本发明公开了可特异性清除髓鞘组织的转基因斑马鱼及其制备方法和应用,其中制备方法包括:将重组质粒mbp-nfsB-EGFP与Tol2转座酶mRNA共同导入野生型斑马鱼中;以及培养获得稳定遗传的转基因斑马鱼品系,所述稳定遗传的转基因斑马鱼品系即为可特异性清除髓鞘组织的转基因斑马鱼,其中,所述重组质粒mbp-nfsB-EGFP中携带的mbp基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该方法能够有效制备获得可特异性清除髓鞘组织、引起髓鞘脱失且能够稳定遗传的转基因斑马鱼,并且在甲硝唑的作用下,该转基因斑马鱼幼鱼的少突胶质细胞可以被特异性清除,使其出现髓鞘脱失的病理改变,并伴有运动功能下降,进而,该转基因斑马鱼能够为活体研究髓鞘损伤与再生的调控机制,以及相关药物筛选提供有力的动物模型。
本发明公开了一种培育标记中枢神经系统少突胶质细胞的转基因斑马鱼的方法、由该方法得到的转基因鱼的应用及其专用质粒。本发明提供一种培育转基因斑马鱼的方法,包括以下步骤:(1)构建lingo-1重组表达载体,所述lingo-1重组表达载体包含适当的核酸内切酶酶切位点、斑马鱼lingo-1基因启动子序列、荧光蛋白编码框和poly A片段;(2)用步骤(1)中的重组表达载体转化斑马鱼受精卵,得到F0代;和(3)将F0代与野生型的斑马鱼杂交,得到lingo-1特异性基因标记的转基因斑马鱼。本发明还鉴定了斑马鱼lingo-1基因启动子,其核苷酸序列为SEQ ID No:1。