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[发明专利]一种Msyb融合标签的大肠杆菌可溶性蛋白表达载体、构建方法及应用-CN201811079282.3在审
发明人：邓春泉;吴配配;李因来;周旭一 -专利权人：杭州博茵生物技术有限公司
申请日： 2018-09-17 - 公布日： 2020-03-24 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于蛋白工程技术领域，尤其是涉及一种Msyb融合标签的大肠杆菌可溶性蛋白表达载体、构建方法及应用。本发明所提供的Msyb融合标签的大肠杆菌可溶性蛋白表达载体的构建方法所制备得到的Msyb融合标签的大肠杆菌可溶性蛋白表达载体可以较好地提高目的蛋白表达量及提高目的蛋白的可溶性，目的蛋白可溶性表达将为蛋白分离纯化、蛋白活性研究奠定基础，在基因工程、蛋白质工程等生物学领域中将存在广泛的应用。
一种 msyb 融合标签大肠杆菌可溶性蛋白表达载体构建方法应用

[发明专利]一种稳定高效表达乳铁蛋白基因的载体及其应用-CN202310880327.1在审
发明人：王东芳 -专利权人：三亚铁蛋生物科技有限公司
申请日： 2023-07-18 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种稳定高效的表达乳铁蛋白基因的载体及其在制备用于生产乳铁蛋白的植物细胞或植物方面的应用。该载体包括以下组成部分：1)植物可表达的乳铁蛋白基因序列；2)启动子序列；3)可选的转录终止子。本发明提供了一种新型的拟南芥AtRBCS基因启动子与乳铁蛋白基因组合的表达载体，该启动子可以显著提高乳铁蛋白在植物中的表达量。本发明通过优化表达调控元件，应用适合的信号肽等方式来提高乳铁蛋白在植物中的表达量，一方面提高乳铁蛋白的表达量，另一方面提高目标蛋白的稳定性。该载体可在植物细胞中高效表达乳铁蛋白，具有广泛的应用前景。该载体可用于生产高质量乳铁蛋白，用于药物、食品和化妆品等领域。
一种稳定高效表达铁蛋白基因载体及其应用

[发明专利]一种重组胸腺肽α1的制备方法-CN201210086281.8有效
发明人：蒋为民;柴向东;丁佳萱;罗豪晖;赵秦;朱瑞东;韩杰;高琰 -专利权人：深圳市海王英特龙生物技术股份有限公司
申请日： 2012-03-28 - 公布日： 2012-09-12 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明利用基因重组技术制备重组胸腺肽α1，包括人工合成融合蛋白基因并将所述融合蛋白基因重组到载体质粒pet-22b中构建表达载体，将该表达载体转化到宿主大肠杆菌中构建工程菌，将所述工程菌进行发酵并诱导融合蛋白表达，对表达产物进行纯化制备后得到融合蛋白目标产物。
一种重组胸腺肽制备方法

[发明专利]重组CL7-CVN蛋白及其制备方法与应用-CN201911203478.3有效
发明人：余晓岚;王斌;王飞;马立新;杨智;刘敏;高丹;陈冠军 -专利权人：湖北大学
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2021-05-04 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组CL7‑CVN蛋白及其制备方法与应用。重组CL7‑CVN蛋白制备方法包括：将其编码序列克隆到表达载体上，得到重组表达载体；将重组表达载体转化到宿主细胞中进行表达和纯化，得到重组CL7‑CVN蛋白。本发明通过合成的CVN基因和基因组装方法，构建了融合表达载体，实现其在大肠杆菌中的高效可溶性表达；根据重组CL7‑CVN蛋白的耐热性，通过热处理及3C蛋白酶酶切，可通过一步亲和层析快速得到重组CL7‑CVN蛋白和CVN蛋白，纯度可达99％。本发明提供的制备方法可使重组蛋白表达量显著提高、活性更稳定、纯化方法更简单；本发明制备的重组CL7‑CVN蛋白和CVN蛋白都具备抗病毒活性。
重组 cl7 cvn 蛋白及其制备方法应用

[发明专利]一种纯化蛋白的方法-CN202310004876.2在审
发明人：王兰;武刚;于传飞;王文波;杜加亮;付志浩;徐刚领;李萌;刘春雨;俞小娟;段茂芹;杨雅岚;崔春博 -专利权人：中国食品药品检定研究院
申请日： 2023-01-03 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种纯化蛋白的方法，所述方法包括可操作的连接编码信号肽、标签、蛋白酶裂解位点的核酸至编码目的蛋白的核酸序列上，从而生成编码融合蛋白的表达载体；将所述的表达载体导入宿主细胞。本发明还提供了由上述方法构建而成的蛋白、编码蛋白的核酸以及一种表达载体及宿主细胞。经实验证明，使用本发明的方法纯化的蛋白具有较高的表达量和纯度。
一种纯化蛋白方法

