本发明公开了一种猪诱导性多能干细胞诱导方法,利用外源限定因子与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因构建融合蛋白慢病毒表达载体用于猪诱导性多能干细胞的诱导,对表达外源限定因子融合蛋白的猪胎儿成纤维细胞进行培养传代,逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆,细胞集落生长状态稳定,核型正常,碱性磷酸酶检测为阳性,免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性,体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤,分离培养的细胞克隆得到猪诱导性多能干细胞。
本发明公开了一种牛诱导性多能干细胞诱导方法,利用外源限定因子与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因构建融合蛋白慢病毒表达载体用于牛诱导性多能干细胞的诱导,对表达外源限定因子融合蛋白的牛胎儿成纤维细胞进行培养传代,逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆,细胞集落生长状态稳定,核型正常,碱性磷酸酶检测为阳性,免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性,体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤,结果证实分离培养的细胞克隆具有胚胎干细胞样特征,得到牛诱导性多能干细胞。