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[发明专利]一种平衡染色体动物模型的构建方法-CN202310878186.X在审
发明人：琚存祥;张宇曦;张明坤;侯欢欢;赵静 -专利权人：江苏集萃药康生物科技股份有限公司
申请日： 2020-04-29 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明提供了一种近乎完整染色体倒置的平衡染色体以及具有平衡染色体动物模型的构建方法，使用位点特异性重组酶系统介导的重组技术，在染色体着丝粒侧插入片段1，包括位点特异性重组酶系统一侧识别位点，该位点的上游具有正选择标记基因表达元件片段A；在端粒侧插入片段2，包括位点特异性重组酶系统另侧识别位点，该位点的上游具有反向的正选择标记基因表达元件片段B，经相应的位点特异性重组酶诱导实现两个位点特异性重组酶系统识别位点之间的序列倒置，正选择标记基因表达元件片段A和B组合实现正选择标记基因的表达，利用正负筛选法筛选得到平衡染色体。本发明所述方法可用于建立所有染色体近乎全部倒置的平衡染色体动物品系。
一种平衡染色体动物模型构建方法

[发明专利]制备电转感受态酵母细胞的方法以及使用这些细胞的方法-CN201780069926.8有效
发明人：塞巴斯蒂安·邦克;多米尼克·莫勒;菲力士·尤佛多本 -专利权人：伊玛提克斯生物技术有限公司
申请日： 2017-11-13 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明涉及酵母细胞的改进的酵母转化，以及由此转化得到的酵母细胞库。更具体地，本发明涉及通过电穿孔进行的酵母转化。
制备感受态酵母细胞方法以及使用这些

[发明专利]Ago蛋白的用途及组合物和基因编辑方法-CN201910870351.0有效
发明人：仪宏;冯慧勇;李天明;刘金雷 -专利权人：石家庄埃佤基因科技有限公司
申请日： 2019-09-16 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明提供了一种Ago蛋白的用途及组合物和基因编辑方法，本发明的真核细胞靶向基因编辑方案，通过使外源Ago蛋白与同源重组片段出现于真核细胞中，进行所述细胞内的基于同源重组的靶向基因编辑，其不需要向导DNA或向导RNA的靶向定位，仅需外源Ago蛋白与同源重组片段便可引发真核细胞的基因编辑，应用前景广泛。
ago 蛋白用途组合基因编辑方法

[发明专利]一种蜘蛛的基因编辑方法-CN202010662596.7有效
发明人：张蔚;李枢强;李逢源;杨晗 -专利权人：北京大学
申请日： 2020-07-10 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本申请提供了一种蜘蛛的基因编辑方法，通过优化显微注射技术和选择合适时期的受精卵，极大的提高了蜘蛛显微注射的成活率和基因编辑的效率，从而实现了利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术在蜘蛛受精卵上进行内源基因的精准编辑。
一种蜘蛛基因编辑方法

[发明专利]一种目的基因多拷贝整合到酿酒酵母染色体rDNA的方法-CN202110864810.1有效
发明人：沈煜;郑会会 -专利权人：山东大学
申请日： 2021-07-29 - 公布日： 2023-09-26 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种目的基因多拷贝整合到酿酒酵母染色体rDNA的方法，是将待转化的酿酒酵母先在含有羟基脲的培养基上进行预培养，然后再通过常规转化方法将两端带有rDNA同源序列的DNA片段转入酿酒酵母，最后在筛选培养基上筛选转化子实现。本发明方法利用rDNA拷贝动态平衡的特点，建立了一次转化过程即在rDNA上整合了18个拷贝目的基因的方法。该方法以rDNA为整合靶点，操作便捷，无需额外引入除了重组DNA片段之外的其他DNA；并且，由于其所依赖的特殊机制，理论上可以和现有其他各种高拷贝重组方法联用，实现目的基因更高拷贝的整合，为基因编辑又提供了一种方法和有力的工具。
一种目的基因拷贝整合酿酒酵母染色体 rdna 方法

