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[发明专利]一种基于纳米磁珠自动化回收琼脂糖凝胶DNA试剂盒-CN202310406616.8在审
发明人：蚁珩鑫;林程忠;陈荷萍 -专利权人：广州湾区生物科技有限公司
申请日： 2023-04-17 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种基于纳米磁珠自动化回收琼脂糖凝胶DNA试剂盒，涉及生物技术领域。包括磁珠MXVB、缓冲液BD、洗涤液DW2和洗脱液DE；所述磁珠MXVB为聚苯乙烯包被硅羟基磁珠；所述缓冲液BD包括三羟甲基氨基甲烷一、异硫氰酸胍、乙酸钠；所述洗涤液DW2包括三羟甲基氨基甲烷二、氯化钠、无水乙醇；所述洗脱液DE包括三羟甲基氨基甲烷三、乙二胺四乙酸。本发明能够实现自动化、高通量操作，操作简单，试剂盒可适配多种核酸提取仪进行自动化提取，同时，搭配磁力架也能兼容手工法提取。
一种基于纳米自动化回收琼脂凝胶 dna 试剂盒

[发明专利]用于提取南药植物总RNA的提取液及其应用及提取方法-CN202310638959.7在审
发明人：吴友根;刘晓凤;于靖;刘亚 -专利权人：海南大学三亚南繁研究院
申请日： 2023-06-01 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及RNA提取技术领域，更具体地，涉及用于提取南药植物总RNA的提取液及其应用及提取方法。本发明中的提取液包括CTAB提取缓冲液和SSTE溶液，本发明还涉及该提取液在提取南药植物总RNA中的应用；并提供一种南药植物总RNA的提取方法。本发明相较于RNA提取试剂盒和其他RNA提取的方法，本发明可以充分裂解核酸酶，提高RNA产率和纯度，提取效率高，操作相对其他手提法更为简单，试剂价格低，有效降低了经济成本。
用于提取植物 rna 及其应用方法

[发明专利]一种改性硅藻土提取核酸的方法及应用-CN202111407746.0有效
发明人：马翠萍;石超;万千一;姬艳丽;赵晓丽;张健 -专利权人：青岛科技大学
申请日： 2021-11-24 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本申请公开了一种改性硅藻土提取核酸的方法及应用。该改性硅藻土对核酸扩增反应没有抑制作用且可以富集大量核酸，提高核酸可扩增反应灵敏度。将该改性硅藻土应用于扩增反应，可集核酸提取、扩增、检测于一体，结合快速扩增手段，整个反应可在40min内完成，降低了核酸检测成本，提高了检测效率。
一种改性硅藻土提取核酸方法应用

[发明专利]构建核酸文库的方法和试剂盒-CN201880037683.4有效
发明人：王磬;张明 -专利权人：康博国际有限公司
申请日： 2018-02-04 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：公开了一种用于构建条形码化的单链DNA文库的方法和试剂盒。该方法包括制备单链DNA分子，它们每一个具有去磷酸化的5’末端；将第一衔接子连接至每个单链DNA分子的3’末端；以及合成连接至第一衔接子的第一链的每个单链DNA分子的互补链。该试剂盒包括具有第一链的第一衔接子，其从5’末端到3’末端包括磷酸基团、条形码序列和第一引物识别序列。该试剂盒还包括DNA连接酶，其用于在第一衔接子的第一链的5’末端与每个单链DNA分子之间进行连接，以及第一引物，其用于合成互补链的。该方法使得能够和从低质量和低数量的核酸样品中分析稀有突变。
构建核酸文库方法试剂盒

