本发明公开了一种磷酸化抗原多肽、抗体及其制备方法,涉及抗体制备技术领域。本发明包括针对人ERK蛋白202位苏氨酸和204位酪氨酸的磷酸化抗体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,其中Thr和Tyr突变为Asp;针对YAP1蛋白127位丝氨酸的磷酸化抗体,其氨基酸序列如本发明通过将磷酸化的氨基酸突变为天冬氨酸,将突变抗原的DNA构建到pGEX‑6p表达载体上,使用大肠杆菌表达GST融合抗原,纯化后的抗原与弗氏佐剂混合后可直接免疫动物,此方法简单、抗原稳定性好,溶解性高且成本低
所述的靶点为Fas相关死亡结构域FADD蛋白,所述的FADD蛋白的序列为SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明的通过模拟FADD非磷酸化的基因对应的蛋白的表达来实现,所述的基因的序列为SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。通过模拟FADD非磷酸化的基因对应的蛋白是指将野生型人FADD蛋白的第194位丝氨酸突变为丙氨酸、或将小鼠FADD蛋白的第191位丝氨酸突变为丙氨酸之后获得的蛋白。本发明模拟非磷酸化FADD(S191A)小鼠表现出更严重的肠道炎症。
本发明公开了一种水稻尿苷二磷酸乙酰葡糖胺焦磷酸化酶及其应用,所述水稻尿苷二磷酸乙酰葡糖胺焦磷酸化酶基因的编码区序列SEQ ID NO:3,序列长1482bp,编码493个氨基酸,相对分子量为54.45kD,等电点为6.24,具有UDPGP保守结构域,N‑端不含跨膜结构和信号肽;所述水稻尿苷二磷酸乙酰葡糖胺焦磷酸化酶基因的蛋白序列:SEQ ID NO:4。本发明为明确植物UGPases蛋白家族的生物学功能以及深入解析糖代谢在高等植物生长发育中的重要性提供依据,因此,OsUAP2蛋白质及其编码基因具有较高的实际应用价值。