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[发明专利]一种通用的整合型细胞永生化载体的制备方法-CN200810013643.4无效
发明人：胡国斌;王丹;宋珊珊;王锡亮 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2008-01-14 - 公布日： 2008-07-09 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：首先，通过DNA重组技术将具有广谱转化效应的细胞永生化基因——猿猴病毒40大T抗原(SV40T)基因定向插入逆转录病毒载体中，构建重组表达载体；然后，将重组载体与包装质粒pVSV－G共转染GP－293细胞，制备携带SV40T基因的重组泛嗜性逆转录病毒颗粒；所获得的重组泛嗜性逆转录病毒即为通用的整合型细胞永生化载体。该永生化载体能进入所有类型的动物细胞，并将所携带的SV40T基因整合到处于分裂期的靶细胞的基因组中，使其得到可遗传的、稳定的表达，从而保证了靶细胞的高效永生化转化。
一种通用整合细胞永生载体制备方法

[发明专利]SV40T基因诱导构建Turner综合征细胞模型及其细胞库-CN201310403868.1在审
发明人：翁炳焕;黄荷凤;吕时铭;陈晓东;李晓;陈雁 -专利权人：翁炳焕
申请日： 2013-09-01 - 公布日： 2015-03-18 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及用于医学研究领域的SV40T基因诱导Turner综合征细胞模型及其细胞库的构建，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1消化的离体传代或呈对数生长的Turner综合征组织细胞，使重组子与细胞的DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子的细胞克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、软琼脂集落生长、裸鼠致瘤试验、转染细胞DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为SV40T基因诱导Turner综合征体外研究细胞模型冻存于液氮中，为在体外从细胞水平长期研究Turner
sv40t 基因诱导构建 turner 综合征细胞模型及其

[发明专利]导入SV40T基因构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库-CN201310403946.8在审
发明人：翁炳焕;黄荷凤;徐晨明;李晓;张雪琴;陈雁 -专利权人：翁炳焕
申请日： 2013-09-01 - 公布日： 2015-03-18 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及用于医学研究领域的导入SV40T基因构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1消化的离体传代或呈对数生长的神经管缺陷组织细胞，使重组子与细胞的DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子的细胞克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、软琼脂集落生长、裸鼠致瘤试验、转染细胞DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为SV40T基因介导神经管缺陷体外研究细胞模型冻存于液氮中，为在体外从细胞水平长期研究其发病机制奠定基础
导入 sv40t 基因构建神经管缺陷细胞模型及其

[发明专利]能可逆性增殖的表达胰岛素的人胰岛细胞株及其用途-CN200380110670.9有效
发明人：田中纪章;小林直哉;成岛道树;田中斋仁 -专利权人：日本可乐丽医疗器材株式会社;田中纪章;小林直哉
申请日： 2003-11-10 - 公布日： 2006-12-13 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种可逆性无限增殖人胰岛细胞株，其是含有分别夹在一对LoxP序列之间的hTERT基因和SV40T基因的可逆性无限增殖的人胰岛细胞株，其特征在于其具有产生胰岛素的能力，并且在除去所述hTERT基因和SV40T基因之后可以增强胰岛素的表达，尤其是涉及NAKT－13(保藏于独立行政法人产业技术综合研究所，专利生物保藏中心，地址是日本茨城筑波市东1－1－1中央第6号(邮政编号305－8566)，保藏日是2003年9月4日，保藏号为FERM BP－08461)或其传代细胞株，通过从该可逆性无限增殖人胰岛细胞株或其传代细胞株中除去hTERT基因和SV40T基因获得的人胰岛细胞，以及这些细胞的用途。
可逆性增殖表达胰岛素胰岛细胞株及其用途

[发明专利]一种胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体-CN201210232385.5无效
发明人：范忠泽;王金玉;孙珏;李琦;赵成根;张隆;殷佩浩;李大力;叶乃菁 -专利权人：上海中医药大学附属普陀医院
申请日： 2012-07-06 - 公布日： 2014-03-12 - 主分类号： C12N15/79 文献下载
摘要：发明公开了一种胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体，是包含ATP4B启动子序列、SV40T基因序列、以及携带绿色荧光蛋白GFP基因序列的载体质粒DNA序列的基因融合重组质粒；该真核表达载体通过以下步骤构建：步骤1，克隆ATP4B启动子序列；步骤2，将步骤1所得的ATP4B启动子序列插入携带GFP基因序列的载体质粒中，并进行验证；步骤3，将SV40T基因序列插入步骤2所得的携带本发明提供的胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体，对细胞无损伤，且具有经济简便的优点，并可以为进一步研究胃癌发生机制及开展胃癌的诊断与基因治疗奠定提供研究对象，奠定实验基础
一种黏膜上皮细胞 atp4b 启动子驱动 sv40t gfp 表达载体

[发明专利]一种永生化牦牛瘤胃上皮细胞系及其构建方法-CN202111366012.2有效
发明人：王之盛;王俊梅;胡瑞;王森 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2021-11-16 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：C2021245，分类命名为：永生化牦牛瘤胃上皮细胞系SV40T‑YREC‑hTERT。本发明将原代牦牛瘤胃上皮乳头Ⅰ型胶原酶消化后的组织贴壁培养出原代瘤胃上皮细胞，以此细胞为宿主细胞，用携带SV40T和hTERT基因的慢病毒感染细胞，经筛选扩大培养后获得永生化牦牛瘤胃上皮细胞系，该细胞系的建立解决了原代瘤胃上皮细胞培养难
一种永生牦牛瘤胃上皮细胞系及其构建方法

