[发明专利]一种检测外周血中胰腺癌细胞标志物的试剂盒有效
| 申请号： | 201710825555.3 | 申请日： | 2017-09-14 |
| 公开（公告）号： | CN107843731B | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 谭焕然;牛刚;郝纯毅;徐巍;杨晓伟 | 申请（专利权）人： | 北京牛牛基因技术有限公司;北京大学;北京市肿瘤防治研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6804 | 分类号： | C12Q1/6804;G01N33/574;G01N33/543 |
| 代理公司： | 11100 北京北新智诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张晶;郭佩兰 |
| 地址： | 100009 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种检测外周血中胰腺癌细胞的试剂盒，包括结合有胰腺癌抗体的磁珠及相应缓冲试剂，该试剂盒采用磁珠分选，RT‑PCR等分子生物学的方法检测胰腺癌患者血液循环中的肿瘤细胞的生物学活性，确定药物治疗靶点的基因，通过检测EpCAM、KRT19和MUC16的表达水平，确定胰腺癌的发展及转归，对胰腺癌的个体化治疗提供理论依据和实验证据。本发明提供的试剂盒检测样本量小，对患者伤害小，检测灵敏度高，检出率可达80％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 胰腺癌 试剂盒 分子生物学 个体化治疗 检测灵敏度 生物学活性 试剂盒检测 胰腺癌细胞 表达水平 磁珠分选 缓冲试剂 实验证据 血液循环 药物治疗 肿瘤细胞 检出率 外周血 样本量 种检测 检测 靶点 磁珠 抗体 基因 伤害 | ||
【主权项】：
1.一种检测外周血中胰腺癌细胞标志物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由如下组分组成：/n结合有胰腺癌抗体的磁珠：/n结合有寡核苷酸Oligo(dT)的磁珠；/n缓冲液A；100-200mL/n缓冲液B：100-200mL；/n裂解/结合缓冲液150-250mL；/n10×缓冲液4.0-5.0mL；/ndNTPs，每种5mM 4.0-5.0mL/n逆转录酶，10000U/μL 2.0-3.0mL/nRNA酶抑制剂，40U/μL 0.4-0.6mL/n2×热启动PCR混合液2-3mL/nRNase-free水1-2mL；/n胰腺癌肿瘤标志物引物10μmol/L 3.0-5.0mL；/n内标ACTIN引物；/n其中所述胰腺癌肿瘤标志物为EpCAM、KRT19和MUC16；/n所述EpCAM引物序列为：/n上游引物如SEQ ID NO：1所示；/n下游引物如SEQ ID NO：2所示；/n所述KRT19引物序列为：/n上游引物如SEQ ID NO：3所示；/n下游引物如SEQ ID NO：4所示；/n所述MUC16引物序列为：/n上游引物如SEQ ID NO：5所示；/n下游引物如SEQ ID NO：6所示；所述内标ACTIN引物序列为：/n上游引物如SEQ ID NO：7所示；/n下游引物如SEQ ID NO：8所示；所述胰腺癌抗体为抗EpCAM单克隆抗体和抗CK20单克隆抗体。/n
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