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[发明专利]包括人类在内的生物体细胞中的转录产物、转染RNA及其纯化复合物的工具-CN202280009159.2在审
发明人：伊藤达男;清水由梨香 -专利权人：学校法人川崎学园
申请日： 2022-01-04 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种衍生自CRISPR‑dCas(死Cas)蛋白或CRISPR‑Cas蛋白的CRISPR‑dCas/Cas蛋白衍生物或CRISPR‑dCas/Cas蛋白衍生物集，所述CRISPR‑dCas(死Cas)蛋白具有螺旋区，能够与向导RNA和靶RNA形成复合物，并且不具有核酸酶活性，以及所述CRISPR‑Cas蛋白具有螺旋区，能够与向导RNA和靶RNA形成复合物，并且具有核酸酶活性，所述CRISPR‑dCas/Cas蛋白衍生物或CRISPR‑dCas/Cas蛋白衍生物集包括：N结构域，所述N结构域包含CRISPR‑dCas(死Cas)蛋白或CRISPR‑Cas蛋白的螺旋区的N端侧，C结构域，所述C结构域包含CRISPR‑dCas(死Cas)蛋白或CRISPR‑Cas蛋白的螺旋区的C端侧，以及第一因子和第二因子，所述第一因子和所述第二因子能够响应刺激结合，所述N结构域与所述第一因子连接，以及所述C结构域与所述第二因子连接，具有所述第一因子和所述第二因子的CRISPR‑dCas/Cas蛋白衍生物通过含有蛋白酶识别序列的连接子结合，或通过含有自裂解肽的连接子结合，或非共价结合，所述CRISPR‑dCas/Cas蛋白衍生物因此具有：(N结构域)‑(第一因子)‑(含有蛋白酶识别序列的连接子)‑(第二因子)‑(C结构域)的结构，或(N结构域)‑(第一因子)‑(含有自裂解肽的连接子)‑(第二因子)‑(C结构域)的结构，或(N结构域)‑(第一因子)‑(非共价键)‑(第二因子)‑(C结构域)的结构，以及所述CRISPR‑dCas/Cas蛋白衍生物集包括(N结构域)‑(第一因子)和(第二因子)‑(C结构域)两部分。
包括人类在内生物体细胞中的转录产物转染 rna 及其纯化复合物工具

[发明专利]核酸序列测定方法-CN202280009814.4在审
发明人：蓼沼崇;宫内祐树;田口朋之 -专利权人：横河电机株式会社
申请日： 2022-01-14 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种核酸序列测定方法，通过杂交来测定细胞悬浮液中含有的具有特定核酸序列的目标RNA，所述核酸序列测定方法包括：将细胞悬浮液以加压状态在100～200℃下加热，得到RNA提取液的工序；向所述RNA提取液中添加蛋白质分解酶来进行反应，制备样品溶液的工序；将所述样品溶液供给到包括与所述目标RNA杂交的荧光探针的核酸序列测定用器件的工序；使所述目标RNA与所述荧光探针进行杂交反应的工序；以及测量来自所述核酸序列测定用器件的荧光的工序。
核酸序列测定方法

[发明专利]一种RNA保存液及其用途-CN202311034075.7在审
发明人：杨宇;宋悦谦;赵婷婷;刘莉;郭铮蕾 -专利权人：中国海关科学技术研究中心
申请日： 2023-08-17 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种RNA保存液及其应用，所述RNA保存液包括蛋白变性剂、螯合剂、还原剂和pH缓冲液，所述保存液的pH为3.5‑5.0，所述蛋白变性剂用于抑制ＲNA酶活性，所述蛋白变性剂包括异硫氰酸胍和氯化锂（LiCl）。相对于已知的RNA保存液，本发明的保存液在不同温度，保存较长时间之后均可以稳定地稳定地扩增出RNA，并保持较高的Ct值。
一种 rna 保存及其用途

[发明专利]一种基于碱裂解法快速纯化质粒的生产工艺-CN202311054482.4在审
发明人：刘红;侯国栋;胡国健;刘国庆;李蓓蓓 -专利权人：赛奥斯博生物科技（北京）有限公司
申请日： 2023-08-22 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于碱裂解法快速纯化质粒的生产工艺，涉及生物技术领域。该生产工艺包括以下步骤：对裂解液进行澄清过滤和浓缩换液，得到浓缩液；对所述浓缩液进行羟基磷灰石层析，得到超螺旋质粒洗脱液；对所述超螺旋质粒洗脱液进行终浓缩处理，即得目的质粒；所述裂解液是菌体原料经碱裂解和中和处理后所得到；所述浓缩液中含有100‑250mM NaCl；所述羟基磷灰石层析采用的洗脱液包括0.5M NaCl。本发明的生产工艺使用羟基磷灰石层析方法，在浓缩换液后，使浓缩液保持一定的氯化钠浓度，直接流穿，然后经过高浓度的氯化钠进行洗脱，即可得到较高质量的超螺旋质粒。该生产工艺可以有效提升质粒的回收率和生产效率。
一种基于裂解快速纯化质粒生产工艺

