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[发明专利]一种构建肠道菌群分布紊乱和抗肿瘤免疫能力失调模型的方法-CN202210503432.9有效
发明人：夏荣木;米彦军;何剑全;肖传兴;张帮周;巩锦华 -专利权人：承葛生物技术（广州）有限公司
申请日： 2022-05-09 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种构建肠道菌群分布紊乱和抗肿瘤免疫能力失调模型的方法，所述方法通过基因编辑技术将小鼠Lhpp基因敲除后构建成模型，所述模型为Lhpp基因敲除小鼠，所述Lhpp基因敲除是将小鼠通过双gRNA在Lhpp的基因两端进行切割后制备Lhpp敲除的小鼠。本发明在Lhpp基因敲除小鼠构建成功的基础上发现Lhpp基因敲除可以导致小鼠肠道菌群紊乱，最终导致小鼠抗肿瘤免疫能力减弱，并且通过多种方法证实Lhpp基因敲除小鼠会导致小鼠肠道上皮结构紊乱，定植细菌分布改变
一种构建肠道分布紊乱肿瘤免疫能力失调模型方法

[发明专利]Sqstm1全基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用-CN201810609211.3在审
发明人：李冬;吴军录;孙祖俊;权文强 -专利权人：上海市同济医院
申请日： 2018-06-13 - 公布日： 2018-11-06 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：发明公开了一种Sqstm1全基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用，所述小鼠动物模型是敲除Sqstm1基因的小鼠。本发明基于CRISPR/Cas9基因敲除技术构建Sqstm1基因敲除小鼠模型，其构建方法包括如下步骤：步骤一、设计sgRNA和Cas9 RNA并体外转录成mRNA，将有活性的sgRNA和Cas9 RNA显微注射入小鼠受精卵中，获得Sqstm1基因敲除小鼠；步骤二、对Sqstm1基因敲除小鼠动物模型的鉴定。本发明基于CRISPR/Cas9基因敲除技术首次构建了Sqstm1基因敲除的小鼠动物模型，为研究Sqstm1与自噬、肿瘤等疾病的关系提供便捷、可靠、经济的动物模型。
动物模型构建基因敲除小鼠基因敲除小鼠敲除小鼠全基因小鼠受精卵关系提供技术构建显微注射应用发明转录并体敲除肿瘤基因疾病应用研究

[发明专利]基因敲除小鼠在制备限制型心肌病动物模型中的应用-CN202011643472.0有效
发明人：杨晓;李振华;王剑;王添乐;侯宁 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2022-02-11 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：本发明公开了基因敲除小鼠在制备限制型心肌病动物模型中的应用。该基因敲除小鼠的构建方法包括特异性敲除受体小鼠心肌细胞的Hgs基因，得到所述基因敲除小鼠。该基因敲除小鼠出现心肌纤维化、钙化、心肌细胞死亡及心脏舒张功能受损，其出现的病理改变与人类限制型心肌病类似。
基因小鼠制备限制心肌动物模型中的应用

[发明专利]Amy1基因敲除小鼠动物模型的构建方法及应用-CN201911060539.5有效
发明人：隋中泉;徐义娟;高海德;李紫君;马梦婷;温雅迪 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2019-11-01 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种Amy1基因敲除小鼠动物模型的构建方法与应用；基于CRISPR/Cas9基因敲除技术构建Amy1基因敲除小鼠模型，其构建方法包括如下步骤：步骤一、设计sgRNA和Cas9 RNA并体外转录成mRNA，将有活性的sgRNA和Cas9 RNA显微注射入小鼠受精卵中，获得Amy1基因敲除小鼠；步骤二、对Amy1基因敲除小鼠动物模型的鉴定。其优点表现在：本发明使用CRISPR/Cas9基因敲除技术，首次建立了Amy1基因敲除的小鼠动物模型，为研究Amy1基因与相关疾病的关系提供便捷、可靠的动物模型。
amy1 基因小鼠动物模型构建方法应用

