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[发明专利]一种iPS细胞培养上清液及其制备方法和应用-CN201911150317.2在审
发明人：王琳;刘扬;王金佩;杨力侠;邢书娟;董明清 -专利权人：西安外事学院
申请日： 2019-11-21 - 公布日： 2020-01-24 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种iPS细胞培养上清液及其制备方法和应用，本发明通过一定速率浓缩收集iPS细胞培养的上清液，对人皮肤成纤维细胞具有显著促生长作用，并利用其他药物联合应用于损伤修复，既能利用干细胞提供长期有效的细胞来源，又能特异性的修复人体组织，旨在将两者修复过程作用的最大化。
人皮肤成纤维细胞制备方法和应用修复培养上清液过程作用人体组织损伤修复细胞来源药物联合促生长干细胞上清液最大化浓缩应用

[发明专利]LGR5+体干细胞-CN201380063219.X有效
发明人：詹姆斯·王 -专利权人：干细胞生物科技公司
申请日： 2013-12-05 - 公布日： 2020-01-21 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明揭示尺寸为2至小于6微米且为Lgr5+的分离体干细胞。本发明也揭示制备并使用该细胞的方法。
lgr5 干细胞

[发明专利]干细胞生物活性组合物及其制备方法与应用-CN201610097537.3有效
发明人：裴雪涛;南雪;单紫筠;贾茜媛;吕洋;李静;姚海雷;岳文 -专利权人：华南生物医药研究院
申请日： 2016-02-22 - 公布日： 2020-01-14 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种干细胞生物活性组合物及其制备方法与应用，所述干细胞生物活性组合物含有1.69‑22.24pg/mL EGF、2443.17‑4459.43pg/mL bFGF、1.44‑134.36pg/mL beta‑NGF、1.55‑355.14pg/mL VEGF、11.87‑159.70pg/mL PDGF‑DD、135.79‑688.13pg/mL KGF、1176.99‑3825.79pg/mL TGF‑β1，所述干细胞生物活性组合物具有高纯度、高产量、高生物活性。
干细胞生物活性组合及其制备方法应用

[发明专利]一种高纯度猪肌肉干细胞的分离纯化方法-CN201910939799.3在审
发明人：周光宏;丁世杰;朱浩哲;李春保;徐幸莲 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2019-09-30 - 公布日： 2019-12-31 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于培养肉研究和生产的高纯度猪肌肉干细胞分离纯化方法。本发明的分离纯化方法包括获取无菌的肌肉组织，高效率的消化肌肉组织以得到大量的肌肉单核细胞以及最终通过流式细胞分选获得高纯度的猪肌肉干细胞。本发明进一步公开了如何高效率消化猪肌肉组织的方法，可以提高消化速度和强度，获得大量的肌肉单核细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得纯度超过92％(以PAX7计)的猪肌肉干细胞。分离得到的猪肌肉干细胞拥有高效的分化效率，MYOSIN的表达量达到85％‑90％。应用本发明的方法，可以为培养肉研究和实际生产提供大量的种子细胞来源。
猪肌肉干细胞单核细胞肌肉组织高纯度高效率消化肌肉流式细胞分选种子细胞来源干细胞分离分离纯化表达量无菌应用分化研究生产

[发明专利]一种人母乳干细胞的制备方法及其应用-CN201710092955.8有效
发明人：姜舒;张芸;纪惜銮;杨顺;罗朝霞 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2017-02-21 - 公布日： 2019-12-27 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供了一种人母乳干细胞的制备方法及其应用，其中的制备方法包括以下步骤：采集母乳；分离人母乳细胞，得到纯化后的母乳细胞悬液；将纯化后的母乳细胞悬液转移到包被体积百分比为0.01‑0.05%的明胶的培养板中，置于CO
一种母乳干细胞制备方法及其应用

[发明专利]一种用于培养肝源性干细胞的试剂盒-CN201611082265.6有效
发明人：张晓南;吴芳春;陈虎;张斌;侍晓云 -专利权人：张晓南
申请日： 2016-11-30 - 公布日： 2019-12-24 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种用于培养肝源性干细胞的试剂盒，其内设有若干试剂瓶，若干所述试剂瓶内分别盛装有培养液、培养基添加剂、生长因子I、生长因子II、消化液、清洗液、冻存液和细胞种子。本发明提供的试剂盒可以对肝源性干细胞进行培养扩增和冷冻保存，解决了肝源性干细胞培养培养效率低、培养批次间差别大、冻存保存后复活率不理想等问题，使肝源性干细胞在理想营养平衡状态下进行高效扩增，大大节约了培养扩增的时间，非常适用于培养肝源性干细胞，为利用肝源性干细胞进行进一步实验研究和医学治疗提供了丰富的来源。
一种用于培养肝源性干细胞试剂盒