[发明专利]一种带有粘性末端的长链DNA及制备方法-CN201911244562.X有效
发明人：仰大勇;郭小翠;朱艺 -专利权人：天津大学
申请日： 2019-12-06 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种带有粘性末端的长链DNA及制备方法，制备方法：向EP管中加入带有粘性末端的双链线性DNA前引物和带有粘性末端的双链线性DNA后引物，使两者终浓度相等且为0.1‑2.0μM，目标DNA序列，使终浓度为0.1‑3ng/μl，和1╳DNA聚合酶，最后使用去离子水补齐50μl体系，置于PCR仪中，进行PCR扩增，得到带有粘性末端的长链DNA。本发明的带有粘性末端的双链线性DNA前、后引物，热稳定性好，可承受90℃以上的高温而不被解链。本发明构建的带有粘性末端的长链DNA，作为一种生物相容性极好的材料，还可以作为大片段DNA合成的基础板块。
一种带有粘性末端 dna 制备方法

[发明专利]一种亚硫酸氢盐介导DNA转化及纯化的方法-CN202310319470.3在审
发明人：孔吉祥;王兴仔;殷剑峰;王春香 -专利权人：江苏康为世纪生物科技股份有限公司;北京健为医学检验实验室有限公司
申请日： 2023-03-29 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本申请涉及一种亚硫酸氢盐介导DNA转化及纯化的方法，属于分子生物学技术领域。本发明的方法，在亚硫酸氢盐溶液环境中将含有未甲基化的胞嘧啶的DNA发生磺化，选用磁珠法在高浓度盐离子环境中将所述DNA去氨基，加入碱性溶液用于脱磺酸基，最后洗脱所述DNA，通过下游技术确定DNA甲基化水平的方法。本发明进一步公开了亚硫酸氢盐介导DNA去氨基和去磺化步骤，样本类型可包括人基因组DNA、人粪便核酸、FFPE DNA、游离DNA等，具有操作简单，耗时短，回收效率高，可实现自动化操作的特点。本发明对目前市场已有的方法进行改进优化，使DNA未甲基化的胞嘧啶转化效率达到99%，结合磁珠法对转化后的产物进行去氨基和脱磺酸基，最终得到高转化效率、高质量的DNA。
一种亚硫酸氢盐介导 dna 转化纯化方法

[发明专利]一种高效提取结核分枝杆菌核酸的方法及应用-CN202310205238.7在审
发明人：陈开森;夏良华;于圣铭 -专利权人：南昌市高新区人民医院（南昌大学第一附属医院高新医院）
申请日： 2023-03-06 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效提取结核分枝杆菌核酸的方法及应用，包括以下步骤：(1)配制液体培养基；(2)液化痰液；(3)菌群培养；(4)与裂解液混合；(5)离心混合液；(6)洗脱核酸；(7)纳米孔测序技术检测核酸。本发明首先将牛初乳、葡萄糖、Middlebrook7H9肉汤基础、椰汁、叶酸、甘油和吐温‑80配制液体培养基，快速培养大量结核分枝杆菌，再将尿素、氯化钾、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵和磷酸钾缓冲液组成裂解液，高效提取结核分枝杆菌核酸，提高结核分枝杆菌核酸提取质量，最后使用纳米孔测序技术检测结核分枝杆菌核酸，缩短检测时间至1天内，并且检出率高，以达到快速鉴定结核分枝杆菌的目的。
一种高效提取结核分枝杆菌核酸方法应用

[发明专利]用于对货物核苷酸序列转位的系统和方法-CN202180072470.7在审
发明人：布莱恩·托马斯;克利斯多佛·布朗;丹妮拉·S·A·戈尔茨曼;克里斯蒂娜·布特弗尔德;利萨·亚历山大;詹森·刘 -专利权人：宏基因组学公司
申请日： 2021-08-23 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本公开提供了用于将货物核苷酸序列转位到靶核酸位点的系统和方法。这些系统和方法可以包括包含该货物核苷酸序列的第一双链核酸，其中该货物核苷酸序列被配置用于与重组酶或转座酶复合物相互作用；包含cas效应子和至少一种工程化向导多核苷酸的cas效应子复合物，该工程化向导多核苷酸被配置用于与该靶核酸位点杂交；和该重组酶或转座酶复合物，其中该重组酶或转座酶复合物被配置用于将该货物核苷酸募集到该靶核酸位点。
用于货物核苷酸序列系统方法

