本发明提供一种抗壬基酚聚氧乙烯醚的单克隆抗体、试剂盒及应用,抗壬基酚聚氧乙烯醚的单克隆抗体,包括轻链和重链,轻链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3;重链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3;轻链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,轻链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,轻链CDR3的氨基酸残基为LKI;重链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,重链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示,重链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。该单克隆抗体与壬基酚聚氧乙烯醚结合力强,灵敏度好;该试剂盒的检测限更低。