本发明公开了一种重组菌株,该重组菌株为含有编码碱性β-甘露聚糖酶的基因的重组大肠杆菌,且所述基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还公开了一种制备碱性β-甘露聚糖酶的方法,该方法包括将本发明的重组菌株接种至液体发酵培养基中进行发酵,获得含有碱性β-甘露聚糖酶的发酵液。通过上述技术方案,本发明的重组菌株能够高水平地表达碱性β-甘露聚糖酶,所需发酵的时间较短。采用本发明的方法制备碱性β-甘露聚糖酶,最终得到的发酵液中的酶含量可达6000U/ml。
本发明属于基因工程技术领域,涉及一种高产的耐高温宽pH稳定性的甘露聚糖酶ManGold及基因与应用。所述甘露聚糖酶ManGold的氨基酸序列含有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。所述甘露聚糖酶基因mangold的碱基序列与SEQ ID NO:3所示的碱基序列具有95%以上的同一性。本发明显著提高了人工合成的甘露聚糖酶基因mangold在毕赤酵母细胞中的表达量,获得了高水平表达的、耐高温、宽pH适应性的甘露聚糖酶及基因。
本申请公开了β‑甘露聚糖酶、制备方法及应用。该β‑甘露聚糖酶为氨基酸序列如SED ID NO.1所示的蛋白质或与SEQ ID NO.1氨基酸序列所示蛋白质具有90%以上同源性且具有相同酶活性的蛋白质。该β‑甘露聚糖酶具有较好的稳定性,在30~70℃和pH为3.0~11.0范围内保温60min仍保持最大酶活力的80%。本申请公开了一种制备所述β‑甘露聚糖的方法,通过所述方法制备的β‑甘露聚糖酶具备耐热性好,比活性高、催化pH值范围广等优点。所述β‑甘露聚糖酶应用于多糖水解以及制备饲料添加剂,具有巨大的经济价值。