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[发明专利]一种菊苣原生质体诱导纯合四倍体植物的方法-CN201510530685.5有效
发明人：张秀海;陈绪清;杜运鹏;王璐;邢礼军;李宏潮 -专利权人：北京农业生物技术研究中心
申请日： 2015-08-26 - 公布日： 2017-07-04 - 主分类号： A01H1/08 文献下载
摘要：本发明属于植物原生质体培养领域，具体涉及一种菊苣原生质体诱导纯合四倍体植物的方法，该方法采用秋水仙素对菊苣原生质体进行诱导。该方法将二倍体菊苣培养材料进行酶解、纯化、诱导、细胞团和小愈伤组织培养、愈伤组织繁殖和胚状体诱导、分化，得到再生芽。本发明利用秋水仙素对菊苣原生质体进行诱导处理，且每个步骤、各个参数之间协同作用，四倍体植株再生率较高；远高于采用原生质体融合方法诱导。
一种原生质体诱导四倍体植物方法

[发明专利]一种花生原生质体提取方法及其应用-CN202010040710.2有效
发明人：陈容钦;李晓云;李玲;胡博 -专利权人：华南师范大学
申请日： 2020-01-15 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种花生原生质体提取方法及其应用，可以使提取到的花生原生质体的完整度比例有效提高，且外源基因在所提取的原生质体中转化效率达到20％。利用本发明方法可以观察外源基因在花生原生质体中的亚细胞定位，弥补研究缺陷；同时也可以利用得到的含外源基因的花生原生质体去进行组织培养，为得到非嵌合体的转基因提供方法。
一种花生原生质体提取方法及其应用

[发明专利]生产除草剂-抗性甜菜植物的方法-CN201380065688.5有效
发明人：居伊·魏恩斯;马克·勒菲弗;吕迪格·海因;格哈德·约翰 -专利权人：西斯凡德尔哈维公众公司
申请日： 2013-12-13 - 公布日： 2018-08-10 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：一种生产除草剂‑抗性甜菜植物的方法，包括以下步骤：‑从分离自甜菜植物的气孔保卫细胞中获得原生质体；‑向该细胞施加组合物，该组合物含有以下浓度的ALS除草剂，该浓度对于所述细胞是致死的；以及‑从存活细胞再生甜菜植物
生产除草剂抗性甜菜植物方法

[发明专利]雨生红球藻原生质体制备与再生技术-CN200410007535.8无效
发明人：王明兹;施巧琴;庄惠如 -专利权人：福建师范大学
申请日： 2004-02-25 - 公布日： 2005-01-05 - 主分类号： C12N1/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种微藻，特别是雨生红球藻原生质体制备和再生的技术。该技术通过用酸性缓冲液、EDTA和二硫苏糖醇配制而成的预处理剂，25～34℃恒温处理微藻细胞30～60min；用NaCl，KCl，MgSO₄，CaCl₂，纤维素酶，蜗牛酶，果胶酶和酸性缓冲液组成的复合高渗酶溶液去除细胞壁制成微藻原生质体；用BBM培养液、葡萄糖和蔗糖组成的保存液保存原生质体，稀释后分离到含有0.1mol/L葡萄糖、0.1mol/L蔗糖、0.1～0.5ppm本发明操作简便，设备要求低，原生质体制备率超过80％，制备的原生质体透明、活力高，具有鲜艳的颜色，形态较圆，再生周期可缩短三分之一，再生率提高70％，可供于原生质体融合和基因转化等操作。
雨生红球藻原生质体制备再生技术

[发明专利]一种制备水稻根原生质体的组合物和方法-CN201910986194.X有效
发明人：谷晓峰;刘青 -专利权人：中国农业科学院生物技术研究所
申请日： 2019-10-16 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备水稻根原生质体的组合物和方法。本发明首先公开了一种制备水稻根原生质体的组合物，所述组合物包括纤维素酶、半纤维素酶、离析酶和果胶酶。本发明进一步公开了用于制备水稻根原生质体的酶解液和方法。通过本发明水稻根原生质体的体系和方法，600个(约0.15g)水稻幼苗种子根根尖分生区可以制备出约30000个原生质体，利用台盼蓝染色镜检，活力达到90％以上，为后续进行单细胞测序及原生质体转化等实验提供了充足材料
一种制备水稻原生质体组合方法