[发明专利]布鲁氏菌L7/L12、Omp31、Rsα、sodC免疫蛋白共表达载体构建和表达方法-CN201410378291.8在审
发明人：周继章;曹小安;李兆才;陈启伟;宫晓炜 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2014-08-01 - 公布日： 2014-11-19 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了布鲁氏菌L7/L12、Omp31、Rsα、sodC免疫蛋白共表达载体及其构建和表达方法，所公开的共表达载体分别为在同一宿主菌中表达的双表达载体pETDuet-1、pRSFDuet-1，两个双表达载体上分别连接有两种布鲁氏菌免疫蛋白的编码基因在此基础上本发明还公开了所述共表达载体的构建方法和表达方法。本发明公开的共表达载体能够同时表达四个免疫功能良好的布鲁氏菌L7/L12、Omp31、Rsα、sodC免疫蛋白，有效用于制备布鲁氏菌基因工程亚单位疫苗、防控多种布鲁氏菌病。
布鲁氏菌 l7 l12 omp31 rs sodc 免疫蛋白表达载体构建方法

[发明专利]干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法-CN202010295429.3在审
发明人：刘荣坤;刘芳;岳绪娥 -专利权人：北京本真工坊生物科技有限公司
申请日： 2020-04-15 - 公布日： 2020-07-24 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法，其中制备方法包括：从人体组织中分离干细胞并进行培养；结合PB转座子、EF1A启动子序列、KOZAK序列、所要表达的目的蛋白序列、T2A序列、所要表达目的蛋白序列、CD33信号肽序列、IRES序列、PURO序列和附加体系统，构建重组表达载体；将重组表达载体加入干细胞的培养悬液，采用电转染方式获得能够表达目的蛋白的干细胞。通过本发明的技术方案，可以将重组表达载体转移至干细胞中，迅速获得高表达的细胞，可以增加两种细胞因子的协同作用，使两种细胞因子同时表达，使重组表达载体质粒在干细胞内长时间存在并高效表达目的蛋白。
干细胞高效表达目的蛋白制备方法应用

[发明专利]铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白reFPO及制备方法和应用-CN201911385096.7有效
发明人：郭刚;冯强;张欣;吴翼;熊蜂;罗莉;张娇娇;杨念 -专利权人：重庆艾力彼生物科技有限公司
申请日： 2019-12-28 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明属于细菌性抗原技术领域，公开了一种铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白reFPO及制备方法和应用，所述铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白reFPO的核苷酸序列为SEQ ID NO:1；氨基酸序列为SEQ ID NO:2；重组表达载体包含核苷酸序列SEQ ID NO:1。本发明采用pGEX‑6p‑1载体来构建重组表达质粒，表达重组蛋白reFPO，pGEX是表达融合蛋白的载体，所表达的融合蛋白中含有一个蛋白纯化的GST标签。与其他融合载体相比，pGEX系列载体具有纯化条件温和、步骤简单、不需要变性剂的加入，从而使纯化后的蛋白能最大限度保持其空间构象和免疫原性。
铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白 refpo 制备方法应用

[发明专利]用于昆虫细胞的合成的表达载体-CN200880021845.1有效
发明人： G·V·L·王;D·E·克莱门茨;C·威克斯-利维 -专利权人：夏威夷生物技术公司
申请日： 2008-04-28 - 公布日： 2010-03-31 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明旨在用于在昆虫细胞中表达天然样异源蛋白质的经优化的表达载体。本发明的组成为代表了表达载体的元件的核苷酸序列，当所述元件相组合时，导致异源蛋白质的增强的表达和分泌。在经优化的载体中所包含的元件都是合成得到的，或者为天然存在的昆虫序列的经修饰的变体。当编码蛋白质的核苷酸序列与所述载体有效连接时，所述表达载体可用于表达天然样蛋白质。这些载体可以用于转化昆虫细胞，所述昆虫细胞随后可以进行培养以产生所需蛋白质产物。表达出的天然样蛋白质可以用于需要大量高品质蛋白质的诊断、疫苗或其他应用中。
用于昆虫细胞合成表达载体

[发明专利]去除半抗原噬菌体展示纳米抗体文库中表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体的方法-CN202110492552.9在审
发明人：王保民;何青青;王伟轩;赵亚杰 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2021-05-06 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了去除半抗原噬菌体展示纳米抗体文库中表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体的方法。该方法包括(1)偶联所述载体蛋白的磁珠与所述半抗原噬菌体展示纳米抗体文库进行孵育获得结合所述表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体的磁珠；(2)采用磁性分离去除所述结合所述表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体的磁珠，从而去除半抗原噬菌体展示纳米抗体文库中表达载体蛋白纳米抗体的噬菌体
去除半抗原噬菌体展示纳米抗体文库表达载体蛋白方法

