[发明专利]一种具有β-半乳糖苷酶活性的酶蛋白及其应用

摘要

本发明公开了一种β‑半乳糖苷酶AgWH2A及其应用，其氨基酸序列为SEQ ID NO：1；编码上述β‑半乳糖苷酶的基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：2。本发明的β‑半乳糖苷酶能降解琼寡糖非还原端的D‑半乳糖(D‑Gal)，以及生成对应的新琼寡糖，因此可用于新琼寡糖的制备。相较于化学方法，酶法具有条件温和，环境友好，催化活性高等特点，故其是制备新琼寡糖很有前景的方法。本发明的大肠杆菌重组株，pET‑21a/BL21(DE3)表达的重组β‑半乳糖苷酶，表达水平高，易于纯化，具有良好的耐碱性和酶活性，为新琼寡糖的制备提供了新的酶源。 1

主权项

1.一种具有β‑半乳糖苷酶活性的酶蛋白，其特征在于，所述的酶蛋白包含有：

1)氨基酸序列为Seq ID NO：1的酶；

2)与1)中酶具有90％或以上同源性，能降解琼寡糖来制备新琼寡糖和D‑半乳糖的酶。

2.如权利要求1所述的酶蛋白，其特征在于，所述的2)中酶，是从淡黄色噬琼胶菌(Agarivorans gilvus)中获得的。

3.如权利要求2所述的酶蛋白，其特征在于，所述的淡黄色噬琼胶菌(A.gilvus)，为A.gilvus WH0801株。

4.一种编码基因，其特征在于，所述的基因编码权利要求1所述的酶蛋白。

5.如权利要求4所述的基因，其特征在于，所述的基因的核苷酸序列为Seq ID NO：2。

6.一种重组载体，其特征在于，所述的重组载体是携带有权利要求4所述的基因的载体。

7.如权利要求6所述的重组载体，其特征在于，所述的载体为pET‑21a(+)载体。

8.一种重组表达宿主，其特征在于，所述的重组表达宿主是转化有权利要求6或7所述的重组载体的表达宿主。

9.如权利要求8所述的重组表达宿主，其特征在于，所述的表达宿主为大肠杆菌BL21(DE3)。

10.权利要求1‑3任一项所述的酶蛋白在降解琼寡糖来制备新琼寡糖和D‑半乳糖的应用。