[发明专利]Arvcf基因敲除动物模型的构建方法及应用-CN202110251519.7有效
发明人：李明定;陈佳丽;韩海军 -专利权人：浙江大学
申请日： 2021-03-08 - 公布日： 2022-07-19 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种建立Arvcf基因敲除小鼠模型的方法及应用，所述小鼠模型是敲除了Arvcf基因中的七个外显子的小鼠，同时揭示了一种建立Arvcf基因敲除小鼠模型的方法。首先确定待敲除基因Arvcf的敲除区域，然后设计特异性的sgRNA和对应的引物并合成，再将构建好的sgRNA/Cas9载体线性化并纯化后进行体外转录，最后通过显微注射一起注射入小鼠的受精卵中，并将其移植到假孕母鼠子宫进行Arvcf基因敲除小鼠模型的建立。收集所获得的子代小鼠的尾巴并抽提DNA，使用两对引物通过两次PCR反应以及测序以确认所获得的小鼠为野生型或敲除Arvcf基因目的区域的纯合或杂合型小鼠。该基因敲除小鼠模型可用于研究ARVCF在所参与的精神类疾病中的作用。
arvcf 基因动物模型构建方法应用

[发明专利]RPRM基因敲除小鼠模型及其构建方法与应用-CN201910405248.9有效
发明人：杨红英;张雅瑞;王敬东;张力元 -专利权人：苏州大学
申请日： 2019-05-16 - 公布日： 2021-10-15 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明揭示了一种RPRM基因敲除小鼠模型，所述小鼠模型是被敲除了RPRM（又名Reprimo）基因的小鼠，同时揭示了一种RPRM基因敲除小鼠模型的构建方法，通过对小鼠待敲除基因的靶位点的确定及sgRNA的设计，并进行扩增、活性测试后，将有活性的sgRNA和Cas9注入小鼠体内进行小鼠模型的建立。本发明获得的RPRM基因敲除小鼠为RPRM在胚胎发育中的功能、对组织和个体放射敏感性的影响及其在肿瘤发生发展中的作用等方面的研究提供可靠的动物模型。
rprm 基因小鼠模型及其构建方法应用

[发明专利]小鼠进行基因敲除的方法及构建的LMNA基因敲除小鼠模型-CN202310506530.2在审
发明人：范柠粼;武会娟;王玮;丁晓婷 -专利权人：北京实验动物研究中心有限公司
申请日： 2023-05-06 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本申请提供一种用于靶向小鼠LMNA基因的gRNA、对小鼠进行基因敲除的方法以及LMNA基因敲除的小鼠模型的构建方法。其中，所述方法包括利用基因编辑技术，破坏小鼠的LMNA基因的第二外显子区域。本申请设计了特异性靶向小鼠LMNA基因的两条gRNA，利用Cas9蛋白将LMNA基因的第二外显子敲除，造成移码突变，从而达到对小鼠进行基因敲除的目的。本申请对小鼠基因改造的方法简单易行，周期短，利用该方法构建的小鼠模型可以充分研究LMNA基因在衰老等疾病的致病机理，并为进一步开发针对此类疾病的治疗方式提供服务。
小鼠进行基因方法构建 lmna 模型

[发明专利]基于CRISPR/Cas9技术构建LCR基因敲除动物模型的方法及其应用-CN202111674547.6在审
发明人：郝冰涛;廖世秀;秦利涛;娄桂予;张玉薇;卞莎莎;吴东;张梦汀;郭梁洁 -专利权人：河南省人民医院
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明属于生物工程和基因编辑技术领域，具体涉及一种基于CRISPR/Cas9技术构建LCR基因敲除的动物模型方法及其应用。LCR基因敲除动物模型的构建方法包括如下步骤：1)靶向小鼠LCR序列的gRNA设计：2)将步骤1)中的一对gRNA进行纯化，并与cas9的mRNA共同注射小鼠胚胎，获得F0代小鼠；3)鉴定LCR基因型，筛选出阳性F0代小鼠；4)阳性F0代小鼠与野生型小鼠杂交得到F1代小鼠，F1代杂合小鼠自交获得纯合后代，从而构建得到LCR基因敲除的动物模型。本发明基于CRISPR/Cas9技术实现对LCR基因的定点敲除，具有操作简单，LCR基因敲除效率高的优势。
基于 crispr cas9 技术构建 lcr 基因动物模型方法及其应用

