[发明专利]多糖裂解单加氧酶基因PsLMPO10A及其编码蛋白和功能在审

专利信息
申请号: 201910178653.1 申请日: 2019-03-11
公开(公告)号: CN109897859A 公开(公告)日: 2019-06-18
发明(设计)人: 王晓辉;徐聪;刘京京;陈立功;王文豪 申请(专利权)人: 大连大学
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N15/70;C12N9/02;C12P19/26;A01P3/00
代理公司: 大连八方知识产权代理有限公司 21226 代理人: 朱秀芬
地址: 116622 辽*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明公开了一种来源于假交替单胞菌的新菌株Pseudoalteromonas sp.DL‑6的多糖裂解单加氧酶基因PsLMPO10A及其克隆、表达、纯化与应用。以Pseudoalteromonas sp.DL‑6的基因组DNA为模板,以PCR方法获得PsLMPO10A的全长基因,其核苷酸序列全长2631bp,编码875个氨基酸,分子量约55.308kD。利用体外重组表达得到多糖裂解单加氧酶PsLMPO10A蛋白,纯化后的蛋白浓度为1.57mg/mL,蛋白总量15.7mg。通过PCR技术扩增目的基因,表达载体pET22b相连接,导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,得到分子量约为55KDa的重组蛋白,经Ni‑NTA亲和柱纯化得到目的蛋白。扫描电子显微镜(SEM)观察PsLMPO10A可破坏粉状几丁质。PsLMPO10A对胶体几丁质、α‑几丁质、β‑几丁质、微晶纤维素和β几丁质纳米须有结合能力。PsLMPO10A可抑制苹果腐烂病。
搜索关键词: 几丁质 裂解 单加氧酶基因 蛋白 扫描电子显微镜 假交替单胞菌 大肠杆菌 核苷酸序列 胶体几丁质 苹果腐烂病 亲和柱纯化 微晶纤维素 基因组DNA 编码蛋白 表达载体 单加氧酶 蛋白总量 结合能力 目的蛋白 目的基因 全长基因 体外重组 重组蛋白 氨基酸 菌株 扩增 克隆 观察 应用
【主权项】:
1.本发明提供的单加氧酶基因PsLMPO10A,其特征在于,有如下的核苷酸序列:
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