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[发明专利]适用于barcode测序的转录组空间位置信息的检测方法及其应用-CN202210586945.0有效
发明人：曹罡;戴金霞;吴小凤;徐伟泽;王忠超;李月;王昊棋;高安然;张凌凯 -专利权人：鲲羽生物科技（江门）有限公司
申请日： 2020-11-18 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于barcode测序的转录组空间位置信息的检测方法及其应用，该方法通过杂交探针的设计、探针预处理、样品杂交、连接反应、滚环扩增，仅需4轮连接测序即可解读上万种基因的原位空间转录表达谱。依据其探针设计特点又可应用于点突变以及甲基化位点原位检测。可实现单细胞、单分子、单碱基分辨的高通量基因原位解读。该方法的信号解读不依赖超分辨成像平台，推动了高通量原位空间转录组的普及和发展。
适用于 barcode 转录空间位置信息检测方法及其应用

[发明专利]适用于原位检测连续多个核苷酸位点的测序方法及其应用-CN202310290116.2在审
发明人：曹罡;张凌凯;吴小凤;戴金霞 -专利权人：华中农业大学;鲲羽生物科技（江门）有限公司
申请日： 2023-03-23 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12Q1/6874 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于原位检测连续多个核苷酸位点的测序方法及其应用，该方法通过设计捕获靶向区域的半闭合锁式探针，通过连接酶填补探针上的空缺，经滚环扩增实现对待检未知序列的测序，多轮连接测序可解析X个待检碱基。依据其探针设计特点，可对未知核酸序列测序，能应用于肿瘤点突变检测、连续突变检测等。可实现单细胞、单分子、单碱基分辨率的基因序列原位解读。该方法可进行高通量组织原位检测，获得组织样本不同细胞的目标序列的原位空间谱图，无需进行高难度的体外寡量特异性细胞富集建库测序。且信号解读不依赖于超分辨成像平台，在个体发育、遗传育种、肿瘤微环境及临床病理检测等领域均有较好的应用前景。
适用于原位检测连续核苷酸方法及其应用

[发明专利]一种π-FISH+核酸探针组、原位杂交方法及其应用-CN202210759816.7有效
发明人：曹罡;戴金霞;周小六;陶影峰 -专利权人：华中农业大学;鲲羽生物科技（江门）有限公司
申请日： 2022-06-29 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开了一种π‑FISH+核酸探针组、原位杂交方法及其应用，所述π‑FISH+核酸探针组包括一级π型靶标探针、二级探针、三级探针、四级π型探针和信号探针。本发明设计的π‑FISH+核酸探针组克服了传统荧光原位杂交信号放大能力低、背景噪音大、只能检测长核酸序列等缺点，具有信号放大能力强、特异性高、效率高、背景噪音低等优点；本发明可以检测大于16个碱基的DNA或RNA核酸分子，可实现对长、短核酸序列定性、定量和定位的检测；另外，本发明设计的π‑FISH+核酸探针组可以精准地检测前列腺癌抗雄激素治疗耐药标志物雄激素受体剪接变体7(ARV7)，指导患者临床治疗，具有巨大的临床应用潜力。
一种 fish 核酸探针原位杂交方法及其应用

[发明专利]适用于中通量核酸空间位置信息的检测方法及其应用-CN202211334802.7在审
发明人：曹罡;戴金霞;王忠超;杨莉瑶;吴小凤;徐伟泽;李月;蔡怀源;高安然 -专利权人：华中农业大学;鲲羽生物科技（江门）有限公司
申请日： 2022-10-28 - 公布日： 2022-12-09 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于中通量核酸空间位置信息的检测方法及其应用，该方法首先设计出初级杂交探针，根据待检测细胞或组织的核酸种类数，设计Y×N条次级杂交探针，所述次级杂交探针与初级杂交探针中的锁式探针的部分区域互补连接；其中，Y×N数值需满足待检测细胞或组织的核酸种类数，进行N轮的荧光探针与靶基因杂交，解读每个组合两种荧光的共定位，确定空间上不同种类核酸分子的分布，该方法可通过N轮的杂交，达到了同时检测最多种核酸分子的目的，且信号强度高，信号的解读不依赖超分辨成像平台，实现了检测成本、检测轮数、检测通量和信号强度之间的平衡，推动了原位空间转录组的普及和发展。
适用于通量核酸空间位置信息检测方法及其应用

[发明专利]适用于高通量转录组空间位置信息的检测方法及其应用-CN202011291005.6有效
发明人：曹罡;戴金霞;吴小凤;徐伟泽;王忠超;李月;王昊棋;高安然;张凌凯 -专利权人：华中农业大学;鲲羽生物科技（江门）有限公司
申请日： 2020-11-18 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于高通量转录组空间位置信息的检测方法及其应用，该方法通过杂交探针的设计、探针预处理、样品杂交、连接反应、滚环扩增，仅需4轮连接测序即可解读上万种基因的原位空间转录表达谱。依据其探针设计特点又可应用于点突变以及甲基化位点原位检测。可实现单细胞、单分子、单碱基分辨的高通量基因原位解读。该方法的信号解读不依赖超分辨成像平台，推动了高通量原位空间转录组的普及和发展。
适用于通量转录空间位置信息检测方法及其应用