[发明专利]可选择标志物基因在甜菜原生质体转化方法和系统中的用途-CN201580031418.1在审
发明人：盖伊·魏恩斯;马克·勒菲弗;夏夫高达·塔姆曼纳高达;米里耶勒·隆梅尔 -专利权人：西斯凡德尔哈维公众公司
申请日： 2015-06-12 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： C12N15/60 文献下载
摘要：本发明涉及用于甜菜原生质体转化的方法，包括以下步骤：‑从分离自甜菜植物的气孔保卫细胞获得原生质体，‑用包含感兴趣的核苷酸序列和选择标志物序列的核酸构建体转化所述原生质体，‑以对所述原生质体体外培养致死的浓度向所述原生质体的体外培养应用一种或多种ALS抑制剂，和‑从整合了包含感兴趣的序列和选择标志物序列的核酸构建体的存活的原生质体再生甜菜植物，其中所述选择标志物序列是在其序列中携带在氨基酸113位从丙氨酸至酪氨酸的突变的突变BvALS113序列
可选择标志基因甜菜原生质体转化方法系统中的用途

[发明专利]一种多功能智慧高原生态细胞屋-CN201710269499.X有效
发明人：严李强;杨玉;周华;张晓迪;田荣燕 -专利权人：西藏大学
申请日： 2017-04-24 - 公布日： 2020-08-18 - 主分类号： E04H1/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种多功能智慧高原生态细胞屋，属于智能控制、生态屋和绿色能源等技术领域。用透明导电薄膜材料作为生态屋的细胞膜，泡泡屋或者民居作为生态屋的细胞核。应用智能控制技术使细胞屋能够时刻维持细胞屋“内环境”稳定。同时利用主动太阳能利用技术、被动太阳能利用技术、动能发电技术和温差发电等创新技术给细胞屋提供能源。“生态细胞屋”主要用于以高原为主的气候恶劣地区，以高原农牧区普遍存在的帐篷为基础，提高细胞屋的智能化，实现细胞屋的零能耗，从而提供一个多功能的高原生态细胞屋内环境生命维持系统。
一种多功能智慧高原生态细胞

[发明专利]一种拟南芥叶片样本组织解离液及解离方法-CN202211257502.3在审
发明人：王翠亭;张倩;张志明;肖云平 -专利权人：上海欧易生物医学科技有限公司
申请日： 2022-10-14 - 公布日： 2023-01-10 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明使用自主研发的酶解方案提升了拟南芥叶片的原生质体得率，通过组织表面清洗、样本剪碎、酶解消化、筛网过滤、去杂洗涤、细胞重悬，使得原生质体的质量较好(活性高，数量多，杂质少)。本发明在原生质体得率上与减少叶绿体的占比上有了明显的提高。
一种拟南芥叶片样本组织解离方法

[发明专利]一种慈姑原生质体的制备方法-CN201410591784.X有效
发明人：徐小勇;钱荣;陈学好;李良俊;程立宝;徐强;高红胜;齐晓花 -专利权人：扬州大学
申请日： 2014-10-27 - 公布日： 2017-12-29 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种慈姑原生质体的制备方法。本发明将慈姑经过慈姑茎尖培养、试管苗水培预处理、原生质体的酶解、原生质体的纯化、原生质体的悬浮得到慈姑原生质体。本发明利用了茎尖组织培养技术获得了无菌的慈姑壮苗，为原生质体的分离提供了最佳的外植体，其次采用酶解法分离出高质量的慈姑原生质体，且其产量在2×106个/克以上，活力超过80％，绝大多数为球形的，其细胞膜完整且富含叶绿体
一种慈姑原生质体制备方法

[发明专利]新化合物(免疫刺激肽-细胞内感染)-CN201880016682.1在审
发明人：欧拉·温克韦斯特;艾玛·林德;罗伯特·瓦伦;马特·格雷戈里;史蒂文·莫斯 -专利权人：免疫系统调节控股有限公司
申请日： 2018-01-19 - 公布日： 2019-11-08 - 主分类号： C07K7/23 文献下载
摘要：本发明提供了当施用于动物或人类患者或细胞时能够激活GnRH受体的免疫刺激肽(immunorhelins)。这些免疫刺激肽可用于治疗细胞内细菌、真菌和原生动物感染。
免疫刺激肽原生动物感染细胞内细菌细胞真菌可用激活感染治疗