[发明专利]人骨形成蛋白－4成熟肽的大肠杆菌高表达载体和制备方法-CN200410073165.8无效
发明人：陈苏民;秦云;陈南春 -专利权人：中国人民解放军第四军医大学
申请日： 2004-10-11 - 公布日： 2006-03-08 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及人骨形成蛋白－4成熟肽的大肠杆菌表达载体及其所表达的人骨形成蛋白4成熟肽的制备方法。所述的载体是指用分子克隆技术重组获得的大肠杆菌表达载体pDH2－hB4m，载体全长4,014个核苷酸对；所述利用表达载体pDH2－hB4m制备具有生物学活性人骨形成蛋白－4成熟肽的方法，包括宿主菌转化表达本发明所提供的大肠杆菌高表达载体和用该载体转化宿主菌表达人骨形成蛋白－4成熟肽的制备方法，可以作为新的基因工程产品及其方法推向临床治疗、诊断和科学研究应用，并推向市场。
形成蛋白成熟大肠杆菌表达载体制备方法

[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体及表达工程菌和表达方法-CN201610838951.5有效
发明人：肖亚中;常飞;方泽民;房伟 -专利权人：安徽大学
申请日： 2016-09-21 - 公布日： 2019-12-06 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体，按以下方法构建而成：(1)克隆β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA序列；(2)克隆光敏调控单元的DNA序列；(3)将切割得到的β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA酶切片段和光敏调控单元的DNA酶切片段连接至pET22b(+)载体上，即得所述β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体。本发明通过插入光敏调控单元构建得到可光诱导的表达载体，该表达载体可通过光照手段对β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白进行诱导表达，与传统的诱导表达方法相比，光照诱导方法具有表达量高、无外源添加物的特点，此外光照诱导方法对蛋白的表达强度可通过光照强度进行控制
葡萄糖苷酶突变体蛋白表达载体调控单元光敏光照诱导诱导表达切片构建光照克隆添加物表达量传统的段连接光诱导无外源切割蛋白

[发明专利]一种表达载体及胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达方法-CN201610082935.8在审
发明人：王一飞;陈海佳;葛啸虎;任哲;马岩岩 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-02-05 - 公布日： 2016-04-27 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种表达载体及胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达方法。本发明提供了用于IGFBP3蛋白表达的载体、宿主和表达方法及制备方法，以本发明提供方法制备的融合蛋白为mFc类型，经检测，经过24h的培养，仍有70％～80％的细胞内存在表达载体。每100万个细胞能够产生20～30μg的IGFBP3蛋白，所得蛋白的纯度大于90％。
一种表达载体胰岛素生长因子结合蛋白方法

[发明专利]短芽孢杆菌甲醛脱氢酶基因的原核表达载体和应用-CN201110306492.3无效
发明人：年洪娟;陈丽梅;孟庆超;程琴 -专利权人：昆明理工大学
申请日： 2011-10-11 - 公布日： 2012-02-08 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效表达短芽孢杆菌甲醛脱氢酶蛋白的原核表达载体pET32a-faldh，该载体是含有短芽孢杆菌(BreviBacillusbrevis)甲醛脱氢酶基因(faldh)的原核表达载体，本发明从短芽孢杆菌中扩增出faldh基因，亚克隆与原核表达载体pET32a中获得其原核表达载体pET32a-faldh，用T7启动子控制它在大肠杆菌中的表达，表达的重组蛋白质80%以上形成包涵体，从包涵体中很容易纯化高纯度的重组蛋白质
芽孢杆菌甲醛脱氢酶基因表达载体应用

[发明专利]HIV NC蛋白表达载体以及用其生产NC蛋白的方法-CN200780049710.1无效
发明人：柳志昌 -专利权人：柳志昌;艾维克西根有限公司
申请日： 2007-12-20 - 公布日： 2009-11-11 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：本发明涉及HIV NC蛋白表达载体以及用其生产NC蛋白的方法。更具体而言，本发明涉及其中在NC基因下游依次连接有内含子序列和mRNA稳定性元件的HIV NC蛋白表达载体以及用其生产NC蛋白的方法。本发明的HIV NC蛋白表达载体——其中在NC基因下游依次连接有内含子序列和mRNA稳定性元件——可以在动物细胞中表达野生型NC蛋白，且与现有技术相比具有提高表达效率的作用。
hiv nc 蛋白表达载体以及生产方法