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[发明专利]外源性人端粒酶反转录酶基因重组慢病毒颗粒的获得方法-CN201910735113.9在审
发明人：秦晓东;何祥一;曾飒;张志东 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2019-08-09 - 公布日： 2019-11-26 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了外源性人端粒酶反转录酶基因重组慢病毒颗粒的获得方法，具体涉及生物技术领域，包括以下步骤：S1、准备材料和试剂；S2、构建pLVX‑puro‑hTERT重组慢病毒载体；S3、表达hTERT基因重组慢病毒颗粒的获得本发明通过携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下，经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒，慢病毒载体能够将目的基因高效整合于宿主基因组，从而实现外源基因长期、稳定的表达，整个慢病毒颗粒获取操作方便，获取的慢病毒颗粒对于后期的感染细胞，使正常体细胞永生化得到保证，可获得稳定增殖的永生化细胞系，并且侵染效率高，稳定性较好。
重组慢病毒颗粒慢病毒颗粒慢病毒载体外源基因永生化人端粒酶反转录酶基因慢病毒包装质粒重组慢病毒载体生物技术领域宿主基因组正常体细胞病毒包装病毒颗粒感染细胞高效整合目的基因外源性增殖的构建侵染携带保证

[发明专利]复杂曲面零件慢刀伺服磨削加工刀具轨迹规划方法-CN202210461903.4有效
发明人：马建伟;张建洲;李冠霖;秦逢泽;司立坤;贾振元 -专利权人：大连理工大学
申请日： 2022-04-28 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： G05B19/404 文献下载
摘要：本发明复杂曲面零件慢刀伺服磨削加工刀具轨迹规划方法属于多轴数控机床高精加工领域，涉及一种复杂曲面零件慢刀伺服磨削加工刀具轨迹规划方法。通过建立工件坐标系、砂轮坐标系和砂轮‑曲面接触模型，结合复杂曲面上刀触点法向量与砂轮磨削点法向量之间的关联关系，计算工件坐标系中砂轮‑曲面接触点的位置及磨削过程中C轴转角。结合工件坐标系中刀位点坐标、C轴转角和设定的C轴转速生成慢刀伺服磨削加工NC刀具轨迹。该方法可实现高陡度、周向轮廓凹凸起伏、局部曲率急变类复杂曲面慢刀伺服精密磨削加工。
复杂曲面零件伺服磨削加工刀具轨迹规划方法

[发明专利]一种复合推力构型直升机飞/发匹配验证方法-CN202211440021.6在审
发明人：谌昱;杨波;武玉如;杜春雨;帅涛;李浩敏;张宇沛 -专利权人：中国直升机设计研究所
申请日： 2022-11-17 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： G01M99/00 文献下载
摘要：本申请提供一种复合推力构型直升机飞/发匹配验证方法，方法包括：步骤1：直升机在地面系留状态，进行旋翼‑传动‑发动机链路总距标定；步骤2：直升机在地面系留状态，起动发动机至飞慢，操作直升机总距，进行旋翼‑传动‑发动机链路斜坡扫描；步骤3：直升机在地面系留状态，起动发动机至飞慢，操作直升机总距，进行旋翼‑传动‑发动机链路阶梯扫描；步骤4：直升机在地面系留状态，起动发动机至飞慢，在规定的总距值之间往返操纵直升机总距，完成旋翼‑传动‑发动机链路加减速特性检查；步骤5：直升机在地面系留状态，进行推力桨‑传动‑发动机链路推力桨标定。
一种复合推力构型直升机匹配验证方法

[发明专利]永生化人源神经干细胞系、制备方法、重组病毒载体及应用-CN201910653817.1有效
发明人：陈陆馗;张桂龙 -专利权人：东南大学
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2021-05-11 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了永生化人源神经干细胞系、制备方法、重组病毒载体及应用，该方法包括如下步骤：(1)构建含L‑myc基因的重组慢病毒载体pLenti‑EF1a‑EGFP‑P2A‑Puro‑CMV‑MYCL‑3Flag；(2)慢病毒包装生产及上清液收集；(3)采用慢病毒上清液对人源神经干细胞进行转染筛选及构建永生化人源神经干细胞系。本发明永生化细胞系的制备方法是一种新的稳定且安全有效的永生化编码策略；制备的永生化人源神经干细胞系具有原代神经干细胞的所有生物学特征，同时也具有正常的三系分化特性，可以成功分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞，同时该细胞系的生长速度及成神经球的能力较原代细胞强，成功传代25代以后依然可以快速增殖，并且无致瘤性。
永生化人源神经细胞系制备方法重组病毒载体应用

[发明专利]一种髓系特异性启动子及其应用-CN202110761757.2在审
发明人：张隆基;苑号坤;章睿 -专利权人：北京美康基免生物科技有限公司
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及一种髓系特异性启动子及其应用。所述髓系特异性启动子包括SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的核酸序列。所述髓系特异性启动子具备髓系组织特异性，能够在髓系细胞中高效启动基因表达，而在非髓系细胞中调控基因表达的效率则较低，从而能够调控基因在髓系组织特异性表达，将所述髓系特异性启动子和CYBB基因插入慢病毒载体，所构建的慢病毒表达载体具备髓系组织特异性，能够有效恢复gp91‑phox蛋白的表达，恢复活性氧(ROS)生成功能，对于治疗慢性肉芽肿并具有重要意义。
一种特异性启动子及其应用

