[发明专利]重组肌红蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201711214207.9 | 申请日： | 2017-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN109836492B | 公开（公告）日： | 2022-07-22 |
| 发明（设计）人： | 邓盛元;崔宏达;郑晨昱 | 申请（专利权）人： | 南京理工大学 |
| 主分类号： | C07K14/805 | 分类号： | C07K14/805;C07K1/34 |
| 代理公司： | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人： | 刘海霞 |
| 地址： | 210094 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组肌红蛋白的制备方法。所述方法先通过在pH＝2.0的酸性条件下，蛋白质变性导致卟啉分离制备脱辅基肌红蛋白，再通过pH＝9.5的碱性条件下，脱辅基肌红蛋白复性与锌卟啉的结合制备重组蛋白。本发明制备方法工艺简单、易于控制，制得的重组肌红蛋白对于肌红蛋白能够发出稳定的较强的荧光，其荧光强度要远远强于原肌红蛋白。利用重组肌红蛋白可以制备荧光生物传感器，具有灵敏度高、选择性好等优点，可应用于生物医学研究、环境监测等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 肌红蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.重组肌红蛋白的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤1、制备脱辅基肌红蛋白：4℃条件下，取肌红蛋白溶于水中，用HCl溶液调节pH至2.0，静置，然后将溶液用等量丁酮萃取，直至上层丁酮无色为止，取下层浅红色脱辅基肌红蛋白溶液进行透析，低温高速离心取上清液，得到脱辅基肌红蛋白溶液；步骤2、制备重组肌红蛋白：取锌卟啉Zn(II)溶于NaOH溶液中，缓慢搅拌下滴入脱辅基蛋白溶液中，并在冰浴中静置，然后用NaOH溶液将pH调至9.5，再用G25脱盐柱洗脱，得到重组肌红蛋白。
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- 本发明公开了一种重组肌红蛋白的制备方法。所述方法先通过在pH＝2.0的酸性条件下，蛋白质变性导致卟啉分离制备脱辅基肌红蛋白，再通过pH＝9.5的碱性条件下，脱辅基肌红蛋白复性与锌卟啉的结合制备重组蛋白。本发明制备方法工艺简单、易于控制，制得的重组肌红蛋白对于肌红蛋白能够发出稳定的较强的荧光，其荧光强度要远远强于原肌红蛋白。利用重组肌红蛋白可以制备荧光生物传感器，具有灵敏度高、选择性好等优点，可应用于生物医学研究、环境监测等领域。
- 泥蚶血红蛋白抗菌肽在食品防腐保鲜中的应用-202010161161.4
- 杨燊;董玉婷;李健;谢婷玉;章跃陵;刘光明 - 集美大学
- 2020-03-10 - 2022-07-19 - C07K14/805
- 本发明提出了泥蚶血红蛋白抗菌肽在食品防腐保鲜中的应用，所述泥蚶血红蛋白抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该抗菌肽对单增李斯特菌具有很强的抗菌作用，可吸附在单增李斯特菌细胞膜表面并对细胞膜进行破坏导致单增李斯特菌死亡，可改变单增李斯特菌细胞膜的通透性并抑制细胞膜生成。从而为寻找新的食品防腐剂提供实验依据，促进我国食品行业的健康、持续发展。
- 一种糖尿病早期诊断多肽标志物及其应用-202110325394.8
- 张永谦;信树辰;洪杰;邓玉林 - 北京理工大学
- 2021-03-26 - 2022-07-05 - C07K14/805
- 本发明涉及一种多肽标志物及其应用，属于生物技术领域。所述多肽标志物的氨基酸序列为氨基酸序列表中的SEQ ID No.1，还提供了一种氨基酸序列为氨基酸序列表中的SEQ ID No.2的多肽标志物。所述应用是指所述多肽标志物在制备糖尿病早期诊断试剂盒中的应用。本发明提出了定量肽类生物标志物作为临床糖尿病早期诊断的策略，获得了预防和监测糖尿病的相关指标，采用以敏感肽和内标肽段液相色谱质谱得到的肽段的峰面积或峰强度之比作为糖基化修饰程度指标，巧妙地解决了临床样品中存在较大个体差异，相对定量存在较大困难的问题，对于糖尿病的早期诊断和有效干预具有重大意义。
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