本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种重组表达载体、云芝糖蛋白Musarin的制备方法及应用。本发明提供了一种重组表达载体,包括出发载体和编码云芝糖蛋白Musarin的基因;所述云芝糖蛋白Musarin包括如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明以编码所述云芝糖蛋白Musarin的基因和出发载体为原料制备得到的重组表达载体可用于云芝糖蛋白Musarin的体外表达,无需提取步骤,成功富集云芝糖蛋白Musarin,节省了云芝糖蛋白Musarin的制作成本,高效获得云芝糖蛋白Musarin。
本发明提供了一种HLA‑G全长蛋白及其表达载体、表达工程菌和制备方法,所述表达载体的表达区的核苷酸序列包括如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列;所述工程菌包含所述的HLA‑G全长蛋白表达载体。所述HLA‑G全长蛋白由所述的HLA‑G全长蛋白表达工程菌经诱导表达和纯化制备得到。本发明采用优化的大肠杆菌表达系统,体外表达人HLA‑G全长蛋白,实现了人HLA‑G全长蛋白的高产量、高纯度表达;本发明提供人HLA‑G全长蛋白,包含跨膜区,且经过ELISA验证具有与天然蛋白相似的结构,该方法可以制备出高产量、高纯度、具有结构活性的人HLA‑G全长蛋白。
本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种生物素化外源重组蛋白用表达载体及制备方法和应用;所述表达载体包括包括VV启动子,VV启动子用于替换表达载体的Tac启动子,VV启动子是通过改造AV3启动子所得的改造启动子,VV启动子的核苷酸序列包括与如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列同源性>90%的核苷酸序列;通过改造表达载体的AV3启动子得到VV启动子,并通过VV启动子替换表达载体上原始的Tac启动子,可以通过嵌合作用,提高表达蛋白的表达效率,因此可以通过改造启动子序列,改善表达载体在表达外源蛋白时的表达效率,从而提高表达载体在表达生物素化外源重组蛋白的表达率。