[发明专利]脱除重金属酵母小球造粒工艺在审
| 申请号： | 201811625616.2 | 申请日： | 2018-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN109762804A | 公开（公告）日： | 2019-05-17 |
| 发明（设计）人： | 徐莹;张丹丹;陈鹏;封福鲜;吴岩强;汪东风 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学;大连棒棰岛海产股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10;C12N11/04;C12R1/84;C12R1/865 |
| 代理公司： | 大连科技专利代理有限责任公司 21119 | 代理人： | 佟蕊 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脱除重金属酵母小球造粒工艺，步骤如下：将酵母菌，经过固体活化和液体活化并扩大培养之后，用无菌水清洗，离心得到酵母菌泥；配制0.5%‑5%的海藻酸钠水溶液，超声排气；用搅拌器将海藻酸钠水溶液与酵母菌泥按1‑4:1的体积比混匀；将匀混的海藻酸钠‑酵母菌泥混合液滴入0.5%‑5%的氯化钙溶液中造粒；制成的固定化酵母小球在氯化钙溶液中静置30min‑2h，然后用纱布过滤，随后用蒸馏水将小球再进行二次清洗，洗去上面残余的氯化钙溶液。造粒得到的固定化微生物酵母小球具有良好的重金属脱除效果，而且在确定微生物包埋率的情况下，确定了海藻酸钠与酵母菌泥的合理的体积比，既保证包埋效果好，也能减少海藻酸钠或者酵母菌泥的用量，达到节约成本的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 酵母菌泥 小球 氯化钙溶液 海藻酸钠 酵母 海藻酸钠水溶液 造粒工艺 体积比 重金属 脱除 造粒 蒸馏水 酵母菌 固定化微生物 固定化酵母 无菌水清洗 重金属脱除 超声排气 二次清洗 固体活化 扩大培养 纱布过滤 液体活化 包埋率 残余的 混合液 搅拌器 包埋 滴入 混匀 微生物 配制 节约 保证 | ||
【主权项】：
1.脱除重金属酵母小球造粒工艺，其特征在于，步骤如下：将酵母菌，经过固体活化和液体活化并扩大培养之后，用无菌水清洗，离心得到酵母菌泥；配制0.5%‑5%的海藻酸钠水溶液，超声排气；用搅拌器将海藻酸钠水溶液与酵母菌泥按1‑4:1的体积比混匀；将匀混的海藻酸钠‑酵母菌泥混合液滴入0.5%‑5%的氯化钙溶液中造粒；制成的固定化酵母小球在氯化钙溶液中静置30min‑2h，然后用纱布过滤，随后用蒸馏水将小球再进行二次清洗，洗去上面残余的氯化钙溶液。
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- 2015-10-27 - 2019-03-12 - C12N11/10
- 本发明公开了一种固定化蚯蚓纤溶酶的磁性微球的制备方法，先将猪肺抑肽酶溶于pH7～9的缓冲液中得到蛋白酶缓冲液，再将其加入到经过活化的磁性壳聚糖微球中，水浴振荡偶联4～8h后得到偶联猪肺抑肽酶的磁性壳聚糖微球；再将其加入蚯蚓纤溶酶粗酶溶液在30‑60℃恒温水浴摇床中振荡固化反应0.5‑3h；反应结束后，反复洗涤至洗涤液中检测不出蛋白为止，磁铁分离收集即可得到固定化蚯蚓纤溶酶的磁性微球，其酶活性为15‑30U/mg。本发明以猪肺抑肽酶为配基，与磁性微球偶联，运用用于蚯蚓纤溶酶的分离纯化，提高了蚯蚓纤溶酶的分离纯化选择性，而且磁性微球易于与蚯蚓纤溶酶分离。
- 海藻酸钠复合固定化菌剂及其制备方法以及用途-201610225872.7
- 张可;陈强;罗鸿兵;陈伟;陈佳 - 四川农业大学
- 2016-04-13 - 2019-03-12 - C12N11/10
- 本发明公开了海藻酸钠复合固定化菌剂及其制备方法，解决了现有技术中并没有适用于二氯喹啉酸降解用假单胞菌的固定化方式的问题。本发明包括将具有假单胞菌的载体培养基和海藻酸钠混合后，滴入浓度为1～4%的氯化钙中静置2～4h制成的颗粒剂；所述海藻酸钠的质量浓度为2～6%；所述载体培养基包括吸附载体和无机盐液体培养基；该吸附载体与海藻酸钠的重量比为1～3∶1，该吸附载体由重量比为1∶1～2∶1的玉米芯、竹炭和油枯组成。本发明通过有效提高菌体的降解效率；且本发明固定化菌剂的降解率远远高于空白小球物理吸附效率和游离菌株的生物降解效率之和，能有效达到相互促进的效果。
