本发明公开了一种邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用,该突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与本发明的突变型邻苯二酚双加氧酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型邻苯二酚双加氧酶相比,其单点突变体和组合突变体在40℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的3倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果
本发明公开了一种邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用,该突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与本发明的突变型邻苯二酚双加氧酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型邻苯二酚双加氧酶相比,其单点突变体和组合突变体在40℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的3倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果
本发明公开了一种乙酰化调控的乳酸脱氢酶突变体及其在提高乳酸的合成中的应用,该突变体是乳酸脱氢酶LdhA蛋白的第9位赖氨酸突变为精氨酸形成的,命名为K9R突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种乙酰化调控的乳酸脱氢酶双突变体及其在抑制乳酸的合成中的应用,该突变体是乳酸脱氢酶LdhA蛋白的第154位和248位的赖氨酸突变为谷氨酰胺形成的,命名为K154Q‑K248Q双突变体,其氨基酸序列如实验证实K9R突变体使得LdhA的酶活提高了2.5倍,过表达K9R突变体的菌株乳酸产量比过表达野生型LdhA提高1.67倍;K154Q‑248Q双突变体的活性降低至野生型的12.6%,基因组上ldhA基因原位突变为K154Q‑K248Q的双突变菌株在抑制乳酸合成方面可以实现与目前常用的ldhA基因敲除法类似的效果。
本发明公开了一种热稳定性提高的醇脱氢酶突变体,属于酶工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体为以SEQ ID NO.1所示野生型醇脱氢酶为基础进行了如下突变后的突变体中的一种:第100位的T突变为R或K的单突变体T100R、T100K;第148位的S突变为I、V或L的单突变体S148I、S148V、S148L;第100位的T突变为R且第148位的S突变为I、V或L的双突变体;第100位的T突变为K且第148位的S突变为I、V或L的双突变体。这些突变体的热稳定性相对于野生型有了更进一步的提升,更加适合工业化的生产需求,具有更加广阔的应用前景。
本发明公开了一种双环吉玛烯合成酶突变体和基因序列以及应用。所述双环吉玛烯合酶突变体包括以SEQ ID NO.1所示野生型的双环吉玛烯合成酶核苷酸序列为模板,第290位异亮氨酸突变为缬氨酸形成的突变体I290V;第316位异亮氨酸突变为亮氨酸形成的突变体I316L;第454位亮氨酸突变为半胱氨酸形成的突变体L454C;第290位异亮氨酸突变为缬氨酸,第316位异亮氨酸突变为亮氨酸,以及第454位亮氨酸突变为半胱氨酸形成的组合突变体I290V/I316L/L454C本发明通过酶工程手段改造双环吉玛烯合成酶以提高双环吉玛烯的产量,为萜烯合酶类的改造提供了参考,具有重要的生产意义和实际的应用价值。
本申请提供一种双门孔道蛋白、孔道蛋白突变体、核苷酸序列及其应用,属于纳米孔单分子检测技术领域。双门孔道蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。孔道蛋白突变体,孔道蛋白突变体的氨基酸序列为:SEQ IDNO.2所示序列、第一突变体序列或第二突变体序列。第一突变体序列和第二突变体序列分别为与SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2同源性大于等于75%的序列。本申请的双门孔道蛋白和孔道蛋白突变体有利于提高待测物质的检测准确性、孔道蛋白的集成组装效果,也有利于有效对连续同一碱基序列进行检测,具有较佳的结构稳定性和电生理稳定性,也有利于促进跨孔道蛋白的待测物质待测物的有效捕获和
本发明公开了一种ω‑转氨酶双突变体及其应用,该ω‑转氨酶双突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明ω‑转氨酶双突变体由野生型的土曲霉(Aspergillus terreus)ω‑转氨酶第115位的苯丙氨酸突变成亮氨酸,第118位的亮氨酸突变成苏氨酸而获得;该ω‑转氨酶双突变体的半失活温度比野生型提高了