本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种外源表达蛋白的信号标志物、外源表达蛋白及其制备方法；所述信号标志物包括如SEQ ID NO.1所示的kozak序列、如SEQ ID NO.2所示的信号肽和如SEQ IDNO.3所示的无序序列；所述外源表达蛋白包括DDR1蛋白片段、MAGEA4蛋白片段和ACP3蛋白片段，DDR1蛋白、MAGEA4蛋白和ACP3蛋白的N端分别连接信号标志物；利用kozak序列增加外源表达蛋白在翻译阶段的表达效率的这一特性，再利用信号肽增加外源表达蛋白在分泌过程中跟细胞膜识别定位的准确性的这一特性，最后通过无序序列加快分泌蛋白跟细胞膜的结合速度，因此通过该信号标志物，可以综合提高外源表达蛋白的表达量和表达纯度。
本发明公开了一种V8蛋白酶的制备方法。所述方法包括如下步骤：使融合蛋白的编码基因在宿主菌或宿主细胞中进行表达，得到所述V8蛋白酶，所述融合蛋白为将PelB信号肽融合于V8蛋白酶的N端后所得；所述PelB信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No本发明采用四种不同信号肽Sig、DsbA、PelB和STII制备V8蛋白酶，并通过对V8蛋白酶表达量进行分析发现：PelB信号肽可以高效引导V8蛋白酶分泌至周质空间，其表达量显著高于其它信号肽，是V8蛋白酶周质空间分泌表达的最佳信号肽，可用于V8蛋白酶制品的表达和制备工作。
本发明涉及一种用于蛋白质表达的信号肽，具体地，本发明涉及用于引导外源蛋白质（如抗体）在哺乳动物细胞中分泌表达的信号肽，所述信号肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明的信号肽可添加于哺乳动物细胞重组蛋白（如抗体）的表达载体,用于引导外源蛋白的高效分泌表达。与现有信号肽相比，本发明信号肽引导的外源蛋白表达量得到了大幅提升。
