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- [发明专利]猪FAPs永生化细胞的构建方法及用途-CN202211087073.X在审
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单体中;刘事奇;有文静;顾馨;涂羽昂;汪以真
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浙江大学
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2022-09-07
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2022-11-25
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C12N5/077
- 本发明公开了一种猪FAPs永生化细胞的构建方法及用途。构建方法,包括以下步骤:1)猪FAPs细胞的分离培养;2)转染过表达SV40T的慢病毒;3)抗生素筛选成功转入SV40T慢病毒的猪FAPs细胞。进一步,4)验证猪FAPs永生化细胞的永生化能力;5)建立猪FAPs细胞成纤维分化诱导方法;6)猪FAPs细胞3D培养模型建立。本发明:1)解决了当下猪FAPs细胞来源的局限,减少了动物牺牲数量,为FAPs细胞相关研究提供了可靠模型;2)可用于研究猪肌内脂肪的形成调控及其分子机制;3)还可用于研究FAPs细胞成脂/成纤维分化的命运决定机制;4)还可用于筛选靶向促进FAPs细胞增殖或成脂分化的营养素、生物活性因子等,为细胞培养肉的研发提供可靠的模型。
- faps永生细胞构建方法用途
- [发明专利]Stk11基因敲除细胞系及其构建方法和用途-CN202111219982.X在审
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单体中;陈文涛;周炎冰;有文静;徐子叶
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浙江大学
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2021-10-20
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2022-04-29
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C12N15/867
- 本发明公开了一种Stk11基因敲除细胞系及其构建方法和用途。Stk11基因敲除细胞系的构建方法,包括以下步骤:1)根据小鼠Stk11基因全长序列和pLent‑U6‑GFP‑Puro载体的信息设计并合成含有Mlu I及BamH I酶切位点的靶向Stk11的引物序列;2)Stk11干扰质粒(简称pLent‑U6‑shStk11)的构建及其慢病毒制取:3)Stk11基因敲除的C2C12细胞系构建:用制取的pLent‑U6‑shStk11慢病毒载体转染小C2C12成肌细胞,通过嘌呤霉素筛选获得稳定敲除Stk11基因的C2C12细胞系。所述的Stk11基因敲除的细胞系的用途,用于研究敲除Stk11对成肌细胞融合、分化、肌纤维发育及相关基因表达与调控机制,用于药物筛选和制备。本发明适合于开展更多和Stk11基因功能相关的实验,可用于药物筛选和制备,应用前景广泛。
- stk11基因细胞系及其构建方法用途
- [发明专利]一种促进小鼠肌肉损伤修复的饲料及用途-CN202111256950.7在审
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单体中;王力仪;汪以真
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浙江大学
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2021-10-27
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2022-03-01
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A23K20/158
- 本发明公开了一种促进小鼠肌肉损伤修复的饲料及用途。所述饲料,普通日粮饲料中添加有质量百分比1%CLA,其中t10,c12‑CLA:c9,t11‑CLA=1:1,纯度80%。一种小鼠肌内损伤模型的构建方法,向约12周龄C57BL/6J雄性小鼠腹腔内注射200 mL的1%戊巴比妥钠麻醉后,向小鼠左右腿胫骨前肌(TA)组织中分别注射50 mL的10 mM心脏毒素(CTX)和0.9%的生理盐水,在损伤的当天饲喂普通日粮以及1%CLA添加量的普通日粮。所述的构建方法,所有组小鼠连续饲喂7d。1%CLA的日粮饲料能够促进小鼠骨骼肌损伤再生,是研究营养活性物质调控肌肉损伤再生强有力的动物模型,开拓了目前关于营养活性物质调控肌肉损伤再生的新方法,可广泛用于开展相关研究。
- 一种促进小鼠肌肉损伤修复饲料用途
- [发明专利]猪GADD45a基因的新用途及高表达细胞系的构建和应用-CN202010028437.1有效
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单体中;有文静;汪以真
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浙江大学
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2020-01-10
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2021-09-28
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C12N15/12
- 本发明公开了猪GADD45a基因的新用途及高表达细胞系的构建和应用。根据猪GADD45a基因全长序列和载体pLEX‑MCS,设计并合成含有酶切位点的GADD45a全长的扩增引物;从小猪脂肪组织中扩增得到GADD45a基因全长序列,回收并酶切,与酶切后的pLEX‑MCS连接,构建pLEX‑MCS‑GADD45a慢病毒质粒,单克隆测序鉴定并验证后,采用脂质体转染法将pLEX‑MCS‑GADD45a慢病毒质粒和pSPAX.2及pMD2.G共转染到293T细胞中,获得重组慢病毒;采用步骤2)获得的重组慢病毒转染猪IPEC‑J2细胞,获得高表达猪GADD45a基因的IPEC‑J2细胞系。猪GADD45a基因的新用途,用于调控营养吸收代谢。本发明开拓了猪GADD45a基因的新功能及其在肠道上皮细胞中研究的新方法。
- gadd45a基因用途表达细胞系构建应用
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