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[发明专利]一种筛选公共引物的方法-CN201410556794.X有效
发明人：孙万平;段欠欠;王萃;胡颖熹;沈苏南;朱雪明 -专利权人：苏州大学
申请日： 2014-10-20 - 公布日： 2015-01-21 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种筛选公共引物的方法，具体为选择待扩增靶序列作为模板，设计一对特异引物与m条正向公共引物、n条反向公共引物，在特异引物的5'端分别连接公共引物、酶切位点和保护碱基组合成“长引物”，然后用“长引物”对模板进行PCR扩增，得到与公共引物序列同源的PCR产物，将这段模板序列导入质粒载体，通过转化将质粒转移进入大肠杆菌感受态细胞，获得公共引物的质粒模板；利用此质粒模板，通过排列组合可实现m×n对公共引物的敏感性筛选因此，本发明可以达到高效筛选公共引物的目的，具有高效、快速和操作简单的优点。
一种筛选公共引物方法

[发明专利]一种用于多靶序列PCR检测的公共引物及其对多靶核酸序列进行PCR扩增的方法-CN03136107.2无效
发明人：王宇;冯玉荣 -专利权人：王宇;冯玉荣
申请日： 2003-05-14 - 公布日： 2004-11-24 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：涉及一种采用公共引物进行多种靶核酸的PCR扩增技术，主要用于在核酸水平上对多靶核酸的检测。用于多靶序列PCR检测的公共引物为一对寡核苷酸片断，公共引物的碱基序列及其数目不限，包括荧光标记型和非标记型两种。利用公共引物进行多靶序列PCR检测的方法为：设计公共引物、特异引物、实时荧光PCR检测。公共引物设计简单，引物序列设计不依赖靶序列，可以根据需要设计出能达到最少引物二聚体的引物。成本低，可以做到制备一对公共引物能对多个靶序列进行PCR检测。能与常用的荧光PCR检测技术兼容，可在同一反应体系中实现多种检测技术并用，增加检测准确度。
一种用于序列 pcr 检测公共引物及其核酸进行扩增方法

[发明专利]一种多重PCR扩增方法及试剂盒-CN201110298119.8有效
发明人：孙万平;王伟大;姚利;陈燕;李凯;陈子兴 -专利权人：苏州大学
申请日： 2011-09-29 - 公布日： 2012-02-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种多重PCR扩增方法以及用于多重PCR扩增的试剂盒；所述多重PCR扩增方法包括了设计公共引物以及带有公共引物的多重引物的步骤，所述公共引物设计应遵循两条原则：（1）任何优化的扩增条件下，公共引物与待测模板进行扩增时无特异性产物；（2）当带有公共引物的多重引物扩增得到特异性产物时，公共引物对具有扩增所述特异性产物的能力；然后配置多重PCR体系进行扩增。本发明由于公共引物的引入，使反应体系内的序列特异性引物对浓度下降4个以上对数级别，如此低浓度的多重引物在同一个反应体系中出现相互作用的几率将大大降低，不仅可解决不同引物对相互干扰这一多重PCR中的技术瓶颈，亦为加入新的引物对、增加检测基因数量创造前提条件。
一种多重 pcr 扩增方法试剂盒

[发明专利]快速检测MSI的检测引物及其试剂盒-CN202111448969.1有效
发明人：洪专;潘文健 -专利权人：普瑞斯新（上海）生物医疗科技有限公司
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速检测MSI的检测引物，包括分别检测30个微卫星位点的正向捕获引物和反向捕获引物；所述正向捕获引物由5’端的测序文库read1的公共序列和3’端的特异性正向引物序列组成，所述反向捕获引物由5’端的测序文库read2的公共序列、8个碱基的随机序列和3’端的特异性反向引物序列组成。本发明的快速检测MSI的检测引物及其试剂盒快速，高灵敏，减少误差，降低干扰。
快速检测 msi 引物及其试剂盒

[发明专利]用游离DNA检测肺癌基因的检测引物及其试剂盒-CN202111448972.3有效
发明人：洪专 -专利权人：普瑞斯新（上海）生物医疗科技有限公司
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明涉及一种用游离DNA检测肺癌基因的检测引物及其试剂盒，包括分别检测EGFR、ALK、ERBB2、BRAF、MET、PIK3CA、KRAS和RET基因突变的正向捕获引物和反向捕获引物；所述正向捕获引物由5’端的测序文库read1的公共序列和3’端的特异性正向引物序列组成，所述反向捕获引物由5’端的测序文库read2的公共序列、8个碱基的随机序列和3’端的特异性反向引物序列组成。本发明的用游离DNA检测肺癌基因的检测引物及其试剂盒快速，高灵敏，检测突变频率的检测下线低。
游离 dna 检测肺癌基因引物及其试剂盒

