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[发明专利]一种快速冻存和复苏子宫内膜干细胞的方法-CN201811309102.6在审
发明人：董明珠;宋莉莉;潘新;刘世红;卢家堃 -专利权人：北京世纪劲得生物技术有限公司
申请日： 2018-11-05 - 公布日： 2019-03-26 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供了一种快速冻存和复苏子宫内膜干细胞的方法，可以降低细胞受损凋亡的概率、提高存活率；向细胞中加入冷冻保存液或复苏保护液后进行短时间低频超声处理，可以在不破坏细胞结构的前提下使相互粘附的细胞发生轻微松动、产生缝隙，并能使液体分散成小液滴、便于渗入细胞之间；细胞粘附分子可以促进细胞之间相互粘附，从而进一步减少单个细胞、提高细胞的存活率；细胞活性抑制剂可以对细胞内的一些生理活动进行可逆的抑制，在不影响细胞活性的前提下提高冻存效果。通过上述手段，可以降低冷冻过程和复苏过程对细胞造成的物理性和化学性的伤害，从而提高细胞存活率和冻存的复苏率。
细胞冻存复苏子宫内膜存活率干细胞细胞活性抑制细胞粘附分子冷冻保存液细胞存活率单个细胞低频超声冷冻过程生理活动细胞发生细胞结构液体分散影响细胞保护液化学性可逆的物理性小液滴粘附的凋亡粘附渗入松动受损概率伤害

[发明专利]来自肝外胆管树的专能干细胞及其分离方法-CN201510994055.3有效
发明人： L·M·雷德;Y·王;V·卡迪拉尔;E·戈迪奥;G·卡佩罗;D·艾尔瓦罗;C·崔 -专利权人：北卡罗来纳大学教堂山分校;罗马大学
申请日： 2010-10-28 - 公布日： 2019-03-26 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及专能干细胞、专能细胞群及富集专能细胞的群，每一个在新生儿、儿童和成人胆管树组织及死后72小时内的死人（尽管优选死后10小时内）中发现并能够成熟至包括肝、胆管或胰腺组织的多个内胚层组织。专能干/祖细胞及细胞群在胆管周围腺体中发现，从它们派生的祖细胞遍及包括胆囊的胆管树存在。高量的胆管周围腺体在胆管树的分支位置如门、肝总管、胆囊管、总管、肝胰总管和胆囊中发现。有关的专能细胞、专能细胞群及它们派生的祖细胞在遍及包括胆囊的胆管树中发现，其没有胆管周围腺体。本发明还提供包括这些细胞的组成、鉴定和分离这些细胞的方法、在培养物中培养这些细胞的方法、在培养物中扩增这些细胞的方法、及体外或体内分化或谱系限制这些细胞至肝、胆管或胰腺命运（如肝细胞、胆管细胞和/或胰岛细胞）的方法。还提供使用专能细胞和/或专能细胞群的方法。
来自胆管能干细胞及其分离方法

[发明专利]鹿茸细胞无血清培养法-CN201710809881.5在审
发明人：梁国坚;张桂珍 -专利权人：广西索芙特集团有限公司
申请日： 2017-09-11 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：当代研究鹿茸含有近四十种有益物质，特别具有多肽、多胺、多醣，能增加核酸蛋白质合成，修复机体细胞和细胞再生，抑制肿瘤细胞，增加免疫、抗病毒，影响生命全程。但以鹿茸用药功效不显，提取成分困难，成本高，失去活性有药物残留。鹿茸细胞是鹿茸的最小生命单位，研究证明鹿茸细胞中多胺等活性物质多于鹿茸三倍，便于大量生产提取。按生物制药要求研究鹿茸细胞取得成功，获ZL03159604.5号发明专利。进而创新了鹿茸细胞无血清培养法，排除了血清有害成分及耐高温疯牛病毒的风险。建立了鹿茸细胞无血清培养基及取样工具，可从茸体上多点取材培养不同的前体细胞株(系)，组建细胞库，满足工业化生产鹿茸细胞研制新型药物的根本须求。
鹿茸细胞鹿茸无血清培养多胺无血清培养基抑制肿瘤细胞核酸蛋白质活性物质前体细胞取样工具生物制药细胞再生新型药物药物残留疯牛病抗病毒耐高温体细胞细胞库修复机血清多肽茸体研究取材合成全程组建成功

