[发明专利]一种甲基化DNA的测序方法及其应用在审
| 申请号： | 201410578592.5 | 申请日： | 2014-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN104372079A | 公开（公告）日： | 2015-02-25 |
| 发明（设计）人： | 蔡万世;伍鸿鹄;王康利;孙中生 | 申请（专利权）人： | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 裴娜 |
| 地址： | 北京市朝*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种甲基化DNA的测序方法及其应用。基于目前成熟的高通量测序(Next Generation Sequencing)技术，首次引入羟甲基化修饰的寡核苷酸接头，将DNA甲基化免疫共沉淀测序技术与亚硫酸氢盐处理测序技术相结合，从而将不含有甲基化修饰的DNA片段去除，即只对含有甲基化修饰的DNA片段进行亚硫酸盐处理，最终精确测定这些DNA片段上的甲基化修饰位点；该方法能够使测定全基因组水平的DNA甲基化修饰位点所需的数据量降至常规方法的1/10，从而降低测序成本和信息处理量，更高效地对全基因组DNA甲基化进行高通量测序。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 甲基化 dna 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种甲基化DNA的测序方法，其特征在于，包括如下步骤： 1)DNA样品的片段化； 2)将1)中得到的DNA片段与羟甲基化修饰的寡核苷酸接头连接； 3)富集步骤2)中的甲基化DNA片段； 4)将步骤3)中得到的产物中未甲基化的胞嘧啶碱基转化为尿嘧啶碱基； 5)将4)中的单链DNA通过引物进行扩增以获得双链DNA； 6)去除接头回收纯化DNA； 7)对步骤6)中获得的双链DNA进行测序。
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