[发明专利]多色荧光复合扩增的引物设计方法-CN200310104034.7无效
发明人：侯一平;吴谨;颜静;李英碧;应斌武;石美森 -专利权人：四川大学
申请日： 2003-12-17 - 公布日： 2004-11-17 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：一种多色荧光复合扩增的引物设计方法，其特征是以一段公共序列SA(5′－TGTTCTT－3′)与在上述公共序列的5′端加上荧光标记物F后所形成的荧光标记序列SB(5′－F－TGTTCTT－3′)构成短序列对；将上述短序列对加在能够与人类基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端，构成一对非人类基因组序列，即长序列引物SA－P1、SB－P2。与现有方法相比较，采用本发明的引物设计方法之后，反应体系中没有加入数条短引物,引物数量减少，5′末端添加的碱基数目显著减少，优化反应体系和扩增条件相对更简单。
多色荧光复合扩增引物设计方法

[发明专利]一种中华鳖基因组微卫星多重PCR体系构建方法-CN201811111994.9有效
发明人：陈辰;朱新平;李伟 -专利权人：中国水产科学研究院珠江水产研究所
申请日： 2018-09-18 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种使用公共数据，快速构建中华鳖10×以上多重PCR体系的技术方法，其主要特征在于：1)使用公共数据库，获取中华鳖基因组序列；2)使用MISA软件对中华鳖基因组序列进行分析，使用Primer3进行批量引物设计，使用使用AutoDimer软件计算多态位点引物序列的相容性；3)保留引物序列相容性最强的10‑12个位点构建多重PCR体系，按照每个位点上游引物0.4μM，下游引物10μM的浓度配制引物预混液，然后将全部位点的引物预混液等体积混合配制多重PCR引物工作液；4)使用常规PCR方法对多重PCR体系进行扩增，使用毛细管电泳对扩增产物进行基因分型。
一种中华基因组卫星多重 pcr 体系构建方法

[发明专利]公共引物介导的多重定量PCR检测技术在转基因大豆检测中的应用-CN202110303536.0在审
发明人：孙万平;张玲;钱利祥;丁威;方坛芬;韩蓉 -专利权人：苏州大学
申请日： 2021-03-22 - 公布日： 2021-05-07 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了公共引物介导的多重定量PCR检测技术在转基因大豆检测中的应用，具体检测我国农业农村部允许进口的6种转基因大豆。在每对特异性引物的5’,端均加上一段公共引物,形成特异性嵌合引物。多重PCR检测体系扩增出特异性片段，GeXP检出各转基因大豆片段长度，GeXP多重检测体系检测敏感性可达到为1 ng/µL;扩增产物测序结果进一步说明了引物扩增的特异性。
公共引物多重定量 pcr 检测技术转基因大豆中的应用

[发明专利]一种水稻抗白叶枯病基因Xa4的分子标记及其应用-CN202010871915.5在审
发明人：李佳林;李燕群;唐杰;韩晓斌;曾翔;吴永忠 -专利权人：海南波莲水稻基因科技有限公司
申请日： 2020-08-26 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明的分子标记通过两条正向引物和一条公共反向引物PCR扩增得到，正向引物与公共反向引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑3所示。
一种水稻抗白叶枯病基因 xa4 分子标记及其应用

[发明专利]编码PCR二代测序建库方法、试剂盒及检测方法-CN201710102701.X有效
发明人：黄新华;戴慧清 -专利权人：金弗康生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2017-02-24 - 公布日： 2021-03-05 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种编码PCR二代测序建库方法，步骤包括：1)提取DNA；2)用带随机分子编码序列的单端特异引物进行正向单链线性扩增反应；3)用对侧单端特异引物与公共接头引物构成引物对，进行单端特异指数扩增反应；4)用测序双端公共接头引物对进行指数扩增反应；5)定量质检，获得DNA文库。
编码 pcr 二代测序建库方法试剂盒检测