[发明专利]细胞微区室和制备方法-CN201780071921.9在审
发明人：马克西姆·法耶尤科斯;凯文·亚历山德里;皮埃尔·纳索伊;劳伦特·可格纳特;格雷·雷希尔;艾万·贝扎尔德 -专利权人：波尔多大学;法国国家科学研究中心;理论与应用光学研究所
申请日： 2017-11-23 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及一种细胞微区室，其依次包含被组织在腔周围的：至少一层多能细胞，细胞外基质层，和水凝胶外层。本发明还涉及用于制备这样的细胞微区室的方法。
微区细胞外基质层细胞多能细胞腔周围水凝胶制备

[发明专利]一种干细胞培养液及其应用-CN201910916981.7在审
发明人：苗小敏;汤亚东;李卓刚;梁大锡;陈家盈;罗竣仁;陈巧桐;张焜 -专利权人：广东工业大学
申请日： 2019-09-26 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养技术领域，尤其涉及一种干细胞培养液及其应用。本发明提供了一种干细胞培养液，包括TeSR‑E8培养基、Y‑27632和生长因子；所述生长因子选自FGF2、TGF‑β和Wnt的一种或多种。本发明干细胞培养液包括TeSR‑E8培养基、Y‑27632和生长因子，将生长因子与Y‑27632共同使用，可减少Y‑27632的使用量，该干细胞培养液具有很好的稳定性，可减少因使用Y‑27632而造成的安全问题和质量问题，并能进一步改善hiPSC的生长状况。
干细胞培养液生长因子培养基细胞培养技术安全问题生长状况质量问题应用

[发明专利]一种毛囊干细胞的分离提取方法-CN201910943285.5在审
发明人：李文东;宋云庆;黎波;卢瑞珊 -专利权人：广东华夏健康生命科学有限公司
申请日： 2019-09-30 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种毛囊干细胞的分离提取方法，所述方法是利用二次酶解法提取毛囊干细胞，其中二次酶解分别采用胰酶替代品和胶原酶Ⅳ，第一次选用胰酶替代品对毛囊细胞进行酶解，第二次选用胶原酶Ⅳ对毛囊细胞进一步酶解。本发明采用双酶酶解法对毛囊组织进行二次酶解，进一步释放组织中干细胞，提高毛囊干细胞的提取数量，同时采用性质较为温和的酶，减少对毛囊干细胞的损伤，提高毛囊干细胞的存活率。
毛囊干细胞二次酶解毛囊细胞替代品胶原酶酶解胰酶分离提取毛囊组织存活率干细胞次酶酶酶损伤释放

[发明专利]内皮祖细胞培养制剂、培养液及内皮祖细胞分离培养方法-CN201910795497.3在审
发明人：吴道贫;莫乾强;谢秀凤;邹洁宜;覃绍君 -专利权人：广州准优生物科技有限公司
申请日： 2019-08-27 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及一种内皮祖细胞培养制剂、培养液及内皮祖细胞分离培养方法。该培养液添加有与待培养的内皮祖细胞同源的PRP，并配合特别设计的细胞生长因子组合，经过试验发现，可以显著提高内皮祖细胞的增殖效果。并且使用自体外周血制备的血浆，减少了避免另外提取全血制备血浆的步骤，有利于减少人机体损伤。使用该内皮祖细胞培养液培养的内皮祖细胞可以更为安全地进行临床试验，可以减少外源动物血清的污染和一些潜在的风险，可以让内皮祖细胞更好的生长。
内皮祖细胞培养液血浆制备细胞生长因子培养液培养自体外周血动物血清分离培养临床试验增殖效果潜在的人机体全血外源同源损伤生长试验污染配合发现

[发明专利]小分子化合物诱导鸡胚成纤维细胞CEFs成iPSCs的体系建立方法-CN201910810444.4在审
发明人：李碧春;李婷婷;左其生;金晶;张晨;袁霞;张亚妮;孙红艳 -专利权人：扬州大学
申请日： 2019-08-29 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：小分子化合物诱导鸡胚成纤维细胞CEFs成iPSCs的体系建立方法，其特征是，设置不同浓度的小分子化合物组合体系，细胞形态学观察、毒性试验及qRT‑PCR检测相关基因的表达，验证小分子化合物在鸡CEFs诱导重编程中是否适用及其适宜诱导浓度；然后利用剔除法结合qRT‑PCR、间接免疫荧光、细胞流式分析技术、AKP染色、EDU细胞增值技术手段优化诱导体系，建立适宜鸡CEFs重编程诱导体系。本发明解决了器官来源及免疫排斥问题，同时为个体发育及遗传修饰与保存的研究提供了新方法；为后续诱导多能干细胞的使用奠定理论和技术基础，也为其他物种的化学诱导重编程研究提供参考。
小分子化合物诱导重编程鸡胚成纤维细胞细胞形态学观察诱导多能干细胞间接免疫荧光免疫排斥问题诱导重编程毒性试验化学诱导技术基础器官来源体系建立相关基因遗传修饰增值技术组合体系细胞流染色剔除验证物种发育细胞参考研究保存优化分析

