本发明提供了一种适用于谷氨酸棒杆菌的重组表达载体，该表达载体适用于在谷氨酸棒杆菌中表达外源蛋白并具有较高的表达水平。一种适用于谷氨酸棒杆菌的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体中外源蛋白基因的启动子为∆cspB启动子、信号肽为∆cspB信号肽，所述∆cspB启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，∆cspB本发明中的外源蛋白在表达过程中，在信号肽的引导下，表达的外源蛋白能分泌到胞外，不需要经过菌体破碎，分泌出的外源蛋白相对于胞内表达易于纯化；且无胞外蛋白酶，分泌出的外源蛋白在培养基中较为稳定。此外，本发明还提供了外源蛋白的外源蛋白表达系统、应用和外源蛋白的制备方法。
本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种外源表达蛋白的信号标志物、外源表达蛋白及其制备方法；所述信号标志物包括如SEQ ID NO.1所示的kozak序列、如SEQ ID NO.2所示的信号肽和如SEQ IDNO.3所示的无序序列；所述外源表达蛋白包括DDR1蛋白片段、MAGEA4蛋白片段和ACP3蛋白片段，DDR1蛋白、MAGEA4蛋白和ACP3蛋白的N端分别连接信号标志物；利用kozak序列增加外源表达蛋白在翻译阶段的表达效率的这一特性，再利用信号肽增加外源表达蛋白在分泌过程中跟细胞膜识别定位的准确性的这一特性，最后通过无序序列加快分泌蛋白跟细胞膜的结合速度，因此通过该信号标志物，可以综合提高外源表达蛋白的表达量和表达纯度。
