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[发明专利]醋酸钙梯度主动载药法制备维A酸外泌体模拟物-CN202211081796.9有效
发明人：姜舒;张芸;纪惜銮;刘赢滢;谢亮;张学峰 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-09-06 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： A61K31/203 文献下载
摘要：本发明提供了醋酸钙梯度主动载药法制备维A酸外泌体模拟物的方法，属于生物技术领域，所述方法中包括向外泌体模拟物浓缩液中加入维A酸；所述的外泌体模拟物的膜内外存在醋酸钙浓度差。本发明制备的维A酸外泌体模拟物产量高，载药率超过80%，且具有良好的体外药物稳定性，具有较好的临床应用前景。
醋酸梯度主动法制酸外泌体模拟

[发明专利]一种间充质干细胞冻存液及其冻存方法-CN202210446407.1有效
发明人： 纪惜銮;姜舒;张芸;刘赢滢;谢亮;翁东旭;黄伟 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-04-26 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种间充质干细胞冻存液及其冻存方法，所述间充质干细胞冻存液包括如下重量份配比的组分：无血清培养基78～86份；二甲基亚砜3～8.5份；环丁砜0.8～2.4份；乙二醇0.4～0.6份；维生素C3 0.2～0.4份；维生素E2 0.3～0.4份；功能型糖衍生物0.5～3份；羟乙基淀粉1～4份。所述功能型糖衍生物由糖类化合物与烯醇的氧化产物通过加成反应制备得到；烯醇在糖类化合物引入的不饱和链可以插入间充质干细胞的细胞膜，使糖类化合物固定于细胞膜表面，通过糖类化合物与细胞膜磷脂相互作用抑制附近冰晶的形成。本发明能够降低二甲基亚砜自身具有的细胞毒性对间充质干细胞带来的不利影响；还可减少冻存过程中冰晶对细胞的破坏，在冻存期间能够保持间充质干细胞的生物活性。
一种间充质干细胞冻存液及其方法

[发明专利]一种过表达融合蛋白PTGFRN-GLP-1工程化外泌体的制备方法及其应用-CN202210887221.X有效
发明人：刘洪玉;姜舒;张芸;纪惜銮 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-07-26 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种过表达融合蛋白PTGFRN‑GLP‑1工程化外泌体的制备方法及其应用。本发明通过天然的GLP‑1与外泌体支架蛋白PTGFRN连接构成融合蛋白，将其导入pcDNA3.1质粒构建融合表达载体，然后将质粒导入DH5α大肠杆菌感受态细胞中扩增，当干细胞汇合度达70‑80%时，将pcDNA3.1‑PTGFRN‑GLP‑1融合表达载体转染入干细胞中，收集转染后干细胞的培养上清，并进一步浓缩纯化即得。本发明方法制得的PTGFRN‑GLP‑1工程化外泌体可用于制备治疗2型糖尿病、肥胖症相关药物，在发挥天然GLP‑1作用的同时，解决了天然GLP‑1体内不稳定等问题。
一种表达融合蛋白 ptgfrn glp 工程化外制备方法及其应用

[发明专利]一种原代羊膜干细胞的培养方法及其应用-CN202210296110.1在审
发明人：谢亮;姜舒;张芸;纪惜銮 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-03-24 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于干细胞培养技术领域，具体涉及一种原代羊膜干细胞的培养方法及其应用。本发明提供的原代羊膜干细胞的培养方法，主要包括如下步骤：于无菌条件下将胎盘剥离，然后经生理盐水洗涤，含杀菌剂的混合液洗涤，消化酶处理，培养基培养等；所述含杀菌剂的混合液包括如下组分及其重量百分数：蒲公英提取物1~2%，迷迭香纯露0.5~0.8%，维生素C 0.3~0.8%，纯化水96.4~98.2%；所述培养基由LB液体培养基、吐温‑20、IV型胶原、BI重组玻璃粘连蛋白组成。采用本发明提供的培养方法，可以加速细胞贴壁，将细胞中的组织清除干净，在缩短羊膜干细胞培养时间的前提下，提高了细胞纯度。
一种羊膜干细胞培养方法及其应用