[发明专利]一种RNA@PEI-AuNP-mPEG及其制备方法和应用-CN202310108570.1有效
发明人：梁猛;胡柯;高园园;徐祎凡;汪晨;徐蜀闽;韩学锋;裴志汉 -专利权人：蚌埠医学院
申请日： 2023-02-14 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了一种RNA@PEI‑AuNP‑mPEG及其制备方法和应用，本发明通过体外转录生成lncRNA Gm2044的RNA，PEI包覆的纳米金颗粒PEI‑AuNP的合成，载核酸纳米金颗粒RNA@PEI‑AuNP制备以及mPEG修饰载核酸纳米金颗粒RNA@PEI‑AuNP‑mPEG的制备最终获得了RNA@PEI‑AuNP‑mPEG。本发明制备得到的RNA@PEI‑AuNP‑mPEG能够通过静脉注射方式在睾丸中富集，不仅减少原位注射带来的创伤，而且减少对肝脏等器官的毒理影响。
一种 rna pei aunp mpeg 及其制备方法应用

[发明专利]一种血液基因组DNA提取试剂盒及其使用方法-CN202210947034.6有效
发明人：尹锐;陈惠杰;肖兴玉;张永哲;张凯华;任柏儒 -专利权人：吉林农业科技学院
申请日： 2022-08-09 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及DNA提取技术领域。本发明提供了一种血液基因组DNA提取试剂盒及其使用方法，所述试剂盒包括如下组分：裂解液、结合液、漂洗液1、漂洗液2和洗脱液。本发明采用非胍盐成分的试剂进行细胞裂解，组成简单，成本低且效果稳定。本发明的方法可同时对人和多种动物血液DNA进行提取，提取的DNA浓度和纯度均优于现有技术，可更好的满足下游的酶切以及PCR等实验需求。本发明所用的裂解液仅由单一成分组成，便于溶液配制、以及血液核酸提取的标准化，不仅简化了裂解液配方，同时无需在漂洗后进行晾干操作，不仅缩短了时间，而且避免了乙醇干燥过程中导致样本DNA挥发、产生基因组气溶胶对后续检测带来的假阳性问题。
一种血液基因组 dna 提取试剂盒及其使用方法

[发明专利]一种Cas蛋白体系分离DNA的方法-CN201880079130.5有效
发明人：吴尧;王兴兴;李秋实 -专利权人：苏州晶睿生物科技有限公司
申请日： 2018-12-30 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种从溶液中分离DNA的方法，尤其涉及一种采用Cas蛋白从溶液中分离DNA的方法和试剂盒。本发明能有效提高提取游离DNA的效率。
一种 cas 蛋白体系分离 dna 方法

[发明专利]一种核酸提取试剂盒及核酸提取方法-CN202310273784.4在审
发明人：寇增强;刘珂珂;李林林;董雯 -专利权人：山东博科生物产业有限公司
申请日： 2023-03-16 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种核酸提取试剂盒及核酸提取方法，包括裂解液、磁珠和洗脱液，其中，裂解液的组成成分有：Tris缓冲液20～100mmol/L，pH值5.5～7.5；NaCl 5～10g/L；十二烷基硫酸钠2～10g/L；异硫氰酸胍5～10g/L；EDTA 5～10g/L；BSA 1～5g/L；极美115 2～5g/L；NP‑40 2～5g/L；吐温20 5～10g/L；磁珠为超顺磁性海藻酸钠纳米磁珠；洗涤液的组成成分有：PBS缓冲液50～100mmol/L，pH值为7.0～7.5；乙醇60％～80％；洗脱液的组分成分有：Tris缓冲液50～100mmol/L，pH值7.5；EGTA 5g/L；叠氮钠0.5g/L；溶剂为纯化水。该试剂盒具有简单有效、快速方便、耗时短、核酸提取效率高等优势，可满足大批量样本的提取要求。
一种核酸提取试剂盒方法

[发明专利]指导RNA的新型设计及其用途-CN202280007044.X在审
发明人：王兴;施霖宇;姚璇 -专利权人：辉大（上海）生物科技有限公司
申请日： 2022-08-30 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本公开提供了指导RNA的新型设计及其用途。在一方面，所述指导RNA包含在间隔序列的5'端和3'端侧接同向重复序列的间隔序列。
指导 rna 新型设计及其用途

[发明专利]一种DNA提取液及其在提取植物DNA中的应用-CN202310931753.3在审
发明人：吴健;刘慧敏;林俐;王幼平 -专利权人：扬州大学
申请日： 2023-07-27 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种直扩DNA提取液及其在提取植物DNA中的应用。所述DNA提取液，包括以下组分：0.1～1M NaOH、0.01％～0.1％十二烷基硫酸钠、10～500nM NaCl、0.01mM乙二胺四乙酸二钠、0.05～0.5g/L明胶和0.001％～0.01％消泡剂A。本发明还公开了一种简易、高效的植物基因组DNA制备方法，该方法仅需一步即可提取植物DNA，5分钟即可获得数百份DNA样本进行后续的PCR扩增反应，无有机试剂污染。所述方法包括：在96孔深孔板中加入样本、钢珠以及直扩DNA提取液；利用振动式磨样机进行震荡研磨，破碎组织；吸取上清液稀释5～10倍进行PCR扩增。
一种 dna 提取及其植物中的应用

