本发明公开了一种靶向幽门螺杆菌UreB的鲨鱼单域抗体及其制备方法和应用。所述鲨鱼单域抗体为氨基酸序列如SEQ ID No.1的1E3和氨基酸序列如SEQ ID No.2的1G7。本发明还提供了鲨鱼单域抗体的制备方法,即通过提取免疫后的条纹斑竹鲨细胞和组织的总RNA,反转录为cDNA;以cDNA为模板,扩增VNAR片段,与载体连接构建噬菌体文库;从噬菌体展示文库中淘选识别UreB的阳性克隆;构建重组表达载体,诱导表达单域抗体,最终获得靶向UreB的鲨鱼单域抗体。本发明所述的靶向UreB的单域抗体能有效与UreB抗原和幽门螺杆菌结合,为开发幽门螺杆感染的治疗药物和诊断试剂奠定基础。
本发明公开了介导结合免疫球蛋白的单域抗体、由其构建的双功能抗体及其应用。本发明从构建的单域抗体基因库中筛选得到能介导结合免疫球蛋白的单域抗体,其氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述单域抗体能特异性结合人IgG、IgA以及鼠IgG,亲和力强本发明还公开了由该单域抗体和治疗性抗体或多肽融合在一起得到双功能抗体。动物试验证明,本发明单域抗体具有延长功能抗体或治疗性抗体在动物体内半衰期时间,有效提高治疗功能抗体或治疗性抗体的生物利用度以及显著增强治疗性抗体生物靶向性治疗等效果。