[发明专利]一种检测核酸突变顺反式结构的方法及其试剂盒在审
| 申请号： | 201811651268.6 | 申请日： | 2018-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN109554444A | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 祝令香;彭志勇;郭永;杨文军;高娜;王勇斗 | 申请（专利权）人： | 新羿制造科技（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 102200 北京市昌平*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种检测核酸突变顺反式结构的方法及其试剂盒。该方法包括：步骤a.根据核酸突变位点设计数字PCR扩增引物对和特异性检测探针，所述PCR扩增引物对作为数字PCR扩增的上游引物和下游引物，所述数字PCR扩增引物对能够同时扩增待检测的突变位点区域；所述检测探针检测的位置在引物对扩增的区域内，且针对每个检测位点标记不同荧光染料；步骤b.对所述核酸位点进行数字PCR扩增和进行扩增后微液滴荧光检测，根据所述微液滴荧光信号差异来确定核酸突变顺反式结构。本发明利用ddPCR技术对模板的单分子分散能力，实现了对基因突变的顺反式结构进行特异性检测。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸 反式结构 数字PCR 扩增 突变 扩增引物 突变位点 试剂盒 微液滴 种检测 位点 检测 特异性检测探针 特异性检测 引物对扩增 分散能力 基因突变 检测探针 上游引物 下游引物 荧光检测 荧光染料 荧光信号 单分子 | ||
【主权项】：
1.一种检测核酸突变顺反式结构的方法，其特征在于，所述方法包括：步骤a.根据核酸突变位点设计数字PCR扩增引物对和特异性检测探针，所述PCR扩增引物对作为数字PCR扩增的上游引物和下游引物，所述数字PCR扩增引物对能够同时扩增待检测的突变位点区域；所述检测探针检测的位置在引物对扩增的区域内，且针对每个检测位点标记不同荧光染料；步骤b.对所述核酸位点进行数字PCR扩增和进行扩增后微液滴荧光检测，根据所述微液滴荧光信号差异来确定核酸突变顺反式结构。
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