本发明公开了一种丝氨酸羟甲基转移酶的突变体及其应用。所述的丝氨酸羟甲基转移酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示;突变发生于第19位、第310位、第138位、第168位、第363位以及第194位中的一位或多位;其中,对应各位点的突变分别为M19K、S310K、K138R、K168R、F363R和G194A。本发明通过对来源于铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa strain3Re2‑7的丝氨酸羟甲基转移酶进行定点突变改造,突变体提高了丝氨酸羟甲基转移酶的热稳定性和生成L‑丝氨酸的催化活力。