[发明专利]利用超临界模拟移动床色谱系统分离纯化碱蓬中槲皮素

权利要求书

1.利用超临界模拟移动床色谱系统分离纯化碱蓬中槲皮素，其特征是：利用超临界模拟移动床色谱系统“SF-SMB”技术分离并纯化碱蓬中槲皮素的方法的具体步骤是：

步骤一：碱蓬的筛选

挑选大小适中，颜色新鲜、无虫害的碱蓬；

步骤二：碱蓬的预处理

(1)清洗处理

将碱蓬放在清水中浸泡，冲洗，直至碱蓬上没有泥垢；

(2)干燥处理

将碱蓬平铺并放在通气良好的环境中干燥处理，50℃～60℃下烘箱中干燥处理2h～4h；使得碱蓬表面的水分干燥；

(3)杀青

在微波下进行杀青，摊放碱蓬叶厚度2～5厘米，2kw的微波处理10-15分钟；

(4)粉碎

将经干燥处理的碱蓬在室温下于粉碎机中粉碎，过60～100目筛；

步骤三：槲皮素的提取

采用超声波辅助水酶法对碱蓬槲皮素进行提取，采用复合酶：纤维素酶∶果胶酶＝1∶1进行处理，酶解时间30min～60min、酶解温度40℃～60℃、酶解pH4.0～6.0、加酶量1000U/g～5000U/g，料液比1∶10～1∶30，辅助超声功率200W～600W；

步骤四：纯化预处理

将提取物进行离心3min～10min，3000rpm～5000rpm，取上清液于0.45μm滤膜抽滤，上清液经旋转蒸发至干，50％乙醇溶解；

步骤五：槲皮素的纯化

采用超临界模拟移动床色谱系统“SF-SMB”分离纯化碱蓬中槲皮素，采用4柱3区的SMB对槲皮素提取物进行分离制备，柱连接方式为1-2-1，反相ODS，规格为4.6mm×150mm，5μm，为分离填料，乙醇溶液和含0.4％磷酸水为洗脱液“7∶3，V∶V”；第一次SMB分离条件为：进样浓度0.1g/mL～0.5g/mL，进样流速0.1mL/min～2.0mL/min，洗脱流速1.0mL/min～5.0mL/min，冲洗流速1.0mL/min～5.0mL/min，洗脱流速1.0mL/min～5.0mL/min，周期20min～60min；超临界CO2压力10～30MPa，斧温30℃～60℃。

2.根据权利要求1所述的利用超临界模拟移动床色谱系统分离纯化碱蓬中槲皮素，其特征在于：纯化率可达93％～99％。