[发明专利]可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞及其制备方法和应用-CN201110183749.0无效
发明人：李廷玉;毕杨;龚敏;陈洁;江伟;张赟;魏小平 -专利权人：重庆医科大学附属儿童医院
申请日： 2011-07-01 - 公布日： 2011-11-23 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种可回复性永生化大鼠骨髓间充质干细胞，其携带有SV40T基因及潮霉素抗性基因，SV40T基因的两端还有同向的Loxp位点；其制备方法是将SSR69质粒与pAmhpo质粒共转染HEK293细胞
回复永生大鼠骨髓间充质干细胞及其制备方法应用

[发明专利]一种永生化的牦牛瘤胃成纤维细胞系及其构建和应用-CN202210621631.X在审
发明人：王之盛;王俊梅;胡瑞;邹华围 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2022-06-02 - 公布日： 2022-08-12 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：采用胰蛋白酶与分散酶消化牦牛瘤胃上皮组织，获得原代牦牛瘤胃成纤维细胞，采用携带SV40T的慢病毒感染原代成纤维细胞，再用嘌呤毒素筛选出稳定转入SV40T基因的永生化牦牛瘤胃成纤维细胞系并保种。
一种永生牦牛瘤胃纤维细胞系及其构建应用

[发明专利]猪FAPs永生化细胞的构建方法及用途-CN202211087073.X在审
发明人：单体中;刘事奇;有文静;顾馨;涂羽昂;汪以真 -专利权人：浙江大学
申请日： 2022-09-07 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：构建方法，包括以下步骤：1）猪FAPs细胞的分离培养；2）转染过表达SV40T的慢病毒；3）抗生素筛选成功转入SV40T慢病毒的猪FAPs细胞。
faps 永生细胞构建方法用途

[发明专利]永生化人软骨终板干细胞系的制备方法及其用途-CN201410088040.6有效
发明人：黄博;刘铭汉;王海;刘兰涛;周跃 -专利权人：中国人民解放军第三军医大学第二附属医院
申请日： 2014-03-11 - 公布日： 2014-06-18 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明的技术方案是采用慢病毒转染技术构建永生化人软骨终板干细胞系的制备方法，包括如下步骤：a、构建SV40T抗原病毒载体；b、SV40T抗原基因转染人终板干细胞；c、传代并筛选得到永生化软骨终板干细胞。
永生软骨终板干细胞系制备方法及其用途

[发明专利]一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用-CN201110193102.6无效
发明人：张智英;张婷婷;辛颖;杨涵江;张志强;徐坤;王令 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2011-07-11 - 公布日： 2012-03-07 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：所述载体为PB-rtTA-NIT-STP，是通过下述方法构建：LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建；将基因表达盒的扩增片段与PXL-Bccll连接，构建基本转基因载体PB-NIT；含有目的基因SV40T和p 53的转基因载体PB-NIT-STP的构建；含有Tet结合域rtTA的筛选载体PB-rtTA-NIT-STP的构建。
一种 piggybac 座子诱导细胞永生转基因载体构建方法及其应用

[发明专利]改良哺乳动物表达载体及其用途-CN200980109187.6有效
发明人： C-M·谢 -专利权人：雅培制药有限公司
申请日： 2009-01-15 - 公布日： 2011-02-09 - 主分类号： C12N15/00 文献下载
摘要：本发明的附加型载体促进表达SV40T Ag或EB病毒核抗原的哺乳动物细胞(例如COS7或HEK293-6E细胞)中的高蛋白质生产。该方法和系统例如用于药学药物开发和克隆中，特别是用于抗体生产。
改良哺乳动物表达载体及其用途

[发明专利]一种对PRRSV易感的猪子宫内膜上皮细胞系及其构建方法-CN201811199429.2在审
发明人：苏峰;张康;姜运良;葛利江;刘海昌;胡栋;王栋;刘营;张红焱 -专利权人：山东农业大学;宁波德方元生物技术有限公司
申请日： 2018-10-16 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种对PRRSV易感的猪子宫内膜上皮细胞系及其构建方法，是以猪子宫内膜上皮细胞作为宿主细胞，转染带有SV40T抗原基因的慢病毒表达质粒，经Puromycin药物筛选、细胞扩大培养后获得。
上皮细胞系子宫内膜传代构建子宫内膜上皮细胞慢病毒表达质粒染色体结构抗原基因宿主细胞细胞扩大药物筛选转染敏感研究

[发明专利]一种永生化人肝细胞系及其制备方法和用途-CN200910091343.2有效
发明人：娄晋宁 -专利权人：中日友好医院
申请日： 2009-08-18 - 公布日： 2010-03-03 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明所提供的永生化人肝细胞系具有原代人肝细胞的主要功能，是通过慢病毒载体向原代分离的人正常肝细胞中转染SV40T抗原和人端粒酶催化亚单位基因，利用克隆法筛选获得永生化人肝细胞系。
一种永生肝细胞及其制备方法用途

[发明专利]一种犬角膜上皮细胞永生化细胞系的构建方法和应用-CN202011055337.4有效
发明人：王亨;郭龙;李俊;李建基;孟霞;崔璐莹;董俊升 -专利权人：扬州大学
申请日： 2020-09-30 - 公布日： 2022-08-19 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种犬角膜上皮细胞永生化细胞系的构建方法和应用，包括以下步骤：将实验犬麻醉后，采集角膜组织，收集角膜上皮组织，进行上皮细胞原代培养；将纯化后的原代犬角膜上皮细胞进行携带SV40T
一种角膜上皮细胞永生细胞系构建方法应用

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