本发明涉及一种利用大肠杆菌生产胞外阿魏酸酯酶的方法。该方法包括如下步骤：(1)制备含有阿魏酸酯酶基因的重组大肠杆菌，所述的阿魏酸酯酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；(2)将步骤(1)制得的重组大肠杆菌经IPTG或乳糖诱导发酵，经去除菌体，纯化，制得阿魏酸酯酶。本发明首次通过采用限制性内切酶Nde I酶切阿魏酸酯酶基因后，核糖体结合位点后的首个酶切位点变为Nde I酶切位点，从而获得的阿魏酸酯酶具有天然的N端序列；该特殊结构使得阿魏酸酯酶能够在大肠杆菌合成后分泌至胞外，从而极大简化了阿魏酸酯酶的纯化和利用，对后续阿魏酸的工业化生产具有显著的促进作用。
本发明属于基因工程技术领域，具体涉及双向伯克霍尔德氏菌来源酯合成酶JG536_25355、编码基因及应用。该酯合成酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过克隆并诱导表达获得双向伯克霍尔德氏菌BJQ0010来源酯合成酶JG536_25355及其编码基因，并构建含有酯合成酶编码基因的大肠杆菌表达质粒，将该质粒转入大肠杆菌中，经过诱导表达获得该酶。本发明的酯合成酶经催化体系验证不仅具有在水相体系能催化合成己酸乙酯、辛酸乙酯的能力，还能催化合成丁酸乙酯、戊酸乙酯和癸酸乙酯，因此能用于白酒酿造领域中催化合成重要的风味酯。
本发明公开了一种酯酶蛋白，其中，该酯酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。另一方面，本发明还提供了一种编码酯酶蛋白的基因，其中，该基因的核苷酸序列为能够编码SEQ ID No：2所示的氨基酸序列的核苷酸序列。另外，本发明还提供了如上所述的酯酶蛋白及其编码基因的应用。由实施例可以看出，本发明的提供的酯酶蛋白具有较高的酯酶活性，能够有效地降解硝基苯酚酯。