[发明专利]一种微生物宏基因组测序用标准品体系及其制备方法-CN202310901569.4在审
发明人：焦志军;邓国伟;陈胜兰;殷剑峰;范泽文;王春香 -专利权人：康为医学检验实验室（泰州）有限公司;北京健为医学检验实验室有限公司
申请日： 2023-07-20 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种微生物宏基因组测序用标准品体系及其制备方法，将肠道微生物的菌种按照细胞数比例混合得到微生物宏基因组测序标准品，可保存于菌种保存液中，保证细胞的完整性；将肠道微生物的菌种基因组DNA定量按照比例混合得到微生物宏基因组测序标准品，可长时间室温在核酸保存液中稳定保存，保证核酸的完整性。本发明提供的宏基因组测序标准品的制备方法，可以混合10‑30种肠道微生物，更好的模拟肠道微生物的实际情况。本方法制备的微生物宏基因组测序标准品可用于生信建模、流程测试和开发；可作为微生物学或宏基因组学高通量建库测序的质控，评估检测流程稳定性，可靠度，一致性。
一种微生物宏基组测序用标准体系及其制备方法

[发明专利]一种血液组织细胞基因组DNA提取试剂盒及提取方法-CN202310946242.9在审
发明人：许金超;栗红建;张丹;李永锋;刘丽美;张伟男;蔡宇卿;郭彬彬 -专利权人：江苏谱新生物医药有限公司
申请日： 2023-07-31 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种血液组织细胞基因组DNA提取试剂盒及提取方法，该血液组织细胞基因组DNA提取试剂盒包括裂解液、洗涤液、洗脱液、磁珠悬液、蛋白酶K溶液；本发明所制备的血液组织细胞基因组DNA提取试剂盒提高了提取的纯度，并且同时提高了血液组织细胞总DNA提取的总量，提取速度快，有利于临床诊断工作效率的提高，所提取的DNA可开展后续的分子生物学分析：如基因克隆、测序、荧光定量检测等。
一种血液组织细胞基因组 dna 提取试剂盒方法

[发明专利]一种制备基因组DNA模板的方法-CN202310991452.X在审
发明人：陈刚;郑春辉;丁贵蓉;马福军;朱燕;夏烈文 -专利权人：云锦华彰（珠海）生物科技有限公司;云锦华彰（北京）生物科技有限公司
申请日： 2023-08-08 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开一种制备酵母基因组DNA模板的方法，其方法步骤如下：使用超纯水来重悬菌体，放进液氮速冻，然后将其超声溶解，重复多次即可PCR鉴定。与现有的制备方法对比，本发明的制备方法高效简便；提取成本大幅降低；提取时间很短；能够一次制备多个不同分子量DNA模板，30min左右即可PCR；所制备的基因组DNA模板完整；并且可确保成功地制备酵母细胞基因组DNA模板。
一种制备基因组 dna 模板方法

[发明专利]一种利用转座酶进行链特异性建库的方法-CN202210214878.X在审
发明人：徐盛春;陶晓园;李素娟;陈光;王剑 -专利权人：浙江省农业科学院
申请日： 2022-03-07 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用转座酶进行链特异性建库的方法，该方法包括：制备带有dU序列接头的Tn5转座酶；提取总RNA，纯化得到mRNA；逆转录形成cDNA双链产物；先切割cDNA双链产物，然后回收纯化，再补平末端；最后降解双链DNA产物中的含U模板，进行PCR扩增建库。本发明根据转座酶能够切割DNA的特征，利用高保真酶3’‑5’外切酶活性和尿嘧啶停滞特性，精心设计了带有dU序列的转座酶接头引物，从而在转座酶切割粘贴接头序列后，只有特定方向插入的DNA能被扩增建库，从而达到链特异性建库的目的。该链特异性建库的方法具有简洁的操作步骤和优秀的建库质量，可以作为通用的链特异性建库策略用于转录组分析。
一种利用转座酶进行特异性方法

[发明专利]一种潜隐病毒基因组的提取方法-CN202011051065.0有效
发明人：杨金宏;孔卫青;凌君;江微 -专利权人：安康学院
申请日： 2020-09-29 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种潜隐病毒基因组的提取方法，利用植物病毒衣壳蛋白和植物细胞蛋白的等电点差异，病原遗传物质的特点，以及不同植物病毒对PEG浓缩的需求。采用PEG包裹的磁核，从感染了4种病原体的桑树叶片中成功分离到了潜隐病毒基因组，通过半定量和定量PCR均证实所获的基因组纯度较高、浓度较大，可以用于PCR实验和高通量测序。解决了木本植物中潜隐病毒病原体含量低，指示植物少，纯化困难的问题。
一种潜隐病毒基因组提取方法