[发明专利]一种毛囊干细胞的移植方法-CN201910700826.1有效
发明人：陈相波;雷鸣;田朋飞;应荣 -专利权人：杭州荣泽生物科技有限公司
申请日： 2019-07-31 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种毛囊干细胞的移植方法，所述一种毛囊干细胞的移植方法包括以下步骤：(1)首先在无菌室中取人体头皮组织，随后将头皮组织中加入中性蛋白酶进行消化清洗，清洗后按照毛囊生长方向拔出完整的毛囊；(2)制备第一干细胞培养基。本发明采用全新配方的第一干细胞培养基可以是毛囊干细胞可以快速的增长，可以为其提供大量的营养物质，本发明通过设置第二干细胞培养基可以快速扩增干细胞，可以使其相对于常规干细胞提高一倍以上，而且其适应性较强，这种移植方法可以使被移植的毛囊干细胞成活率达到95％以上，而且移植方式合理高效，便于推广。
毛囊干细胞干细胞培养基移植干细胞清洗中性蛋白酶毛囊生长人体头皮头皮组织营养物质无菌室拔出扩增毛囊制备成活率配方消化

[发明专利]一种高通量形成拟胚体的微阵列芯片的制备方法与应用-CN201910638319.X在审
发明人：秦建华;王丽;尹方超 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2016-11-26 - 公布日： 2019-11-15 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供一种高通量形成拟胚体的微阵列芯片的制备方法与应用，该方法利用软蚀刻技术制备了具有微米尺度的阵列微柱结构的PDMS聚合物芯片。通过优化微柱结构的高度和间距来控制干细胞来源的拟胚体的形状、大小、均一性。该方法可以高通量形成拟胚体，并可以原位动态观察拟胚体增殖、发育的全过程。该芯片具有可以有效去除凋亡细胞和细胞碎片，保证拟胚体之间的营养供给和信号传递的特点，克服了传统拟胚体形成和悬浮培养分步实现的缺点，具有简化拟胚体操作步骤，高通量、原位形成与分化的优势，无需特殊的仪器和试剂，可与其他技术集成化。
拟胚体高通量微柱制备芯片原位动态观察蚀刻干细胞来源技术集成化微阵列芯片凋亡细胞微米尺度细胞碎片信号传递悬浮培养营养供给原位形成均一性去除增殖发育分化体操应用优化保证

[发明专利]来源于透明质酸丰富的节点和导管系统的干细胞、其分离方法及用途-CN201580021661.5有效
发明人：权炳世 -专利权人：唯免疫治疗社
申请日： 2015-04-28 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及来源于透明质酸丰富的节点和导管系统(Hyaluronic acid‑rich node and duct system，HAR‑NDS)的干细胞、其分离方法及用途，更详细地，涉及作为具有分化为来源于透明质酸丰富的节点和导管系统的神经细胞的能力的来源于透明质酸丰富的节点和导管系统的成体干细胞(Node and ductal stem cells，NDSCs)及具有分化为造血细胞的能力的造血干细胞。本发明可将很难从骨髓、外周血及脐带血(脐血)获取的作为成体干细胞的来源于透明质酸丰富的节点和导管系统的成体干细胞及造血干细胞作为替代来源从来源于透明质酸丰富的节点和导管系统分离，从而可有效地适用于脑部疾病、神经疾病、慢性感染疾病、癌、自体免疫性疾病、脏器再生及各种难治性疾病的治疗。
来源于透明丰富节点导管系统干细胞分离方法用途

[发明专利]增强成纤维细胞治疗活性的方法-CN201880013348.0在审
发明人： P·奥希伦;T·伊奇姆;K·科姆拉 -专利权人：脊核细胞有限责任公司
申请日： 2018-01-11 - 公布日： 2019-10-15 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了可用于增强成纤维细胞群的一种或多种治疗活性的物质组合物、细胞、实验规程和程序。在一个实施方案中，成纤维细胞用一种或多种包含生长因子的组合物预处理，其中所述生长因子可以是细胞因子、肽和/或蛋白质。在另一个实施方案中，成纤维细胞与富血小板血浆和/或来自富血小板血浆的衍生物一起培养。在另一个实施方案中，成纤维细胞在施用于个体之前在低氧条件下培养。本公开进一步提供了体外评估成纤维细胞活性的手段，包括例如创面修复测定和细胞因子产生。
成纤维细胞富血小板血浆生长因子细胞因子治疗活性预处理物质组合物创面修复低氧条件实验规程体外评估可用蛋白质细胞