本发明提供了抗除草剂突变蛋白、核酸及其应用，具体地，提供了抗除草剂基因、多肽及其在植物育种中的应用，具体地，本发明提供了一种突变的HPPD多肽，并且所述突变的HPPD多肽与亲本HPPD多肽相比，在对应于SEQ ID NO.1的第176位氨基酸发生突变。突变后的HPPD多肽对除草剂具有很强的耐受性，在提高和培育抗HPPD抑制性除草剂耐受性植物领域中具有非常广阔的应用前景。
本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及番茄干旱响应基因FMO1及其编码蛋白与应用。该基因的cDNA序列全长如SEQ ID NO.1或者SEQ ID NO.3所示，其编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2或者SEQ ID NO.4所示。本发明从番茄cDNA中克隆得到全长的FMO1，分别构建超量表达(OE)载体和RNAi抑制表达(Ri)载体，通过农杆菌介导的遗传转化的方法将其成功转入干旱敏感番茄M82(Solanum lycopersicum cv.M82)中。通过对转基因植株进行表型鉴定和生理生化分析，发现抑制表达FMO1可以显著提高番茄的耐旱能力，超量表达使其更加敏感。
本发明公开了一种甘薯黄酮醇合成酶IbFLS1及其编码基因与应用。所述的IbFLS1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，编码基因如SEQ ID NO：1所示。本发明的IbFLS1蛋白及其编码基因可调控植物黄酮醇的合成，将编码IbFLS1蛋白的DNA分子导入目的植物，能够得到黄酮醇积累量增加的转基因植物。本发明提供的IbFLS1蛋白及其编码基因在提高植物黄酮醇含量方面具有重要的理论意义与应用价值，为转基因植物的培育奠定了基础。
本发明公开了一种脱氢酶突变体及利用其制备甲泼尼龙脱氢物的方法。所述脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述脱氢酶突变体为在如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列上具有选自以下一个或多个位点的氨基酸残基的差异：第315位、第330位或第452‑463位。利用所述脱氢酶突变体制备甲泼尼龙脱氢物的方法包括以下一种或多种步骤：将包含所述脱氢酶突变体的酶液或纯酶与甲泼尼龙格氏物混合；pH 7.5，35℃中反应，并搅拌。本发明提供的方法具有反应体系简单，转化周期短，副反应少，成本低等优点。
本发明公开了一种4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体及其应用，所述4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体由大肠杆菌(Escherichia coli)来源的野生型4HPA3H酶经过突变所得，野生型4HPA3H酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，突变方式为以下一种：(1)G209F；(2)A298F；(3)G209F/A298F。本发明4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体，其中G209F、A298F两种突变体全细胞催化白藜芦醇活性相对于WT提高了2.05和1.43倍，同时将两个位点进行叠加所得的突变体G209F/A298F全细胞催化白藜芦醇活性相较于WT提高了1.46倍。
本发明公开了一种细胞色素P450单加氧酶CYP109B2及其应用，所述CYP109B2的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明首次从索诺拉沙漠芽孢杆菌Bacillus sonorensis中克隆获得了一个新的细胞色素P450单加氧酶CYP109B2蛋白酶基因，并以pRSFDuet‑1作为表达载体，大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主细胞实现了该蛋白酶的异源表达，发现该蛋白酶能够对甾体化合物的16β位进行高效选择性的羟基化修饰，为甾体化合物的定点羟基化修饰和甾体羟基化产物合成提供了新思路，且催化效率高、经济环保。
本发明公开了一种参与苄基异喹啉类生物碱生物合成的羟化酶及其应用，涉及药用植物基因工程领域，氨基酸序列为SEQ ID NO.1，或其经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有羟化酶功能的蛋白质；或与其具有90％或90％以上同一性，且具有羟基化苄基异喹啉类生物碱的蛋白质；其重组表达载体、重组微生物；该酶和还原酶StCPR组成的酵母体系，该羟化酶及其重组表达载体在异源表达的StCYP80B蛋白体外合成、重组微生物和该酵母体系在体内合成苄基异喹啉类化合物中的应用。本发明提供的羟化酶StCYP80B，扩大了底物识别范围，是羟基化不同结构单苄基异喹啉类生物碱的有效酶促工具。
