[发明专利]一种基于SERS检测赭曲霉毒素A的方法在审
| 申请号： | 201910850649.5 | 申请日： | 2019-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN110592181A | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 吴韶华;黄孝斌 | 申请（专利权）人： | 福州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6804 | 分类号： | C12Q1/6804;C12Q1/682;G01N21/65 |
| 代理公司： | 35100 福州元创专利商标代理有限公司 | 代理人： | 饶文君;蔡学俊 |
| 地址： | 350108 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于SERS检测赭曲霉毒素A的方法。其包括将sDNA固定在AuNanostar@4‑MBA@Au核壳纳米金星表面作为SERS捕获探针的制备，并将发夹DNA固定在磁珠表面。利用OTA和OTA适配体的高亲和力，以及Exo III循环放大作用，使得大量的AuNanostar@4‑MBA@Au核壳纳米金星SERS捕获探针连接至磁珠表面。从而检测得到的SERS的强度与OTA的浓度有着密切关系，即开发了“开启”模式的SERS适配体传感器用于超敏感OTA检测。本发明提供的检测方法对赭曲霉毒素的检测具有成本低廉，增强型，检测灵敏度高，检测线低，抗干扰性好的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 捕获探针 磁珠表面 核壳 金星 适配体传感器 赭曲霉毒素A 检测灵敏度 赭曲霉毒素 发夹 放大作用 高亲和力 密切关系 检测线 适配体 增强型 制备 敏感 开发 | ||
【主权项】：
1.一种AuNanostar@4-MBA@Au/sDNA SERS捕获探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）金种的合成：往25mL的圆底烧瓶中依次加入5 mL, 0.1 M曲拉通、5 mL, 0.5 mM氯金酸溶液，300r/min搅拌混匀，然后提高转速至800r/min加入冰水新制的0.6 mL, 0.01 M硼氢化钠，反应2min，静置1h后制得金种溶液；/n（2）AuNanostar的生长：往25mL的圆底烧瓶中依次加入10 mL, 0.1 M曲拉通、10 mL,0.5 mM氯金酸溶液，300r/min搅拌混匀，接着，提高转速至800r/min，依次加入步骤（1）制备得到的金种12 μL，0.5 mL, 1 mM硝酸银和0.6 mL, 0.0788 M抗坏血酸溶液，反应1min，静置1h后得到AuNanostar；/n（3）通过Au-S键将1mL，2mM 4-MBA拉曼信号分子共价键合至上述AuNanostar表面，400r/min反应30min，制得AuNanostar@4-MBA；/n（4）往25mL的圆底烧瓶中依次加入1mL,2v/v%吐温-20，2.5mL,0.5 mM氯金酸和步骤（3）制备得到的AuNanostar@4-MBA 1mL，300r/min搅拌混匀，提高转速至800r/min，加入0.15mL，0.0788 M抗坏血酸溶液，反应10min制得AuNanostar@4-MBA@Au SERS探针；/n（5）通过Au-S键将10 uL, 10 uM巯基修饰的sDNA，37℃下孵育12h键合至100 uL 步骤（4）制备得到的AuNanostar@4-MBA@Au表面制得AuNanostar@4-MBA@Au/sDNA SERS捕获探针。/n
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