[发明专利]用于SARS-COV-2感染的人源化小鼠模型-CN202180052546.X在审
发明人： L·D·舒尔兹 -专利权人：杰克逊实验室
申请日： 2021-07-14 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本公开提供了经工程化以表达人血管紧张素转化酶2(huACE2)序列的转基因免疫受损小鼠。huACE2序列可与人角蛋白18(hKRT18)启动子或内源性小鼠血管紧张素转化酶2(mACE2)启动子可操作地连接。本公开的转基因免疫受损小鼠可用于评价用于减少或预防SARS‑COV‑2感染的测试药剂的方法。
用于 sars cov 感染人源化小鼠模型

[发明专利]通过突变PUS1蛋白构建贫血小鼠模型的方法和应用-CN202310335299.5在审
发明人：初雅婧;袁卫平;石得阳 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）;细胞生态海河实验室
申请日： 2023-03-31 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过突变PUS1蛋白构建贫血小鼠模型的方法和应用。本发明利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，在基因水平使Pus1基因发生包括点突变和移码突变在内的原位突变，从而导致PUS1蛋白失活或缺失，获得两种表现为贫血的小鼠模型。两种PUS1突变小鼠均表现为外周血血红蛋白水平降低、骨髓红系发育阻滞及假尿嘧啶修饰的缺失。本发明小鼠模型可以有效地实现对贫血及红系发育阻滞的潜在药物进行体内的定性和/或定量的评价，具有广阔的应用前景。
通过突变 pus1 蛋白构建贫血小鼠模型方法应用

[发明专利]一种提高基因敲除效率的方法及其应用-CN202310197297.4在审
发明人：杨艳坤;李康;白仲虎;杨少杰;刘秀霞;刘春立;李业;詹锦玲 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-03-03 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高基因敲除效率的方法及其应用。本发明提供的敲除技术是基于CRISPR‑Cas9质粒，进一步采用“回补策略”来进行目标基因的敲除。本发明所述的“回补策略”即是将目标敲除基因突变后表达于外源质粒，将基因组上的目标基因敲除后再将回补质粒消除，从而达到目标基因的缺失。“回补策略”的使用使得目标基因的敲除效率从0提高到了8％。
一种提高基因效率方法及其应用

[发明专利]构建原位原发食管癌动物模型的方法-CN202010684524.2有效
发明人：陈崇;王健;刘玉 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2020-07-15 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种原位原发的食管癌肿瘤模型制备方法，属于肿瘤动物模型领域。本发明通过将小鼠食管细胞以特定培养基培养成类器官，再将类器官进行基因编辑，注射回小鼠食管，使其发展成肿瘤。本发明的方法相比基因工程肿瘤动物模型耗时短，成瘤率高；相比移植瘤动物模型，具有肿瘤发生驱动因素明确，器官微环境更加真实等特点。
构建原位食管癌动物模型方法

[发明专利]一种CRISPR-Cas9介导的同步双基因编辑系统及其在曲霉中的应用-CN202310756480.3在审
发明人：陆玲;张驰;陈梓青;裴玲玲 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2023-06-25 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种CRISPR‑Cas9介导的同步双基因编辑系统及其在曲霉中的应用，同步双基因编辑系统包括CRISPR‑Cas9系统和Cre‑loxP系统，CRISPR‑Cas9系统对靶基因进行定点敲除，Cre‑loxP系统与高表达的基因组成修复模板，修复模板在微同源臂的引导下整合在敲除靶基因的位置；修复模板包括组成型启动子、营养筛选标记、高表达的基因以及来自靶基因的微同源臂。本发明成功构建了CRISPR‑Cas9和Cre‑loxP技术体系，完成一次转化实现同步敲除一个基因和高调另一个基因的双基因编辑系统，并通过Cre‑loxP技术进行营养标记pyroA的重复利用，从而实现多基因的连续编辑。
一种 crispr cas9 同步基因编辑系统及其曲霉中的应用

[发明专利]一种体内动态观察溶酶体损伤的方法-CN202310037884.7在审
发明人：陈小翠;杨陈;刘华锋;汤济鑫;叶蓁楠;吴丹;黄丽凤;李东仪 -专利权人：广东医科大学附属医院
申请日： 2023-01-10 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种体内动态观察溶酶体损伤的方法，构建可以组织特异性动态观察溶酶体损伤及修复的转基因小鼠，用于评估溶酶体的动态变化。采用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的方式，在小鼠基因位点定点插入CMV‑mRFP‑EGFP‑LGALS3‑WPRE‑polyA表达框，获得可过表达CMV‑mRFP‑EGFP‑LGALS3‑WPRE‑polyA基因的定点敲入杂合子小鼠；之后运用体内造模后的小鼠进行动态观察溶酶体损伤，本申请构建了组织特异性的动态观察溶酶体损伤及修复的小鼠，用于直观及动态反应组织溶酶体损伤的变化，进而反应组织损伤情况。
一种体内动态观察溶酶体损伤方法