[发明专利]一种制备子宫内膜干细胞的培养基以及制备方法-CN201811610790.X在审
发明人：葛啸虎;陈海佳;张梦晨;王小燕;姜交华 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2018-12-27 - 公布日： 2019-03-12 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及组织培养技术领域，公开了一种制备子宫内膜干细胞的培养基以及制备方法。本发明以无血清培养基为基础，添加Pall血清替代物、青/链霉素、硫酸庆大霉素、谷氨酰胺、MEM NEAA、EGF、bEGF、丙酮酸钠和VEGF作为子宫内膜干细胞的培养成分，能够显著的提高子宫内膜干细胞的存活率；在此基础上配合胶原酶I和Dispase II的混合消化，能够更进一步提高子宫内膜干细胞的存活率，促进了子宫内膜干细胞的发展应用。
子宫内膜干细胞制备存活率培养基硫酸庆大霉素无血清培养基组织培养技术血清替代物丙酮酸钠发展应用谷氨酰胺胶原酶I 链霉素消化配合

[发明专利]一种干细胞无血清培养基及其制作方法-CN201811590337.7在审
发明人：姜和;张坤;杨珂 -专利权人：成都赋智健康科技有限公司
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：一种干细胞无血清培养基及其制备方法，干细胞无血清培养基包括如下体积百分比的物质：低糖型DMEM 85～91%，Ultroser G血清替代物8～12%，透明质酸0.5～1.5%，褐藻多糖硫酸酯0.5～1.5%；还包括L‑谷氨酰胺1.0～1.4mmol/L，β‑巯基乙醇0.1～0.4mmol/L，bFGF4～8mg/L，非必需氨基酸56～84mmol/L；还提供了其制备方法。本发明的有益效果是：干细胞无血清培养基其稳定可靠，可维持细胞形态，保证细胞生物活性；其制作方法操作简单易行，具有较好的实用价值。
无血清培养基干细胞制备褐藻多糖硫酸酯非必需氨基酸细胞生物活性体积百分比血清替代物谷氨酰胺透明质酸细胞形态巯基乙醇低糖制作保证

[发明专利]培养人类角膜缘干细胞的方法-CN201710770991.5在审
发明人：欧耿良 -专利权人：三鼎生物科技股份有限公司
申请日： 2017-08-31 - 公布日： 2019-03-05 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明揭露一种培养人类角膜缘干细胞的方法，其步骤包含：预处理一滋养细胞；将滋养细胞接种于一多孔膜；将多孔膜置入一容器中，使容器分隔为第一培养室以及第二培养室，其中，滋养细胞位于第二培养室；于容器中注入培养基；以及将人类角膜缘干细胞置于第一培养室。相较于习知技术，本发明培养人类角膜缘干细胞的方法利用多孔膜的培养技术培养人类角膜缘干细胞，使人类角膜缘干细胞的扩大率更优于传统培养方式。此外，本发明所使用的培养基不含有具毒性的二甲基亚砜成分，以降低细胞受毒杀的机率。
人类角膜干细胞培养室多孔膜滋养培养基细胞预处理二甲基亚砜传统培养技术培养细胞接种置入分隔