[发明专利]一种检测绵羊高繁殖力基因BMPR1B的分子诊断方法-CN201310168673.3无效
发明人：赵兴波;陈晓勇;敦伟涛 -专利权人：赵兴波
申请日： 2013-05-09 - 公布日： 2013-10-02 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：采用等位基因特异PCR方法，设计两组特异引物（第一组为公共正向引物与野生型反向引物，第二组为公共正向引物和突变型反向引物）。如果只有第一组引物扩增出131bp的DNA片段，则所检测绵羊基因型为++；如果只有第二组引物扩增出131bp的DNA片段，则所检测绵羊基因型为BB；如果两组引物均扩增出131bp的DNA片段，则所检测绵羊基因型为
一种检测绵羊繁殖力基因 bmpr1b 分子诊断方法

[发明专利]Y染色体MiniSTR分型试剂盒及其制备方法和应用-CN200910076808.7无效
发明人：石美森;百茹峰;鲁涤;袁丽;杨雪 -专利权人：中国政法大学
申请日： 2009-01-21 - 公布日： 2009-07-08 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明设计了三对公共引物对，优选了适合中国群体遗传分布的12个Y染色体STR基因座并对部分基因座设计了MiniSTR引物，在上述MiniSTR引物的5′端分别加上这三对公共引物得到24条加尾引物；采用本发明试剂盒可单管同时扩增12个Y染色体STR基因座，避免了各引物间的竞争及杂合二聚体的形成，提高了各基因座的扩增效率，扩增产物长度可小于280bp，灵敏度高(低至30pg)，可得到更高的STR分型成功率，提高了法医DNA降解检材的扩增效率
染色体 ministr 试剂盒及其制备方法应用

[发明专利]Y染色体多色荧光复合扩增试剂盒-CN03135755.5无效
发明人：侯一平;张霁;石美森;李英碧;应斌武;吴谨;颜静 -专利权人：四川大学
申请日： 2003-09-04 - 公布日： 2004-05-05 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种Y染色体多色荧光复合扩增试剂盒，其特征是由分离包装的引物混合物、DNA聚合酶、缓冲液、MgCl₂和等位基因分型标准物混合物构成，所述引物混合物由四对荧光公共引物YA和YB1、YA和YB2、YA和YB3、YA和YB4以及对应于A、B、C、D四组Y染色体特异STR基因座的加尾引物混合而成。各组份的用量比为：引物混合物中荧光公共引物各0.25～0.35ml(400nM)，加尾引物各0.25～0.35ml(40nM)；DNA聚合酶3000u(3u/μl)；缓冲液3.25～4.25ml；MgCl
染色体多色荧光复合扩增试剂盒

[发明专利]基于高通量测序的DNA甲基化检测方法-CN201910639369.X在审
发明人：施小龙;唐超;吴永忠;王颖;綦俊 -专利权人：重庆大学附属肿瘤医院
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2019-10-08 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开一种基于高通量测序的DNA甲基化检测方法，通过用亚硫酸氢盐处理DNA片段，通过末端转移酶延伸单链DNA片段的3’末端引入核苷酸同聚物序列，通过与核苷酸同聚物序列互补的引物延伸产生双链并引入测序公共接头序列，通过5’端生物素修饰将延伸的序列结合到链霉亲合素包被的磁珠上以及第二次3’末端引入核苷酸同聚物序列，通过第二条带有公共接头序列的引物延伸引入第二公共接头序列，通过用公共PCR引物扩增延伸的DNA产物制备出基因组甲基化特异的
公共接头核苷酸同聚物引入高通量测序测序文库引物延伸测序延伸亚硫酸氢盐处理基因组甲基化石蜡包埋组织单链DNA片段甲基化检测链霉亲合素末端转移酶生物素修饰短片段DNA 高灵敏度序列互补游离DNA 高通量片段化包被磁珠扩增双链制备血液

[发明专利]一种检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒-CN201410153342.7有效
发明人：孙万平;胡颖熹;张舒羽;张国兴;姚利;李凯;陈子兴 -专利权人：苏州大学
申请日： 2014-04-16 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明属于基因检测领域，具体涉及一种检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒，包括：常规多重PCR组件、针对常见白血病融合基因的嵌合引物和公共引物对。嵌合引物为在针对BCR/ABL、PML/RARα、AML1/ETO、E2A/PBX1常见白血病融合基因7个剪切异构体的特异引物5’端加上公共引物的序列。
一种检测白血病融合基因多重 pcr 试剂盒

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