[发明专利]低表达人PTEN蛋白的LN-229细胞系及其构建方法-CN201811113592.2在审
发明人：朴海龙;王志超;许国旺;路鑫 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2018-09-25 - 公布日： 2020-03-31 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种PTEN低表达的LN‑229细胞系的构建方法。利用慢病毒体系构建PTEN稳定低表达的LN‑229细胞系。转染shPTEN及慢病毒包装质粒到HEK293T细胞中，收集病毒上清，感染LN‑229细胞，通过嘌呤霉素筛选转染后的LN‑229细胞，获得PTEN低表达的LN‑229稳定细胞系，最终经Western Blot技术检测细胞株PTEN的表达量下调80％以上，成功构建PTEN低表达的细胞系，可作为研究PTEN在胶质瘤中的分子作用机制及所参与代谢调控作用的理想细胞系。
表达 pten 蛋白 ln 229 细胞系及其构建方法

[发明专利]一种配套组合生产深浅壳色绿壳蛋鸡的方法-CN201710710355.3有效
发明人：刘嘉;赵小玲;舒刚;朱庆;李富贵;覃飞;苗小猛;钟成麟;秦子越;王彦;尹华东 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2017-08-18 - 公布日： 2020-03-31 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：该育种方法可推广用于其他具有绿壳性状鸡的品种选育；本发明培育出具有“五黑”(乌羽、乌皮、乌冠、乌胫、乌肉)的外貌特征，且总体生产性能良好的、产青壳蛋的蛋鸡杂交组合JL；将LK系作为母本，与JY系杂交，获得雏鸡羽色自别雌雄且总体生产性能优秀的
一种配套组合生产深浅壳色绿壳蛋鸡方法

[发明专利]一种阻燃慢回弹记忆海绵及其制备方法-CN202110846501.1有效
发明人：洪海超;王洋;张少华 -专利权人：高州市铭顺劳保制品有限公司
申请日： 2021-07-26 - 公布日： 2023-01-13 - 主分类号： C08L75/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种阻燃慢回弹记忆海绵及其制备方法，属于慢回弹海绵技术领域。该阻燃慢回弹记忆海绵包括如下重量份原料：聚醚多元醇50‑60份、聚酯多元醇45‑55份，二异氰酸酯100‑130份，锡催化剂0.1‑0.3份、碳酸钙10‑20份、交联剂0.55‑1.65份、分散剂1‑3份、发泡剂2.56‑14.56份、偶联剂0.5‑0.7份、阻燃助剂3.56‑7.56份；该阻燃慢回弹记忆海绵制备步骤包括混合、反应、发泡等步骤；其中添加了一种阻燃助剂，为磷系阻燃和硅系阻燃协同阻燃剂，且带有多个呋喃环结构，将该阻燃助剂应用于制备慢回弹海绵，有效的提升了慢回弹记忆海绵的安全性能与使用范围。
一种阻燃回弹记忆海绵及其制备方法

[发明专利]一种高效生产类克隆鸡的方法-CN202110654978.X在审
发明人：周静;左其生;李碧春 -专利权人：扬州大学
申请日： 2021-06-11 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效生产类克隆鸡的方法，包括以下步骤：（1）、构建OCT4,SOX2,NANOG,LIN28四因子的慢病毒过表达载体并转染黑羽狼山鸡成纤维细胞并进行鉴定；（4）、收集PGC‑like细胞并将其通过鸡胚血管注射的方法注射至孵化2.5天的隐性白羽鸡胚血管中，并通过冰冻切片方法确定PGC‑like能够在受体隐性白羽鸡中的迁移归巢；（5）、将注射黑羽狼山鸡通过微卫星技术证明黑羽后代来源于供体的PGC‑like细胞。通过本发明，可大量生产与供体遗传特征相同的类克隆鸡。
一种高效生产克隆方法

[发明专利]对JEV易感的猪扁桃体细胞系的构建方法-CN201910736306.6在审
发明人：马志永;郗淑敏;刘珂;邵东华;魏建超;李蓓蓓;邱亚峰 -专利权人：中国农业科学院上海兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心上海分中心）
申请日： 2019-08-09 - 公布日： 2019-11-01 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系的构建方法，该方法包含：获得原代猪扁桃体细胞，并进行培养；以pHY‑sv40‑Puro作为慢病毒载体，以psPAX2和pCMV‑VSV‑G作为辅助包装载体，共同转染进入293T细胞中，获得慢病毒颗粒；将慢病毒颗粒感染经培养后的原代猪扁桃体细胞系；经过感染后，将猪扁桃体细胞在含血清的DMEM/F12培养液中添加嘌呤霉素进行细胞筛选，获得阳性细胞；将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养，得到扁桃体上皮细胞传代细胞系。本发明的方法以猪扁桃体细胞作为宿主细胞，通过感染的方法得到JEV易感的猪扁桃体细胞系，该细胞系对JEV敏感，可以用于相关研究。
猪扁桃体细胞慢病毒颗粒阳性细胞嘌呤霉素构建感染培养液传代慢病毒载体辅助包装扩大培养上皮细胞宿主细胞细胞筛选扁桃体血清转染敏感研究

