本发明公开了一种与安义瓦灰鸡灰色羽性状相关的分子标记及其应用,属于基因工程技术领域,所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示,在第255位出现A/T碱基颠换。本发明通过分子标记选择的方法,发现与安义瓦灰鸡灰色羽性状相关的分子标记,由此选择AA基因型和TT基因型为亲本,两系杂交可以解决羽色分离的问题,彻底解决目前后代出现分离的情况;本发明还以目的位点为AA基因型安义瓦灰鸡与其他目的位点为TT成熟品系杂交,保证后代全部为AT基因型,表型则全部为灰色羽,本发明通过与其他优良性状鸡种杂交培育出外观符合瓦灰鸡外貌特征且性状优良的苗鸡,具有广泛且实际的应用价值。
本发明提供了一种重组单纯疱疹病毒的亲和筛选细胞系及其构建方法,包括:构建表达HER2的跨膜区及胞外区HER2CT9基因的慢病毒Ls18;使用慢病毒表达载体pLs18包装所述慢病毒Ls18后感染小鼠黑色素瘤细胞系B16,获得所述亲和筛选细胞系B16‑HER2CT9;所述慢病毒表达载体pLs18如序列表中SEQ ID NO.10所示,所述HER2CT9基因如序列表中SEQ ID NO.7所示。基于如上所述的亲和筛选细胞系B16‑HER2CT9的应用,本发明还提供了一种单纯疱疹病毒的重组改造方法,通过亲和筛选细胞系B16‑HER2CT9选择性地从同源重组后的病毒细胞中筛选出重组单纯疱疹病毒,其工艺更加高效且获得纯度更高的重组单纯疱疹病毒