[发明专利]一种牙周膜干细胞的培养方法-CN201510732868.5有效
发明人：葛啸虎;陈海佳;王一飞;冯德龙;张维敏 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-10-30 - 公布日： 2019-02-05 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明公开了一种牙周膜干细胞的培养方法。所述培养方法将牙周膜干细胞接种到水凝胶上，用含BMP‑2的无血清培养基进行三维培养。三维培养接种用的牙周膜干细胞在二维培养时，使用含bFGF的无血清培养基进行培养。与现有技术相比，本发明中的细胞与水凝胶培养体系能够更好保持牙周膜干细胞的增殖及细胞活力；所使用的三维培养体系简单易行，同时保持了良好的干细胞特征。
一种牙周膜干细胞培养方法

[发明专利]一种高效分离脐带胎盘间充质干细胞的方法及应用-CN201811293316.9在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：中晶生物技术股份有限公司
申请日： 2018-11-01 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞领域。本发明初步建立一种脐带、胎盘干细胞分离培养培养体系及应用。所述方法包括：（1）新生胎儿脐带、胎盘的处理与运输；（2）脐带、胎盘冲洗、切割、消化处理；（3）原代细胞及组织快细致处理；（4）全新添加物、传代换液处理。本发明可以在节约成本的基础上更高效率分离培养脐带、胎盘间充质干细胞。
脐带胎盘间充质干细胞分离培养胎盘添加物胎盘干细胞高效分离培养体系胎儿脐带消化处理原代细胞干细胞高效率液处理冲洗应用切割节约运输

[发明专利]一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基-CN201811040112.4在审
发明人：马亚东;黄宗堂;曹娜 -专利权人：丰泽康生物医药（深圳）有限公司
申请日： 2018-08-30 - 公布日： 2019-01-01 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及细胞的诱导分化技术领域，特别涉及一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基，包括以下物质：无机盐、有机物、氨基酸、氨基酸盐、植物凝集素、胰岛素、碳源、细胞生长因子、维生素及抗氧化剂、蛋白质、微量元素和pH值的指示剂。本发明提供的一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基，在多种皮生长因子诱导下，提高单核细胞转化比如血管内皮细胞等多潜能细胞，为临床上更合理的将单核细胞用于治疗提供了实验数据和理论依据。
单核细胞多潜能细胞无血清培养基转化细胞生长因子血管内皮细胞无机盐皮生长因子无血清培养氨基酸盐抗氧化剂实验数据诱导分化微量元素凝集素胰岛素有机物指示剂氨基酸维生素蛋白质诱导细胞治疗

[发明专利]一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的培养方法-CN201811040147.8在审
发明人：马亚东;黄宗堂;曹娜 -专利权人：丰泽康生物医药（深圳）有限公司
申请日： 2018-08-30 - 公布日： 2018-12-28 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及细胞的诱导分化方法，特别涉及一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的培养方法，将单核细胞培养在培养液中，待细胞达80％‑90％融合后，消化处理，沉淀物再加入培养液传代培养；再依次第一诱导培养液、第二诱导培养液诱导培养，换成培养液培养。本发明可以提高单核细胞向多潜能胚胎干细胞株分化，该成熟的细胞表现为多种标志蛋白的表达，使单核细胞能很好地运用到后续的实验中，为临床上更合理的将单核细胞用于治疗提供了实验数据和理论依据。
单核细胞培养液多潜能细胞诱导培养液细胞单核细胞培养胚胎干细胞培养液培养标志蛋白传代培养实验数据消化处理诱导分化诱导培养转化潜能分化融合治疗成熟表现

[发明专利]一种细胞培养液及其应用以及诱导牙髓干细胞向神经样细胞分化的方法-CN201510595221.2有效
发明人：陈海佳;王一飞;葛啸虎;冯德龙;马岩岩 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-09-17 - 公布日： 2018-12-04 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞培养技术领域，尤其涉及一种细胞培养液及其应用以及诱导牙髓干细胞向神经样细胞分化的方法。本发明提供的细胞培养液中包括基础培养液、GDNF、Shh、EGF和cAMP。本发明提供的培养液能够用于诱导牙髓干细胞分化为神经样细胞。采用该培养液诱导DPSCs，DPSCs形态在12小时开始发生改变；而在诱导24小时后，DPSCs形态发生明显变化，细胞折光性开始增强，突起增多增长，分化为神经样细胞形态。经western bolt检测，诱导24h后，DPSCs中Nestin和MAP2的表达量显著提高。因此，本发明提供的培养液诱导DPSCs向神经样细胞分化的周期短，效率高。
一种细胞培养液及其应用以及诱导牙髓干细胞神经分化方法