[发明专利]一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用-CN202211296862.4在审
发明人：庞庆丰;吴亚先;高智琦;陈丹;张艳丽;李胜朋;满凌云 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-10-21 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： A01K67/027 文献下载
摘要：本发明公开了一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用，属于生物技术领域。本发明提供的小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型由以下步骤构建：构建同源重组DNA载体；通过体外转录获得Cas9mRNA和针对Hmox1基因的gRNA；将同源重组DNA载体、Cas9mRNA和gRNA注射到小鼠的受精卵中；培育获得条件性基因敲除小鼠；通过测序和核酸胶电泳鉴定基因型；得到的条件性敲除小鼠与其他组织特异性表达Cre的小鼠杂交获得相应组织或细胞条件性敲除小鼠，从而实现特定组织或细胞类型的精准研究；并且证明Hmox1诱导性条件性敲除明显加重急性肺损伤。本发明能够克服现有技术中Hmox1全身基因敲除小鼠胚胎致死，无法构建小鼠模型的困难，辅助Hmox1在疾病中的研究。
一种小鼠条件诱导 hmox1 基因模型构建方法应用

[发明专利]B细胞条件性敲除DHX9基因小鼠模型的构建方法-CN202211094104.4在审
发明人：凌飞;张琴琴;罗微;刘惠生;金亚彬 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2022-09-07 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种B细胞DHX9基因条件性敲除flox小鼠的制备方法，该方法利用在DHX9基因关键外显子两端添加Cre重组酶靶向序列loxP位点，构建条件性基因敲除载体，再进行显微注射的方法，制备可用于DHX9条件性基因敲除的flox小鼠。该小鼠与Cre小鼠交配即可获得B细胞特异性DHX9基因敲除小鼠。本发明基于CRISPR/Cas9技术的条件性基因敲除方法，可减少对其他细胞的危害，只需Cre工具鼠即可实现特异性基因敲除；且获得的DHX9基因条件性敲除小鼠还可以作为研究结直肠癌等疾病的动物模型，这对于研究DHX9基因的功能，尤其是研究DHX9基因在结直肠癌进程中的功能，具有重要的应用高价值。
细胞条件 dhx9 基因小鼠模型构建方法

[发明专利]构建在海马体区域特异性敲除IKKα基因的小鼠模型的方法及打靶载体和试剂盒-CN201610810333.X有效
发明人：陶永光;赖巍巍;刘双 -专利权人：中南大学
申请日： 2016-09-08 - 公布日： 2018-08-21 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了构建在海马体区域特异性敲除IKKα基因的小鼠模型的方法及打靶载体和试剂盒。本发明利用Cre‑LoxP重组系统构建在特定小鼠组织中敲除IKKα基因，从而建立IKKα基因敲除的转基因小鼠，以便在动物的整体水平研究NF‑κB信号通路与疾病尤其是肿瘤的作用机制。同时，为便于确定和监测IKKα基因在海马体区域的特异性敲除是否会对小鼠行为学造成影响，在本发明中利用红色荧光素酶RFP720连接至转基因载体中。即，本发明通过基因打靶技术，基于iRFP720近红外荧光蛋白和Cre‑LoxP基因敲除系统降低小鼠海马体区域内源性IKKα基因的表达，进而通过动物成像系统监测转基因小鼠的活体成像。
敲除海马体区域构建转基因小鼠打靶载体小鼠模型试剂盒基因打靶技术近红外荧光转基因载体动物成像红色荧光活体成像基因敲除系统监测小鼠行为小鼠组织信号通路整体水平重组系统作用机制内源性素酶小鼠蛋白肿瘤疾病监测研究