[发明专利]人脐带间充质干细胞的制备方法-CN202210076622.7在审
发明人：任浩;姜舒;张芸;刘赢滢;谢亮;赵传鑫;李欣;纪惜銮;翁东旭;黄伟;李结明 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-01-21 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开一种人脐带间充质干细胞的制备方法，包括以下步骤：S10、从脐带剥取华通氏胶；S20、将所述华通氏胶剪碎后，加入生理盐水，混匀、离心，去除上清，得到组织块；S30、将所述组织块和完全培养基混合，得到组织块液；S40、将所述组织块液接种至T75培养瓶中，加入完全培养基，培养至细胞融合度为85％，洗涤、消化、终止消化，收集终止消化后的细胞，得到P0代细胞；S50、将所述P0代细胞接种至T175培养瓶中，加入完全培养基，继续培养，得到人脐带间充质干细胞。本方法首先自脐带剥取华通氏胶，剪碎离心得到组织块，加完全培养基配成组织块液，然后将组织块液原代培养至细胞融合度为85％，收获P0代细胞，最后将P0代细胞传代培养得到人脐带间充质干细胞。
脐带间充质干细胞制备方法

[发明专利]一种细胞冻存液及其制备方法和应用-CN202210074478.3在审
发明人：任浩;姜舒;张芸;刘赢滢;谢亮;赵传鑫;李欣;纪惜銮;翁东旭;黄伟;李结明 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-01-21 - 公布日： 2022-05-10 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞冻存液及其制备方法和应用，包括以下组分：IMDM基础培养基、DMSO、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸、盐酸吡哆醛、肌醇、腐胺、血清素、巯基乙醇、花生四烯酸、胆固醇、儿茶素、氯化胆硷、泛酸钙、烟酰胺、海藻糖、聚氧丙烯聚氧乙烯、吐温80、白蛋白、转铁蛋白、纤维连接蛋白、漆黄素、荜茇酰胺、生育酚乙酸酯、亚油酸、亚麻酸、豆蔻酸、油酸、棕榈酸、棕榈油酸和硬脂酸；还包括氨基酸、激素、抑制剂、细胞因子、无机化合物和维生素。本发明提供了一种细胞冻存液，用于冻存间充质干细胞能够使人脐带间充质干细胞冻存复苏后具有高的存活率，同时保持更好的分化能力；能更好地保持细胞存活率和增殖活性。
一种细胞冻存液及其制备方法应用

[实用新型]一种人体脐带分切装置-CN202122384143.5有效
发明人：姜舒;纪惜銮;张芸;谢亮;刘赢滢;李结明 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2021-09-29 - 公布日： 2022-02-22 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型适用于医用器械领域，提供了一种人体脐带分切装置，包括：固定基板；设于所述固定基板上方、用于将华通氏胶固定的压板；设于所述固定基板与所述压板之间的分割机构，用于提供作用于所述华通氏胶表面的横向切割力或纵向切割力，以将所述华通氏胶分割成多块大小均匀的组织块；及设于所述固定基板下方的收集箱。本实用新型可将大量的脐带同时分割处理，处理后的脐带组织块大小均匀，便于后续脐带组织块在培养瓶中统一快速干燥，极大地缩减了脐带分割时间和干燥时间，有效地保障了细胞的活性，使得细胞倍增时间显著缩短，此外该装置还携带方便，便于更换清理网格板。
一种人体脐带装置