[发明专利]π-FISH定位单分子的探针组合物及其在核酸原位检测中的应用-CN202110280594.6有效
发明人：曹罡;戴金霞;陶影峰;周小六;林达;徐伟泽 -专利权人：华中农业大学;鲲羽生物科技（江门）有限公司
申请日： 2021-03-16 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及一种π‑FISH定位单分子的探针组合物及其在核酸原位检测中的应用，所述探针组合物由四步杂交的单链DNA探针组成，分别为一级π型探针、二级探针、三级探针和信号探针；本发明克服了传统荧光原位杂交，探针特异性不高、信号背景噪音大、操作复杂、步骤繁琐、信号放大能力低等缺陷，只需要简单的几步逐级放大探针杂交就能实现对细胞、组织中RNA或DNA核酸信息的原位、单分子检测，在精度、通量和成本上显著优于传统荧光原位杂交方法。
fish 定位分子探针组合及其核酸原位检测中的应用

[发明专利]运用于空间组学高密度信号分解稀疏解读的方法及其应用-CN202210115791.7在审
发明人：曹罡;李月;戴金霞;吴小凤;徐伟泽 -专利权人：华中农业大学;鲲羽生物科技（江门）有限公司
申请日： 2022-02-07 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明公开一种运用于空间组学高密度信号分解稀疏解读的方法及其应用，该方法将所有靶标分子分为锚定分子和N组稀疏分子，每轮通过连接测序的方式读取全部锚定分子和其中一组稀疏分子，直至N组稀疏分子读取完毕。通过N轮成像，有效地将无法解读的高密度靶标分子信号稀疏成N组低密度信号，再通过锚定分子配准将解读后的N组稀疏分子进行整合，确定高通量高密度的空间分布模式信息。该方法通过增加成像轮数，拆分、稀疏高密度图像，换取空间位置，解决荧光信号点光学拥挤和干扰问题，获取高密度信号点的空间位置，无需通过超分辨显微成像系统在单细胞水平实现高通量、高密度荧光信号的精准空间分辨的解析，打破目前的技术限制。
运用于空间高密度信号分解稀疏解读方法及其应用

[实用新型]一种水泥路面共振破碎机-CN202121395809.0有效
发明人：连振华;戴金霞 -专利权人：连振华
申请日： 2021-06-23 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： E01C23/12 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种水泥路面共振破碎机，属于工程机械、筑路机械及路面养护机械领域，主要包括车架、驾驶室、共振锤、发动机、锤头、配重储水箱、除尘降温喷嘴，驾驶室内安装有电脑显示屏、电脑控制中心，发动机连接有液压泵，液压泵连接有升降油缸、转向油缸、液压马达，共振锤与车架之间连接有减震垫，共振锤上方从下往上安装有下减震胶垫、阴阳增压器、上减震胶垫、压板，除尘降温喷嘴连接有高压空气水罐，降温除尘喷嘴分别安装在锤头处、下减震胶垫处、上减震胶垫处，本实用新型能够减少震动对传动轴等器件的损伤，提高锤头共振冲击力量，灵活调节配重，并且能够减少扬尘，降低共振破碎机工作时高温。
一种水泥路面共振破碎

[发明专利]DLO Hi-C染色体构象捕获方法-CN201610853896.7有效
发明人：曹罡;林达;李国亮;洪萍;闫科技;戴金霞;宋云峰;李亮;张冉;雷莹莹;何文波 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2016-09-27 - 公布日： 2019-11-19 - 主分类号： C12Q1/6823 文献下载
摘要：本发明公开了一种DLO Hi‑C染色体构象捕获方法，该技术克服了传统染色体构象捕获技术(Hi‑C)噪音大、成本高、实验过程繁琐、成功率低以及数据分析难度大等一系列缺陷，只需要简单的酶切酶连就可以进行实验。本发明的创新点在于:1)使用EGS和甲醛水溶液对目的细胞进行双交联，避免了后期实验过程中解交联的发生；2)实验过程中不需要生物素标记，很大程度上节约了成本；3)用时短，只需要进行简单的酶切酶连步骤，文库2天半时间就可以构建完成；4)数据噪音更小，用page胶通过片段大小选择来回收目的基因互作片段，测序所得数据基本上都是有效数据；5)首次的提出文库质量评价标准，在高通量测序之前就可以判断文库的质量。
dlohi 染色体构象捕获方法

[发明专利]用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法-CN201610436290.3有效
发明人：曹罡;杨芳;周美玲;雷莹莹;姚琪利;韩以超;朱成航;伍享;戴金霞;宋云峰;陈西;曾思华;傅振芳 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2016-06-17 - 公布日： 2019-07-05 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
用于通量酵母双杂交技术重组载体及其大规模筛选蛋白方法

[发明专利]狂犬病毒DRV-AH08株的先导RNA及其在制备预防与治疗狂犬病毒的药品中的应用-CN201610191332.1有效
发明人：曹罡;张冉;刘传刚;傅振芳;戴金霞;曹云兹;曾思华 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2016-03-30 - 公布日： 2019-02-26 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种狂犬病毒DRV‑AH08株的先导RNA及其在制备预防与治疗狂犬病毒的药品中的应用。首先我们确定了先导RNA的长度，选用出现频率最高的64nt长度的先导RNA进行后续试验，我们发现在细胞内和鼠脑内过表达先导RNA，均能抑制狂犬病毒的复制。同时，在已经感染了狂犬病毒的细胞内过表达先导RNA，能明显抑制狂犬病毒的复制；而在已经感染了狂犬病毒的小鼠上过表达先导RNA，能明显推迟小鼠发病时间，并明显提高小鼠存活率。综上所述，先导RNA不仅在狂犬病的预防方面有潜在的应用价值，还在狂犬病暴露后治疗中有巨大的药用价值。
狂犬病毒 drv ah08 先导 rna 及其制备预防治疗药品中的应用

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