本发明属于工程菌及其应用技术领域，具体是涉及到一种大肠杆菌来源的酯酶、编码基因、重组菌和应用，酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本申请将具有能编码特定酯酶的基因插入到质粒中，得到重组菌，以此来催化底物醋酸可的松，使其水解，得到产物，反应条件温和，实现了微生物发酵催化醋酸可的松的21位酯的水解，为甾体类侧链的水解提供了另一种可能，本发明通过调节助溶剂重量及其含量等，转化率最高可达到98％，可以有效的降低成本，提高效益。
本申请涉及一种高产丁二酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。所述重组大肠杆菌是通过将大肠杆菌中iscS基因的启动子和RBS分别替换为pJ23119和RBS34得到，所述pJ23119和所述RBS34的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本申请采用CRISPR‑cas9基因编辑技术过量表达大肠杆菌iscS基因，通过将重组大肠杆菌中iscS的启动子和RBS分别替换为pJ23119和RBS34，更高表达强度的iscS能够促进硫化氢的产生，有助于维持大肠杆菌在厌氧条件下的细胞生长和存活，同时有利于丁二酸的积累。
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种莽草酸脱氢酶突变体、基因、表达载体、重组菌和应用，所述突变体是在SEQ ID NO.1所示的莽草酸脱氢酶序列的基础上，第61位、第241位的氨基酸中的一个或多个进行突变后得到；且所述莽草酸脱氢酶突变体相对于未突变的莽草酸脱氢酶，在生产莽草酸上，具有更高的效率；本发明减弱对莽草酸的逆向催化，提高莽草酸合成，减少副产物3‑脱氢莽草酸积累。
本发明属于甾体药物生物催化合成技术领域，具体涉及一种脱氢酶、基因、工程菌及应用，所述脱氢酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2，采用本发明的脱氢酶，脱氢活性较高，立体选择性和区域选择性强，无其他构象杂质生成；构建的工程菌，可以高效的分泌上述脱氢酶，有效的提高了底物的转化效率，特别是对于底物6‑甲格式物(11β,17α‑二羟基‑6α‑甲基孕甾‑1,4‑二烯‑3,20‑二酮)，成本低廉，工业化潜力显著；本发明的脱氢酶突变体理化性质明确，通过全细胞催化的方法，省去了酶纯化的繁琐步骤，降低成本、操作简便。
