[发明专利]共生菌组合物及其制备方法和微藻的培养方法

权利要求书

1.一种共生菌组合物，其特征在于，由海洋丁酸梭菌(Clostridium butyricum)、海洋红酵母(Phaffia rhodozyma)和海洋紫色非硫细菌(Rhodobium marinum)组成；

海洋丁酸梭菌、海洋红酵母与海洋紫色非硫细菌的活菌数比例为(2～4)：(5～7)：(1～3)。

2.一种共生菌组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将海洋丁酸梭菌菌种接种于第一培养基进行第一培养，得到海洋丁酸梭菌菌液；

将海洋红酵母菌种接种于第二培养基进行第二培养，得到海洋红酵母菌菌液；

将海洋紫色非硫细菌菌种接种于第三培养基进行第三培养，得到海洋紫色非硫细菌菌液；

将海洋丁酸梭菌菌液、海洋红酵母菌菌液和海洋紫色非硫细菌菌液混合，得到共生菌组合物。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述第一培养基的配方为：

第一培养的条件为：转速500～700rpm，温度30～35℃，培养时间24～30h；

第一培养的接种量为5％-20％；

所述第二培养基的配方为：

第二培养的条件为：转速1000～1500rpm，温度32～35℃，培养时间24～30h；

第二培养的接种量为5％-20％；

所述第三培养基的配方为：

第三培养的条件为：转速100～150rpm，温度28～35℃，培养时间48～72h；

第三培养的接种量为20％-30％。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，海洋丁酸梭菌菌液、海洋红酵母菌菌液与海洋紫色非硫细菌菌液的体积比例为(0.2～20)：(0.5～50)：(0.1～10)。

5.权利要求2至4中任一项所述制备方法制得的共生菌组合物。

6.一种混合共生菌菌液，其特征在于，其制备方法为：静置培养权利要求5所述的共生菌组合物，得到混合共生菌菌液。

7.根据权利要求6所述的混合共生菌菌液，其特征在于，所述静置培养的条件为：光照强度1000～4000lux，温度25～40℃，光暗比2:1，湿度10％～30％RH，培养时间为20～50h。

8.一种微藻的培养方法，其特征在于，将微藻、权利要求6或7所述混合共生菌菌液接种于微藻培养液中进行共培养。

9.根据权利要求8所述的培养方法，其特征在于，所述微藻培养液的配方为：硝酸钠400～500g，磷酸二氢钾80～100g，EDTA-2Na 8～10g，六合水三氯化铁40～50g，冰乙酸500～600mL，清洁海水1吨；

微藻与微藻培养液的接种比例为1:(500～2000)(V/V)；

混合共生菌菌液与微藻培养液的接种比例为1:(5000～10000)(V/V)。

10.根据权利要求8或9所述的培养方法，其特征在于，共培养的条件为：温度25-45℃，光照度5000-25000lux，培养时间24-72h；

所述微藻为海水小球藻、硅藻、微拟球藻、卵囊藻中的一种或几种。