[发明专利]全基因组甲基化测序文库及其构建方法有效
申请号: | 201410788846.6 | 申请日: | 2014-12-17 |
公开(公告)号: | CN104532360A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 王苗英;朱海浩;蒋智;李明洲;王大伟;刘运超;曹志生 | 申请(专利权)人: | 北京诺禾致源生物信息科技有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 吴贵明;张永明 |
地址: | 102208 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种全基因组甲基化测序文库及其构建方法。该构建方法包括以下步骤:S1,对全基因组DNA进行片段化,得到DNA片段;S2,采用由dATP、dTTP和dGTP混合形成的dNTP对DNA片段进行末端修复,得到修复片段;S3,对修复片段进行3’末端加“A”,得到3’末端带“A”片段;S4,采用经过“C”到“T”转化处理的接头序列对3’末端带“A”片段进行接头连接,得到带接头片段;S5,对带接头片段进行“C”到“T”转化处理,得到处理片段;S6,对处理片段进行扩增,得到全基因组甲基化测序文库。通过采用不含dCTP的dNTP进行末端修复,避免了非甲基化C的引入,提高了甲基化程度分析的准确性。 | ||
搜索关键词: | 基因组 甲基化 序文 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种全基因组甲基化测序文库的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括以下步骤:S1,对所述全基因组DNA进行片段化,得到DNA片段;S2,采用dATP、dTTP和dGTP混合形成的dNTP对所述DNA片段进行末端修复,得到修复片段;S3,对所述修复片段进行3’末端加“A”,得到3’末端带“A”片段;S4,采用经过“C”到“T”转化处理的接头序列对所述3’末端带“A”片段进行接头连接,得到带接头的片段;S5,对所述带接头片段进行“C”到“T”转化处理,得到处理片段;S6,对所述处理片段进行扩增,得到所述全基因组甲基化测序文库。
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