‑3‑羟基丁酸乙酯的酮还原酶突变体,属于生物技术领域,其源于Meyerozyma guilliermondii的野生型酮还原酶,能将4‑氯乙酰乙酸乙酯转化生成(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯,与野生型序列相比具有更高的醇脱氢酶活性,该酮还原酶突变体的序列为SEQ ID NO.2,该酮还原酶突变体的酶活性比野生型酮还原酶的活性至少增强2‑10倍。本发明酮还原酶突变体和编码这种突变体的多核苷酸可以使用本领域技术人员通常使用的方法制备。突变体可以通过使编码该酶的体外重组、多核苷酸诱变、DNA改组、易错PCR和定向进化方法等获得。
染色体长臂物理位点662,307,854~662,550,261bp区段内;该分子标记与抗条锈病基因QYrsv.swust‑1BL紧密连锁,为A012893和A012894;分子标记A012893的引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.36~SEQ ID NO.38所示;分子标记A012894的引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.39~SEQ ID NO.41所示。
本发明所述方法利用CRISPR/Cas9系统抑制水稻香味基因Badh2和白叶枯病感病基因SWEET14的表达;所述CRISPR/Cas9系统中,所述水稻香味基因Badh2的引导RNA靶位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述白叶枯病感病基因SWEET14的引导RNA靶位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。