[发明专利]一种培养基质及其应用与培养牙髓干细胞的方法-CN201510593746.2有效
发明人：陈海佳;王一飞;葛啸虎;冯德龙;马岩岩 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2015-09-17 - 公布日： 2018-12-04 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及干细胞培养领域，尤其涉及一种培养基质及其应用与培养牙髓干细胞的方法。本发明提供的三维培养基质中以I型胶原水凝胶作为载体，以bFGF和BMP‑2维持牙髓干细胞的稳定性，经6天培养，DPSCs细胞的增殖稳定且保持良好的活力，细胞数目扩大4倍。经免疫细胞化学染色，培养6天后的细胞干性维持良好，且具有较强的增殖能力。并且，本发明采用EGF和bFGF对牙髓干细胞进行原代培养，使原代细胞活性得到提高。
一种培养基质及其应用牙髓干细胞方法

[发明专利]ATM蛋白抑制剂促进生成诱导多能干细胞的应用-CN201810522980.X在审
发明人：吴侠;贺海鹏;卢晓 -专利权人：内蒙古大学
申请日： 2018-05-28 - 公布日： 2018-11-23 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明涉及ATM蛋白抑制剂促进生成诱导多能干细胞的应用，具体为ATM蛋白抑制剂用于促进体细胞重编程生成诱导多能干细胞的用途。以对体细胞实施重编程的当天为第0天；在预设时间段采用ATM蛋白抑制剂对体细胞进行处理；预设时间段为：第0天至第4天、第0天至第6天、第2天至第4天、或第4天至第6天。本发明不但能够有效提高iPS细胞诱导效率，而且显著降低iPS细胞的成瘤风险，增加了细胞的安全性。
蛋白抑制剂诱导多能干细胞体细胞预设时间段重编程成瘤应用诱导细胞

[发明专利]一种通过细胞表面标记特异性富集的人牙龈干细胞亚群及其干性检测方法-CN201810595972.8在审
发明人：徐随民 -专利权人：南京泰盛生物科技有限公司
申请日： 2018-06-11 - 公布日： 2018-11-06 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供了一种特异的人牙龈干细胞亚群及其富集方法。本方法包含牙组织样品的采集运输，牙龈干细胞的分离，及表达CD18干细胞的富集。本发明还提供了一种富集的牙龈干细胞亚群生物学特性的检测方法。包括与干性相关的集落形成能力检测，增殖能力检测，体外成骨分化能力检测，体内成骨分化能力检测。
牙龈干细胞亚群检测富集干细胞干性集落形成能力体外成骨分化细胞表面标记生物学特性特异性富集分化能力能力检测体内成骨增殖能力组织样品采集运输

[发明专利]一种通过细胞表面标记特异性富集的人牙髓干细胞亚群及其干性检测方法-CN201810595973.2在审
发明人：徐随民 -专利权人：南京泰盛生物科技有限公司
申请日： 2018-06-11 - 公布日： 2018-11-06 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供了一种特异的人牙髓干细胞亚群及其富集方法。本方法包含牙组织样品的采集运输，牙髓干细胞的分离，及表达CD18干细胞的富集。本发明还提供了一种富集的牙髓干细胞亚群生物学特性的检测方法。包括与干性相关的集落形成能力检测，增殖能力检测，体外成骨分化能力检测，体内成骨分化能力检测。
检测富集干细胞亚群牙髓干细胞人牙髓干性集落形成能力体外成骨分化细胞表面标记生物学特性特异性富集分化能力能力检测体内成骨增殖能力组织样品干细胞亚群采集运输