- 一种产脲酶菌株的固定化及其应用-201610293206.7
- 毛相朝;侯恩玲;孙建安 - 中国海洋大学
- 2016-05-05 - 2019-03-12 - C12N11/10
- 本发明涉及一种产脲酶菌株的固定化及其应用，固定生产脲酶的根瘤菌属细菌，并将其应用于清除食品尿素中。本发明研究了细胞固定化的最适条件以及游离细胞和固定化细胞的最适pH、最适温度、温度稳定性和pH稳定性，用响应面方法优化固定化细胞的最优条件为：1.96％琼脂，1.42％细胞和pH 9.0，固定化后，细胞的脲酶活性提高了约1.5倍，最适反应温度由40℃上升到50℃。最后还研究了固定化细胞在清除尿素中的应用，尿素清除实验显示固定化细胞对部分酒类和牛奶具有良好的效果。将固定化的菌株细胞加入到5种市售的产品中，在35℃保温24小时，结果显示，10％‑92.8％的尿素可以被清除，具有良好的应用价值。
- 一种甘露糖磁性纳米载体及其制备方法-201811537539.5
- 王剑锋;鲁晓莉;刘宝全;李春斌 - 大连民族大学
- 2018-12-15 - 2019-02-19 - C12N11/10
- 一种甘露糖磁性纳米载体及其制备方法，属于纳米载体领域。该甘露糖磁性纳米载体通过以下步骤制备：制备油酸磁性纳米颗粒Fe3O4@OA，将Fe3O4@OA加入多巴胺盐酸溶液制备得到多巴胺功能化磁性纳米载体Fe3O4@OA@DP，多巴胺功能化磁性纳米载体Fe3O4@OA@DP加入到甘露糖胺盐溶液制备得到甘露糖磁性纳米载体Fe3O4@OA@DP‑mannose。本发明制备的载体制备过程简单温和，且制备的磁性纳米载体由于采用细胞表面的糖基组分‑甘露糖修饰，拥有较好的生物兼容性。
- 一种固相化细胞的制备方法及其应用-201510745755.9
- 宋海鹏;李敏;王庆东 - 长春力太生物技术有限公司
- 2015-11-05 - 2019-02-19 - C12N11/10
- 本发明公开了一种固相化细胞的制备方法，所述方法包括在含欲被固相化细胞的悬液中加入果胶溶液，并加入氯化钙和壳聚糖溶液，以得到含果胶钙的细胞微球悬浮液。所述方法可以保持细胞的活性，允许细胞的营养成分进入微丸，维持细胞的正常生长和分裂，细胞的代谢产物可以分泌出微丸，进而从培养基中分离纯化相关的重组蛋白。本发明还公开了所述方法在固相化细胞工程化应用和药物制备方面的应用。
- 一种基于壳聚糖纳米粒子的CTC捕获与纯化基底及其制备方法-201510173357.4
- 裴仁军;孙娜;王金娥 - 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
- 2015-04-14 - 2019-02-01 - C12N11/10
- 本发明公开了一种基于壳聚糖纳米粒子的CTC(循环肿瘤细胞)捕获与纯化基底、其制法与应用。本发明选择细胞相容性良好的壳聚糖构筑三维纳米结构“软”基底，引入抗粘附分子，例如聚乙二醇(PEG)分子降低细胞在界面上的非特异粘附，利用CTC亲和捕获分子，例如上皮细胞黏附分子(EpCAM)适配体实现CTC细胞的高特异捕获，随后基于CTC与血液细胞增殖属性差异，通过被捕获细胞原位培养的方式进一步提高靶细胞的纯度。本发明的CTC捕获与纯化基底具备良好的细胞相容性，能保持所捕获细胞的活性，且制备工艺简单便捷，成本低廉，并能实现所捕获细胞的原位培养纯化，还易于规模化实施。
- 一种动态键水凝胶的制备方法及其在酶固定化方面的应用-201811157242.6
- 陈敬华;米哈伊尔·巴尔博尤;张燕;王睿 - 江南大学
- 2018-09-30 - 2019-01-25 - C12N11/10
- 本发明一种动态键水凝胶的制备方法及其在酶固定化方面的应用，属于高分子材料领域。首先由芳香醛、氨基封端的聚合物以及含不同功能基团的胺，经亚胺生成反应聚合而成，并进一步与6‑氧‑羧甲基壳聚糖交联得到水凝胶。然后利用动态键水凝胶作载体，在制备过程中通过物理吸附法将靶点酶包裹于其中，实现酶的固定化。本发明与前期反应体系中动态键聚合物的直接添加相比，水凝胶固定化材料能显著增强酶的重复利用度。相对其他酶固定化材料，该方法简单易行，水凝胶的高含水量为酶提供了较好的外部催化环境，能较大程度维持固定化酶的体外活性。
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