本发明公开了一种牛支原体的iiPCR检测方法及检测试剂盒。本发明通过以牛支原体的P80基因序列为模板,从P80基因克隆出包含R1序列的M.b序列,以该R1序列为目标设计探针M.b‑specific‑Probe;其中,所述M.b序列如SEQ ID NO:1所示。相应的,本发明的检测试剂盒,其成分除了商品化的Premix Ex Taq外,主要包括特别设计的牛支原体特异性的引物、探针及配套试剂:M.b‑specific‑Forward,M.b‑specific‑Reverse,M.b‑specific‑Probe,Nuclease‑free water,阳性对照模板。本发明除了用于实验室常规检测牛支原体核酸外,特别适用于无实验室条件下(如基层兽医部门、养殖场等)的现场检测,具有高特异性和灵敏性,是一种快速、准确的牛支原体核酸检测试剂盒,具有良好的应用前景。
本发明公开了一种Hcy代谢关键酶的快速检测试剂盒及检测方法,其中,所述试剂盒由高效扩增组和焦磷酸测序组组成,其中高效扩增组包括特异性扩增引物,待扩增的模板序列包含在如序列表SEQ ID NO:1所示的序列中,高效扩增组用于待扩增模板的线性指数PCR扩增;扩增产物退火后经焦磷酸测序组测序,焦磷酸检测组包括:退火引物、DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和Klenow酶。本发明采用本发明采用线性指数扩增的目标片段扩增方法,精准设计的扩增引物扩增效率高且错配少,直接扩增出单链DNA可直接用于焦磷酸测序,无需对扩增产物进行标记和双链分离,避免了繁冗的实验步骤,也减少了强碱性试剂对扩增片段的损伤
本发明涉及检测木薯细菌性萎蔫病菌的环介导恒温扩增引物及试剂盒。所述的引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1-4。试剂盒内有模板预处理反应液、恒温扩增反应液Ⅰ。检测木薯细菌性萎蔫病菌的方法包括细菌DNA的提取、模板预处理、LAMP恒温扩增、核酸检测。本发明的试剂盒根据木薯细菌性萎蔫病菌菌株的TAL效应器蛋白质(pthBXam)保守基因序列设计引物,保证了检测方法的特异性。