[发明专利]核酸提取用磁珠及其制备方法、用于磁珠法核酸提取的试剂盒-CN202111575770.5有效
发明人：严义勇;邓炀;马红圳;刘自天 -专利权人：深圳市易瑞生物技术股份有限公司
申请日： 2021-12-21 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种核酸提取用磁珠及其制备方法、用于磁珠法核酸提取的试剂盒。用于磁珠法核酸提取的试剂盒，其包括细胞裂解液、磁珠、洗涤液和洗脱液，磁珠表面修饰有金属配合物，金属配合物为螯合有铸币金属的配合物；洗脱液中含有具有巯基的含硫化合物。本发明磁珠表面修饰的金属配合物螯合有铸币金属，在核酸提取时，能够与巯基发生高度亲和反应，通过特异性的硫‑铸币金属之间的强作用力，从而使得DNA与金属离子的相互作用被打破，从而洗脱时能够快速将DNA从磁珠上脱离，这种脱离方法简单有效，现有常规金属离子是不具备此种效果。加入含硫化合物后还可以打开蛋白内部的双硫键，使得其变性，失去结构特点和活性，可以更好地从DNA上脱落。
核酸提取用磁珠及其制备方法用于磁珠法试剂盒

[发明专利]一种野外蝴蝶监测无损伤取样方法-CN202210848388.5有效
发明人：曾菊平;邹武;杨文静;黄超斌;周善义;何桂强;贾凤海;陈亮 -专利权人：江西农业大学
申请日： 2022-07-19 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种野外蝴蝶监测无损伤取样方法，涉及分子生物学、保护生物学与生物多样性监测领域。该方法包括：野外观测获取蝴蝶幼虫后进行当地饲养，待幼虫蜕皮完成后获取蜕皮或头壳；从所述蜕皮或头壳中提取获得gDNA。本发明通过对野外观测期间获得的蝴蝶幼虫进行短期饲养，得到幼虫蜕皮、头壳，以无损伤取样方式，可以提取获得gDNA，实现了对野外珍稀蝶类及其他类似珍稀昆虫的DNA无损伤取样，可有效摆脱当前珍稀蝶类损伤性取样限制，并扩大非珍稀蝶类与其他类似昆虫的取样选择方式，提高无损伤取样法的普适性，促进珍稀蝶类的分子生物学、保护生物学与生物多样性监测研究的发展。
一种野外蝴蝶监测损伤取样方法

[发明专利]一种尿液浓缩后提取循环肿瘤DNA的方法-CN202310168647.4在审
发明人：陈谦;曹又元;刘弘扬;刘泓 -专利权人：苏州索真生物技术有限公司
申请日： 2023-02-27 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种尿液浓缩后提取循环肿瘤DNA的方法，包括以下步骤：1)利用可截留尿液ctDNA的超滤管浓缩尿液样本，向离心管中加入蛋白酶K和浓缩后的尿液样本；2)然后依次加入L1、L2裂解液，充分混匀后进行加热处理；3)继续加入缓冲液，充分混匀后立即冰浴处理；4)利用真空抽吸装置使样本中的ctDNA附着在吸附柱滤膜上；5)然后再加入洗涤液及乙醇，使用真空抽吸装置使其过吸附柱；6)取下吸附柱进行离心处理，然后对吸附柱的滤膜进行加热烘干；7)将吸附柱放入一个新的离心管中，加入洗脱液，室温静置后离心。本发明可以实现从大量尿液样本中提取有效的循环肿瘤DNA，且可提取50bp以下的小片段ctDNA。
一种尿液浓缩提取循环肿瘤 dna 方法

