[发明专利]一种高效合成血红素的毕赤酵母重组菌株的构建在审
| 申请号： | 202210656237.X | 申请日： | 2022-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN114874929A | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 王紫微;赵鑫锐;周景文;余飞;堵国成;陈坚;李江华 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/52;C12P17/18;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 合成 血红素 酵母 重组 菌株 构建 | ||
1.一种重组菌，其特征在于，利用毕赤酵母表达碳端第2-71个氨基酸截短的血红素合成关键酶基因△70hem14和/或△70hem15。
2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌还抑制了毕赤酵母基因组中ku70基因的表达。
3.根据权利要求1或2所述的重组菌，其特征在于，所述△70hem14的核苷酸序列如SEQID NO.4所示，所述△70hem15的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述ku70基因的GeneID:8199462。
4.根据权利要求1～3任一项所述的重组菌，其特征在于，所述毕赤酵母也可替换为其它同源性接近的酵母属菌种，包括但不限于毕赤酵母突变株。
5.根据权利要求1～4任一项所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌以pGAPZαA为表达载体，以毕赤酵母X33为宿主。
6.一种生产血红素的方法，其特征在于，利用权利要求1～5任一项所述重组菌发酵生产血红素。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述发酵生产的培养基包括但不限于YNB、YPD、BMM或BMMY培养基，培养基中含有终浓度为100～200mg/L ALA和10～30mg/L Fe2+。
8.一种提高血红素产量的方法，其特征在于，所述方法为以毕赤酵母为宿主，敲除毕赤酵母基因组中ku70基因，并表达碳端第2-71个氨基酸截短的血红素合成关键酶基因△70hem14和/或△70hem15。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述ku70基因的GeneID:8199462；所述△70hem14的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述△70hem15的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
10.权利要求1～5任一项所述重组菌，或权利要求8或9所述的方法在制备血红素或其衍生物中的应用。
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