[发明专利]一种人牙髓干细胞的分离和扩增方法及其应用-CN202010824170.7有效
发明人：姜舒;张芸;纪惜銮;谢亮 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2020-08-17 - 公布日： 2021-03-23 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及医药生物领域，提供了一种人牙髓干细胞的分离和扩增方法及其应用，其中分离和扩增方法包括以下步骤：S1.取人牙髓组织，剪碎后添加胶原酶I、透明质酸酶和分散酶II进行消化，获得消化的组织、细胞悬液；S2.采用滤网对消化的组织、细胞悬液进行过滤，将过滤液离心后取细胞沉淀，获得人牙髓干细胞；S3.将人牙髓干细胞接种于培养皿中，培养皿预先包被人纤维连接蛋白，加入培养液进行培养，汇合率达到70～80％时，进行传代培养。本发明方法细胞贴壁时间短，培养至第10天细胞数量至少达4.5×105，细胞纯度高，牙髓干细胞表面标志CD73、CD90、CD105阳性表达率99％以上，阴性指标表达率低于1.2％。
一种牙髓干细胞分离扩增方法及其应用

[发明专利]一种提高中心记忆T细胞比例的T细胞制备技术-CN202011257242.0在审
发明人：姜舒;张芸;纪惜銮;刘赢滢;谢亮;罗朝霞 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2020-11-11 - 公布日： 2021-02-12 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种提高中心记忆T细胞比例的T细胞制备技术。本发明提供的制备技术，将HPL作为T细胞培养液的补充成分，主要包括外周血单个核细胞(PBMC)的分离，T细胞的扩增，T细胞检测等过程。本发明提供的制备技术，可提高中心记忆T细胞亚群的比例，而且同时达到了与FBS一致的T细胞增殖效果，且HPL更易于规模化生产，可满足T细胞的临床制备需求。
一种提高中心记忆细胞比例制备技术

[实用新型]一种细胞培养瓶-CN201922372662.2有效
发明人：姜舒;张芸;纪惜銮;熊斌 -专利权人：深圳三智医学科技有限公司
申请日： 2019-12-25 - 公布日： 2020-09-22 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及细胞培养领域，特别涉及一种细胞培养瓶；通过设计多层连体的细胞培养瓶结构，通过多个隔板将培养瓶本体分隔成多个独立的培养室，隔板设有溢流孔，相邻两个隔板的溢流孔错位设置，使得只需要从最上层注入培养液，当最上层的培养液量超过溢流堰高度时，多余的培养液通过溢流孔溢流至下一层的隔板，从而只需要注入一次培养液，即可使每层的培养室内具有等量的培养液，不需要逐层注入培养液，对于每层培养室的侧部分别设置瓶嘴，并通过密封盖密封，方便各层细胞的接种和取样，通过设计多层的细胞培养瓶，细胞可贴附于各隔板生长，增加了单个细胞培养瓶的细胞培养量，且操作方便，提高细胞培养的效率。
一种细胞培养

[实用新型]一种动物实验装置-CN201922280108.1有效
发明人：姜舒;李瑞强;熊斌;纪惜銮;张芸 -专利权人：深圳三智医学科技有限公司
申请日： 2019-12-17 - 公布日： 2020-09-22 - 主分类号： A61D3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种动物实验装置，包括基座、光源、第一遮光板、第二遮光板及容鼠器，基座的第一端面上设有连通其顶面的容置槽，光源设于容置槽内，基座的第一端面上还设有用于容纳第一遮光板的第一滑槽，第一滑槽连通容置槽并靠近容置槽的顶部设置，第一遮光板位于光源上方；基座的相对两侧分别设有连通容置槽的第二滑槽，第二滑槽内可滑动设有第二遮光板，第二遮光板位于第一遮光板的上方且对应于光源设置；基座上还设有放置槽，容鼠器放置在放置槽中，容鼠器上设有供黑色小鼠的尾巴伸出的槽孔，槽孔连通容置槽并位于第一遮光板的上方。本动物实验装置，能够让实验人员快速地找到黑色小鼠尾巴的血管位置并对黑色小鼠尾巴进行注射。
一种动物实验装置

