本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体、工程菌及其在降解纤维素中的应用,所述β‑葡萄糖苷酶突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸序列第20位或第240位进行定点突变获得的。本发明突变酶的比活力比野生酶显著提高1.5倍及以上。以内切葡聚糖苷酶、外切葡聚糖苷酶、裂解多糖单加氧酶与突变酶的混合液为催化剂时,葡萄糖产率较野生酶提高了15%‑25%。
本发明涉及一种新型耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及突变体,及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖(D‑psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,该突变体具有超高酶活和底物转化率,最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L,反应温度为85℃时,产物得率最高达67.14%。将重组酶进行固定化并连续催化300批次,转化率均大于67%。本发明解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑psicose工业化水平具有重要意义。