[发明专利]慢病毒载体的稳定生产-CN201180042473.2有效
发明人： C.博沃伦塔;A.斯托尔纳约洛;P.里扎尔迪;F.马维利奥 -专利权人：莫尔梅德股份有限公司
申请日： 2011-09-01 - 公布日： 2013-07-31 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明提供新的稳定包装细胞系和生产用细胞系以及得到它们的方法，以及用这样的细胞系生产慢病毒载体的新方法。用用于慢病毒结构蛋白和调控蛋白的稳定表达的baculo-AAV杂合系统产生本发明的新方法和包装细胞系，所述系统包含含有侧翼为AAVITR的整合盒的杆状病毒骨架，以及编码rep蛋白的质粒。所述系统允许得到仅包含HIV的结构蛋白和调控蛋白gag/pol和rev的第一中间体，用作得到稳定包装细胞系以及生产用细胞系的起点。
病毒载体稳定生产

[发明专利]一种自别雌雄鹅的培育方法-CN201810940208.X有效
发明人：于金成;赵辉;李喆;于宁 -专利权人：辽宁省农业科学院
申请日： 2018-08-11 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：为解决目前鹅产业中肉鹅培育新品系或配套系的羽色自别问题，本发明提供了一种能够自别雌雄鹅的培育方法，包括淡棕色公鹅的筛选，突变群体的扩繁，父本与母本纯系的选育以及配套系的建立。
一种雌雄培育方法

[发明专利]慢病毒载体的半稳定生产-CN201180042482.1有效
发明人： C.博沃伦塔;A.斯托尔纳约洛;P.里扎尔迪;F.马维利奥 -专利权人：莫尔梅德股份有限公司
申请日： 2011-09-01 - 公布日： 2013-05-01 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明提供新的半稳定包装细胞系以及使用所述半稳定包装细胞系而产生慢病毒载体(LV)的方法。用baculo-AAV杂合系统产生本发明的新方法和包装细胞系，用于慢病毒结构蛋白和调控蛋白的稳定表达，所述系统包含含有侧翼为AAVITR的整合盒的杆状病毒骨架，以及编码rep蛋白的质粒。所述系统允许得到包含HIV的结构蛋白和调控蛋白gag/pol和rev的细胞系，用于半稳定LV生产。
病毒载体稳定生产

[发明专利]一种重组慢病毒载体、重组慢病毒及其应用-CN201811476996.8在审
发明人：张守全;陈云;卫恒习;赵志宏;冯美莹;叶超;王凯;李莉;孟立 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2018-12-04 - 公布日： 2019-03-08 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开一种重组慢病毒载体、重组慢病毒及其应用。本发明是在慢病毒载体多克隆位点的上游插入HSA信号肽，下游插入纯化标签6×His序列，得到改装的慢病毒载体，然后将6′His‑OPN片段插入到改装的慢病毒载体的XbaI和BamHI酶切位点之间得到重组慢病毒载体本发明通过稳转CHO细胞系，纯化后得到OPN重组蛋白，表达时间和水平可以人为的控制，纯化便捷，结构更接近于天然蛋白，本身更加有活性，功能更全面。该蛋白加入到猪体外受精培养系中，可大大提高受精率，改善胚胎的发育。可进一步应用到猪精液中，提高种猪的繁殖率。此蛋白的出现会给猪场带来更好的发展前景，将养猪业推向新的发展阶段。
重组慢病毒载体慢病毒载体重组慢病毒改装蛋白繁殖率应用多克隆位点养猪业纯化标签片段插入天然蛋白重组蛋白受精率信号肽猪精液受精种猪猪体胚胎发展阶段发育上游

[发明专利]一种机场净空保护区低慢小航空器风险评估方法及系统-CN202111566160.9在审
发明人：曹铁;周科杰;房天谋;张平;甄军平;邵黎明;代稳;涂欢;张轩 -专利权人：民航成都电子技术有限责任公司
申请日： 2021-12-20 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： G06Q10/06 文献下载
摘要：本发明一种机场净空保护区低慢小航空器风险评估方法及系统，属于机场净空保护区风险评估技术领域，包括：获取解析得出机场净空保护区数据集合、飞机数据集合、低慢小航空器数据集合与外部环境数据集合；建立静态综合风险评估坐标系；根据低慢小航空器数据集合，与静态综合风险评估坐标系做出对比，得出静态综合风险；在静态综合风险结果的基础上，得出多个动态风险修正结果，进一步得出低慢小航空器最终风险评估结果；根据低慢小航空器数据集合与机场净空保护区数据集合本发明实现了对低慢小航空器风险进行持续评估和风险升降级预警的功能，对机场净空保护区风险评估与管理具有重要意义。
一种机场净空保护区低慢小航空器风险评估方法系统

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