[发明专利]通用型CAR-T细胞、其制备方法及其应用-CN201911407988.2在审
发明人：姜舒;张芸;熊斌;王冰;纪惜銮 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种通用型CAR‑T细胞、其制备方法及其应用，该通用型CAR‑T细胞的制备方法，包括以下步骤：(1)利用扩增引物P1‑P5分别对pCDH、3gRNA、EF1α、GPC3 CAR‑1和GPC3 CAR‑2片段进行PCR扩增，然后将获得的扩增片段依次进行连接；采用引物P6对连接产物进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳鉴定，鉴定正确后转化至感受态细胞；构建获得pLenti‑3gRNA‑EF1α‑GPC3 CAR重组慢病毒质粒，包装病毒颗粒；(2)感染扩增后的T淋巴细胞，通过电转化导入Cas9 mRNA，获得所述通用型CAR‑T细胞。本发明具有免疫排斥反应低、肿瘤细胞杀伤效率高的优点。
通用型 car 细胞制备方法及其应用

[发明专利]一种人母乳干细胞的制备方法及其应用-CN201710092955.8有效
发明人：姜舒;张芸;纪惜銮;杨顺;罗朝霞 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2017-02-21 - 公布日： 2019-12-27 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供了一种人母乳干细胞的制备方法及其应用，其中的制备方法包括以下步骤：采集母乳；分离人母乳细胞，得到纯化后的母乳细胞悬液；将纯化后的母乳细胞悬液转移到包被体积百分比为0.01‑0.05%的明胶的培养板中，置于CO
一种母乳干细胞制备方法及其应用

[发明专利]用于体外诱导脂肪来源间充质干细胞分化为肝细胞的培养基-CN201610519274.0有效
发明人：姜舒;纪惜銮;张芸;杨顺;罗朝霞 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2016-07-01 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及用于体外诱导脂肪来源间充质干细胞分化为肝细胞的培养基，属于干细胞分化技术领域。在本发明中，所述培养基包括消化酶溶液、脂肪来源间充质干细胞培养基、同步化培养基、诱导分化培养基和成熟培养基。本发明还提供了体外诱导脂肪来源间充质干细胞分化为肝细胞的试剂盒，以及所述培养基和试剂盒在体外诱导脂肪来源间充质干细胞分化为肝细胞中的应用。本发明提供的培养基能够实现脂肪来源间充质干细胞的大规模生产，且实现体外诱导脂肪来源间充质干细胞高效分化为肝细胞，操作简便、成本低。
用于体外诱导脂肪来源间充质干细胞化为肝细胞培养基

[发明专利]一种干细胞护肤品及其制备方法-CN201811325754.9在审
发明人：姜舒;张芸;罗朝霞;纪惜銮 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2018-11-08 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： A61K8/99 文献下载
摘要：本发明公开了一种干细胞护肤品及其制备方法，干细胞护肤品包括油相组分、水相组分和其他组分，所述油相组分包括如下重量份的组分：硬脂酸4～5份、十八醇2～3份、十六醇2～3份、白油3～3.5份、吐温60 0.2～0.8份、羊毛脂1～1.5份和橄榄油0.2～0.8份；所述水相组分包括如下重量份的组分：甘油6～7份、牡丹皮提取物0.2～0.5份、巴戟天提取物0.2～0.8份、黄芪提取物0.2～0.8份、白术提取物0.5～0.8份、茯苓提取物0.2～0.8份和蒸馏水65～75份；所述其他组分包括如下重量份的组分：玫瑰香精0.1～0.3份、尼泊金丙酯0.1～0.3份和干细胞提取物4～6份。干细胞护肤品具有很好的美白和抗衰老功效；制备过程简单，适用于批量化生产。
护肤品干细胞重量份制备蒸馏水巴戟天提取物干细胞提取物牡丹皮提取物橄榄油白术提取物黄芪提取物尼泊金丙酯茯苓提取物玫瑰香精制备过程甘油抗衰老批量化十八醇十六醇羊毛脂硬脂酸白油美白吐温生产

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