[发明专利]利用超临界模拟移动床色谱系统分离纯化碱蓬中槲皮素

摘要

利用超临界模拟移动床色谱系统分离纯化碱蓬中槲皮素，涉及一种分离纯化碱蓬中槲皮素的方法，本发明从碱蓬中提取、分离、纯化槲皮素的全部过程均采用对设备和环境友好的水或乙醇作为溶剂，溶剂回收方便，能耗低；由于黄酮类成分不稳定，易被氧化，尤其是在高温环境下更易被氧化，本发明使用的提取方法在室温下即可完成，控制提取温度最高不超过70℃，条件比较温和，既不影响黄酮类成分的提取效果，又有利于黄酮类成分的稳定存在；通过采用本发明的方法，连续性增强，没食子酸纯度高，生产周期缩短，成本低。

主权项

利用超临界模拟移动床色谱系统分离纯化碱蓬中槲皮素，其特征是：利用超临界模拟移动床色谱系统“SF‑SMB”技术分离并纯化碱蓬中槲皮素的方法的具体步骤是：步骤一：碱蓬的筛选挑选大小适中，颜色新鲜、无虫害的碱蓬；步骤二：碱蓬的预处理(1)清洗处理将碱蓬放在清水中浸泡，冲洗，直至碱蓬上没有泥垢；(2)干燥处理将碱蓬平铺并放在通气良好的环境中干燥处理，50℃～60℃下烘箱中干燥处理2h～4h；使得碱蓬表面的水分干燥；(3)杀青在微波下进行杀青，摊放碱蓬叶厚度2～5厘米，2kw的微波处理10‑15分钟；(4)粉碎将经干燥处理的碱蓬在室温下于粉碎机中粉碎，过60～100目筛；步骤三：槲皮素的提取采用超声波辅助水酶法对碱蓬槲皮素进行提取，采用复合酶：纤维素酶∶果胶酶＝1∶1进行处理，酶解时间30min～60min、酶解温度40℃～60℃、酶解pH4.0～6.0、加酶量1000U/g～5000U/g，料液比1∶10～1∶30，辅助超声功率200W～600W；步骤四：纯化预处理将提取物进行离心3min～10min，3000rpm～5000rpm，取上清液于0.45μm滤膜抽滤，上清液经旋转蒸发至干，50％乙醇溶解；步骤五：槲皮素的纯化采用超临界模拟移动床色谱系统“SF‑SMB”分离纯化碱蓬中槲皮素，采用4柱3区的SMB对槲皮素提取物进行分离制备，柱连接方式为1‑2‑1，反相ODS，规格为4.6mm×150mm，5μm，为分离填料，乙醇溶液和含0.4％磷酸水为洗脱液“7∶3，V∶V”；第一次SMB分离条件为：进样浓度0.1g/mL～0.5g/mL，进样流速0.1mL/min～2.0mL/min，洗脱流速1.0mL/min～5.0mL/min，冲洗流速1.0mL/min～5.0mL/min，洗脱流速1.0mL/min～5.0mL/min，周期20min～60min；超临界CO2压力10～30MPa，斧温30℃～60℃。