[发明专利]一种快速提取烟草叶片基因组DNA的方法-CN202310556709.9在审
发明人：连文力;李雪君;孙计平;孙焕;侯咏;王亚乐;武东玲;平文丽 -专利权人：河南省农业科学院烟草研究所
申请日： 2023-05-17 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速提取烟草叶片基因组DNA的方法，剪取100 mg烟草叶片置于离心管中，并放入2颗玻璃珠，加入100μL的DNA抽提缓冲液，放入研磨机进行研磨后得A溶液；加入等体积的异丙醇，振荡混匀后得B溶液；混匀后的B溶液进行离心，移除上清；离心移除上清后的B溶液加入酒精进行清洗，再次离心后移除上清，最后向离心管中加入ddH2O进行溶解，即得烟草DNA；成本低廉，提取时间短，不需转换离心管，减少操作失误安全性高，还可以节约一半的时间成本。
一种快速提取烟草叶片基因组 dna 方法

[发明专利]一种裂殖壶藻来源的PDRN的制备方法和应用-CN202310088572.9在审
发明人：杨雪薇;曾祖业;应明;邹匡月;德桐;周小辉 -专利权人：深圳大学
申请日： 2023-01-17 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种裂殖壶藻来源的PDRN，应用于治疗脱发、毛囊炎症、组织修复或促血管生长中，其提取方法包括：将裂殖壶藻液吸取至离心管中，离心，弃上清液后高速涡轮震荡打散重悬裂殖壶藻细胞团，加入裂解液，混匀，在50‑80℃的条件下水浴加热充分裂解，冷却至室温，得到裂解物；在裂解物中加入蛋白沉淀液，混匀出现蛋白团块时，冰浴至少5min，离心，吸取上清液，加入异丙醇，混匀直至出现絮状DNA沉淀或白色浑浊沉淀，离心，弃上清液后加入乙醇，多次漂洗DNA后离心，弃上清液后除去残留的乙醇；加入DNA溶解液重新水化溶解DNA沉淀，得到DNA溶液后利用超声波在冰上破碎，得到PDRN溶液。从裂殖壶藻中提取PDRN价格低廉，易获得，抗炎效果显著，是一种理想的PDRN来源。
一种裂殖壶藻来源 pdrn 制备方法应用

[发明专利]一种制备高免疫原性的天然dsDNA抗原的制备方法-CN202310085333.8在审
发明人：邓庚粮;康雅明;孙鹏 -专利权人：武汉博百欧生物科技有限公司
申请日： 2023-01-16 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种制备高免疫原性的天然dsDNA抗原的制备方法。本发明所提供的从生物组织中分离纯化天然dsDNA抗原的方法，先经过裂解消化及酚氯仿抽提制备得到粗dsDNA抗原，之后再依次经过CM阳离子交换层析及葡聚糖‑琼脂糖复合凝胶过滤介质200分子筛层析进一步去除杂质，所制备得到的dsDNA抗原，得率高、免疫原性强，灵敏度及特异性好，更适用于化学发光法等对诊断原料质量要求高的诊断方法。
一种制备免疫原性天然 dsdna 抗原方法

[发明专利]通过定点DNA裂解和修复靶向原位蛋白质多样化-CN201780046643.1有效
发明人： D·吴;O·格里斯贝克;M·埃尔多安 -专利权人：马克思—普朗克科学促进协会公司
申请日： 2017-07-31 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及产生表达目的蛋白质的多种不同突变变体的一组细胞(即细胞库)的方法，其中每个细胞仅从单个基因拷贝中表达一种所述突变变体。本发明还涉及用于鉴定与相应的野生型目的蛋白质相比具有不同的或修饰的生物活性的目的蛋白质的突变变体的方法或细胞库。根据本发明，所鉴定的目的蛋白质的突变变体可用于白色生物技术。
通过定点 dna 裂解修复靶向原位蛋白质多样化