[发明专利]一种平衡染色体动物模型的构建方法-CN202010358776.6有效
发明人：琚存祥;张宇曦;张明坤;侯欢欢;赵静 -专利权人：江苏集萃药康生物科技股份有限公司
申请日： 2020-04-29 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明提供了一种近乎完整染色体倒置的平衡染色体以及具有平衡染色体动物模型的构建方法，使用位点特异性重组酶系统介导的重组技术，在染色体着丝粒侧插入片段1，包括位点特异性重组酶系统一侧识别位点，该位点的上游具有正选择标记基因表达元件片段A；在端粒侧插入片段2，包括位点特异性重组酶系统另侧识别位点，该位点的上游具有反向的正选择标记基因表达元件片段B，经相应的位点特异性重组酶诱导实现两个位点特异性重组酶系统识别位点之间的序列倒置，正选择标记基因表达元件片段A和B组合实现正选择标记基因的表达，利用正负筛选法筛选得到平衡染色体。本发明所述方法可用于建立所有染色体近乎全部倒置的平衡染色体动物品系。
一种平衡染色体动物模型构建方法

[发明专利]一种间充质干细胞的改造方法-CN202210112376.6在审
发明人：请求不公布姓名 -专利权人：东螈生命科技（浙江）有限公司
申请日： 2022-01-29 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本公开涉及一种间充质干细胞(MSCs)的改造方法，具体涉及改造间充质干细胞的方法、提高MSCs内目标基因表达水平的方法、维持MSCs的干细胞特性的方法，改造的MSCs、药物组合物及用途。本公开中通过对MSCs中与干细胞特性维持基因的启动子区进行表观遗传学修饰，实现对目标基因的表达调控，获得长期保持干细胞特性的改良型MSCs。本公开中对目标基因启动子区的微细编辑不影响基因结构和功能，其潜在生物安全风险极低；对MSCs的改造大幅提升了其可稳定传代的代数，有效遏制了MSCs在规模化培养中的干细胞特性退化趋势，增进了MSCs在疾病治疗、医学组织工程新材料应用、生物活性物质开发等领域的适用性。
一种间充质干细胞改造方法

[发明专利]一种免疫缺陷小鼠、其制备方法及应用-CN201911347317.1有效
发明人：请求不公布姓名 -专利权人：湖南昭泰生物医药有限公司
申请日： 2017-01-19 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本申请是201780000020.0的分案申请，本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及一种免疫缺陷小鼠、其制备方法及应用，所述制备方法采用NOD‑Scid IL2rg‑/‑免疫缺陷型小鼠(NSI小鼠)，敲除Foxnl基因或Fah基因。本发明通过在NSI小鼠上敲除Fah基因得到NSIF小鼠，所述NSIF小鼠可用于高效构建新型人源化小鼠模型，可用于肝脏生理和病理研究；本发明通过在NSI小鼠上敲除Foxn1基因得到NSIN小鼠，所述NSIN小鼠无体毛，免疫系统进一步缺陷，易于实体瘤的构建、监控和测量。
一种免疫缺陷小鼠制备方法应用

[发明专利]一种肠易激综合征小鼠模型及其应用-CN202010430662.8有效
发明人：刘翠华;汪静 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2020-05-20 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种肠易激综合征小鼠模型及其应用，属于生物医药技术领域。本发明首次发现了敲除Trim27基因后，小鼠可以自发肠易激综合征。本发明通过对小鼠模型肠通透性、肠细胞因子表达、肠5羟色胺浓度、肠道菌群、结肠长度等指标进行分析，发现以上指标的变化趋势与临床报道的肠易激综合征患者的上述指标趋势一致，表明该小鼠模型是一种有效的自发肠易激综合征模型，可以用于肠易激综合征相关药物筛选研发、基础科研等领域，同时在肠易激综合征的诊断、预防、治疗方面将有着广阔的应用前景。
一种肠易激综合征小鼠模型及其应用

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