[发明专利]利用原生质体转化构建黑根霉CPR基因工程菌的方法-CN201310316876.2有效
发明人：陈小龙;顾光志;朱廷恒;嘉晓勤;范永仙;沈寅初 -专利权人：浙江工业大学;台州仙琚药业有限公司
申请日： 2013-07-24 - 公布日： 2014-04-02 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用原生质体转化技术对黑根霉（Rhizopus nigericans）进行外源基因的遗传转化方法：利用真菌细胞壁降解酶对黑根霉（Rhizopus nigericans）的细胞壁进行处理，得到原生质体并进行纯化，以潮霉素B作为选择标记，首次将来自米根霉NADPH-细胞色素P450还原酶CYPOR（缩写：CPR基因）基因采用原生质体转化方法导入黑根霉中，获得工程菌。
利用原生质体转化构建黑根霉 cpr 基因工程方法

[发明专利]一种在原生质体细胞中高效表达目标基因的方法-CN202110202976.7有效
发明人：王宪璞;张芮;刘秀霞;张彬彬;辛丽;王立双;陈学森;吴树敬 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2021-02-23 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种在原生质体细胞中高效表达目标基因的方法。通过实验证明：该DNA分子可高效与稳定的驱动目标基因在苹果原生质体细胞中进行表达，突破了在苹果原生质体细胞中应用CaMV 35S启动子部分基因不表达，部分基因表达较弱的技术局限。
一种原生质体细胞高效表达目标基因方法

[发明专利]一种鲁氏接合酵母的细胞膜提取方法-CN202010642587.1在审
发明人：王虎玄;彭中花 -专利权人：陕西科技大学
申请日： 2020-07-06 - 公布日： 2020-09-22 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明属于细胞工程技术领域，公开了一种鲁氏接合酵母的细胞膜提取方法，包括以下步骤：1)鲁氏接合酵母单菌落培养液中培养后再次转入培养液中培养，离心获得细胞；2)细胞预处理后，采用酶解液进行细胞壁降解，离心获得原生质体；3)将原生质体置于一定浓度NaCl溶液中进行低渗裂解，离心获得粗膜提取物；4)将制备好的粗膜提取物置于PEG3350/Dextran T500两相系统中，多次混合和离心后收集上相，沉淀、离心、冻干后获得鲁氏接合酵母细胞膜本发明可得到纯度较高(平均纯度70％以上)的鲁氏接合酵母细胞膜，操作简捷，绿色环保，适于科研和生产应用。
一种接合酵母细胞膜提取方法

[发明专利]胶原生物织物以及其制备和使用方法-CN03812096.8无效
发明人： R·J·哈里里;A·M·卡普鲁诺维斯基;P·A·墨菲 -专利权人：人类起源公司
申请日： 2003-03-26 - 公布日： 2006-06-21 - 主分类号： A01N27/00 文献下载
摘要：本发明涉及从羊膜制得的胶原膜，此处称为胶原生物织物。本发明的胶原生物织物具有天然的未处理的羊膜的结构完整性，即天然的三级和四级结构。本发明提供了通过对羊膜进行去细胞化而从胎盘膜制备胶原生物织物的方法，优选地从具有绒毛膜和羊膜的人胎盘膜制备。在一个优选的实施方案中，羊膜完全地进行去细胞化。本发明的胶原生物织物在内科和外科领域有着许多的应用，包括例如血管修复、血管的构建和替换、腱和韧带的替换、创伤敷裹、外科移植物、眼科用途、缝合等等。
胶原生物织物及其制备使用方法

[发明专利]超高生物量原生质超分子体系多样性多源神曲中药制剂-CN200810051047.5无效
发明人：迟作舟 -专利权人：迟作舟
申请日： 2008-08-04 - 公布日： 2010-02-10 - 主分类号： A61K36/9068 文献下载
摘要：本发明涉及万病皆瘀，其特征：涵盖多元化因素：物理、化学、精神、环境、遗传、骨髓退化、生长激素hGH衰退、核酸基因、生物活性受损、细胞分裂极限、脑垂体甲状腺枯竭、血液衰老、血红细胞受损、衰老源于成体干细胞DNA损伤，内环境免疫功能减退、生理、病理整体动态调节平衡失调、原生质生理受限，细胞分裂分化平衡失调，超分子体系受限，导致万病皆瘀。原生质有序结构表现生命特征，既治乙病又治未病，防治结合。
超高生物量原生质分子体系多样性神曲中药制剂