本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种褐藻胶裂解酶、其制备方法及应用,所述褐藻裂解酶的成熟蛋白包含如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,其前体蛋白包含如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。所述褐藻裂解酶性质稳定,比酶活高达4600U/mL以上,可将褐藻胶酶解为具有特殊生物学活性的小分子褐藻寡糖,具备工业应用的潜质。
本发明的目的是提供一种制备高特异性褐藻寡糖的方法,其中使用的酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明酶用于降解褐藻胶来制备褐藻寡糖。本发明所筛选获得的蛋白酶在酶解褐藻胶时获得特异性的产物,从而使反应的副产物更少,有利于后续更方便的通过胶柱层析来分离单一寡糖,从而有效的提高了制备褐藻寡糖的效率,节省了成本。
本发明的目的是提供一种制备高特异性褐藻寡糖的酶,所述酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明酶用于降解褐藻胶来制备褐藻寡糖。本发明所筛选获得的蛋白酶在酶解褐藻胶时获得特异性的产物,从而使反应的副产物更少,有利于后续更方便的通过胶柱层析来分离单一寡糖,从而有效的提高了制备褐藻寡糖的效率,节省了成本。
本发明涉及褐藻胶裂解酶,具体的说是三种降解褐藻胶的褐藻胶裂解酶的编码基因及其应用。褐藻胶裂解酶分别为褐藻胶裂解酶AlgAT0,AlgAT1和AlgAT5,所述褐藻胶裂解酶的编码基因碱基序列依次为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3。本发明还利用基因工程的方法,将褐藻胶裂解酶的基因克隆到大肠杆菌和毕赤酵母中。获得可制备褐藻胶酶的大肠杆菌重组菌株及毕赤酵母菌株。重组酶的性质稳定,可用于褐藻胶的高附加值转化,且三个酶的酶活均远远高出目前为止已报道的数值,具有很好的工业应用潜质。