[发明专利]一种基于lncENAF基因敲除的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法及其应用-CN202310831627.0在审
发明人：刘林;李伟;王刚林 -专利权人：温州医科大学
申请日： 2023-07-06 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于lncENAF基因敲除的非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建方法及其应用，涉及生物技术领域。所述该构建方法包括以下步骤：将野生型雌性小鼠的lncENAF基因敲除，获得基因敲除雌鼠；将所述基因敲除雌鼠与Alb‑Cre工具雄鼠交配，获得F1小鼠；将所述F1小鼠饲喂5个月，得到所述非酒精性脂肪肝小鼠模型本发明开发了一种利用基因编辑构建非酒精性脂肪肝小鼠模型的方法，通过CRISPR‑Cas‑9技术获得lncENAF基因敲除的小鼠，此小鼠正常饮食，在5个月后会自发形成非酒精脂肪肝病变，因此可用于非酒精性脂肪肝相关疾病的研究和相关药物的开发
一种基于 lncenaf 基因酒精性脂肪肝小鼠模型构建方法及其应用

[发明专利]内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法-CN201711139533.8有效
发明人：张钟文;廖琳;董建军;吴红霞;张瀚允 -专利权人：山东省千佛山医院
申请日： 2017-11-16 - 公布日： 2020-03-17 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种内皮细胞条件性敲除CCR5基因小鼠模型的构建方法：首先，获得CCR5loxp/loxp小鼠，然后与Tie‑2‑cre/ERT2小鼠交配，得到在内皮细胞中特异性敲除CCR5基因的杂合子小鼠，然后该杂合子小鼠进行相互交配，从而得到在内皮细胞中特异性敲除CCR5基因的纯合子小鼠。本发明的构建方法，通过CRISPR/Cas9系统构建条件性内皮细胞基因敲除小鼠，在小鼠体内以一种细胞特异性方式引入突变,从而使CCR5靶基因的缺失发生在试验动物的某一特定的组织器官，最大限度达到机理研究的可控性，克服了常规基因敲除术不区分不同组织或细胞，在小鼠体内行所有组织或细胞剔除靶基因的弊端。
内皮细胞条件 ccr5 基因小鼠模型构建方法

[发明专利]一种Cyp1a1基因敲除小鼠模型的构建方法及其在脓毒症中的应用-CN202010953304.5有效
发明人：马晓媛;王芳杰;唐婉琦;李卫;杨雪;梁华平 -专利权人：中国人民解放军陆军特色医学中心
申请日： 2020-09-11 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开一种Cyp1a1基因敲除小鼠模型的构建方法及其在脓毒症中的应用，构建方法包括：确定小鼠待敲除基因的靶位点，设计sgRNA，其序列如SEQ ID No:2‑5所示；将有活性的sgRNA与Cas9mRNA或Cas9 Protein共注射或共电转至小鼠受精卵细胞中，并将受精卵移植入受体母鼠孕育，获得F0代基因敲除小鼠；将F0代小鼠与野生型小鼠杂交，获得F1代Cyp1a1基因敲除小鼠。本发明成功制备了Cyp1a1基因敲除小鼠模型，并首次将其应用于脓毒症病理进程研究中，意外地发现Cyp1a1基因敲除小鼠的细菌清除能力显著增强，在应对内毒素血症与革兰氏阴性菌攻击时的生存能力提高，抗感染能力增强本发明还首次将Cyp1a1基因敲除小鼠运用在脓毒症的代谢调控研究中，为危重症领域相关代谢机制研究提供可靠的动物模型。
一种 cyp1a1 基因小鼠模型构建方法及其脓毒症中的应用

[发明专利]一种免疫缺陷小鼠模型、其制备方法及应用-CN201610103735.6在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：深圳市体内生物医药科技有限公司
申请日： 2016-02-25 - 公布日： 2017-09-01 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及一种免疫缺陷小鼠模型、其制备方法及应用，所述制备方法采用NOD‑Scid IL2rg‑/‑免疫缺陷型小鼠(NSI小鼠)，敲除Foxnl基因或Fah基因。本发明通过在NSI小鼠上敲除Fah基因得到NSIF小鼠，所述NSIF小鼠可用于高效构建新型人源化小鼠模型，可用于肝脏生理和病理研究；本发明通过在NSI小鼠上敲除Foxn1基因得到NSIN小鼠，所述NSIN小鼠无体毛，免疫系统进一步缺陷，易于实体瘤的构建、监控和测量。
一种免疫缺陷小鼠模型制备方法应用

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