本发明提供一种大豆耐盐性的检测方法,具体为:首先提取待测大豆基因组DNA,再分别以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2为上下游引物,对大豆基因组DNA进行PCR扩增,对反应产物进行琼脂糖凝胶电泳,回收PCR扩增产物;然后利用限制性内切酶XbaI对回收的PCR扩增产物进行酶切,对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,若酶切产物为324bp的DNA片段,则待测大豆为耐盐大豆;若酶切产物为280bp和40bp
本发明提供了一种基于双酶切的简化基因组测序文库的构建方法,属于全基因组重测序技术领域,包括利用限制性内切酶MspI和MseI对基因组DNA进行酶切,将接头序列分别连接到酶切产物上,得到连接产物;将连接产物进行等质量混合,将得到的混合物进行双轮磁珠分选,得到350bp的片段;以得到的片段为模板,用引物对进行PCR扩增,将得到的扩增产物纯化后,构建得到基于双酶切的简化基因组测序文库;所述引物对的上游引物的序列如SEQ ID
CAPS标记鉴定小麦苗抗冻性的方法,该方法包括步骤1、提取待测小麦基因组DNA;步骤2、利用SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所述的序列对步骤1获得的小麦基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物;步骤3、利用BtsaⅠ内切酶对所述扩增产物进行酶切,获得酶切产物;步骤4、当酶切产物为185bp和70bp时,其对应扩增产物的基因型命名为CAPS‑Ta‑2‑4‑A,其对应的小麦苗期抗冻性强,当酶切产物为255bp时,其对应扩增产物的基因型命名为CAPS‑Ta‑2‑4‑G,其对应小麦苗期抗冻性弱;本发明开发的CAPS标记可以为小麦抗冻害的遗传改良提供分子标记。
本发明公开了一种利用酶切技术鉴定大骨鸡品种的方法及PCR扩增专用引物对。专用引物见序列表SEQ ID NO 1‑2。鉴定方法:利用所述PCR扩增专用引物对大骨鸡样本DNA和待测DNA混合样本同时进行PCR扩增和酶切,然后采用2.0%琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物,以大骨鸡样本DNA琼脂糖凝胶电泳图谱中两条电泳条带(294bp,460bp)为阳性结果;将待测DNA混合样本酶切产物电泳图谱与阳性结果进行比对,如果待测样DNA酶切产物琼脂糖凝胶电泳图谱中出现两条电泳条带(294bp,460bp)则认定为纯正的大骨鸡品种。该方法利用本实验室检测到的大骨鸡d‑loop区SNP变异位点对待测样本进行PCR扩增酶切检测,所设计引物和酶切酶具有良好的特异性。