹猴P450氧化还原酶的序列或其互补序列如SEQ ID NO：2。本发明异源表达的蛋白仅代表食蟹猴P450 2C9，其系统更接近于食蟹猴体内代谢的真实情况。
本发明公开了一种食蟹猴P450 2B6药物代谢酶及其与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体。食蟹猴P450 2B6药物代谢酶能催化盐酸丁氨苯丙酮的羟基化与3－甲基苯乙妥因的N端脱甲基，其基因序列或其互补序列是与SEQ ID NO：1的突变率为0－1％的序列。食蟹猴P450 2B6药物代谢酶与食蟹猴P450氧化还原酶的共表达重组载体包含食蟹猴的P450 2B6药物代谢酶序列的开放阅读框和食蟹猴的P450氧化还原酶序列的开放阅读框。食蟹猴的P450氧化还原酶的序列或其互补序列如SEQ ID NO：2。本发明异源表达的蛋白仅代表食蟹猴P450 2B6亚型，其系统更接近于食蟹猴体内代谢的真实情况。
本发明公开了一种重组细胞色素P450酶，重组细胞色素P450酶所编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还同时提供了由上述重组细胞色素P450的编码基因构建的重组载体，为质粒pET28b(+)‑细胞色素P450。本发明还同时提供了上述重组细胞色素P450的用途：降解二氯甲烷、1,2‑二氯乙烷，具有特异性和广谱性。
